金钱草的质量控制现状及质量标志物预测分析

金钱草含有黄酮类、苷类、鞣质、挥发油、氨基酸等多种活性成分,具有利胆利尿、排石、抑菌、抗炎、抗感染等药理作用,且中药种质资源丰富,具有较好的开发潜力。概括了金钱草当前的质量控制现状,并基于质量标志物(Quality marker,Q-Marker)的概念从植物名称关系、药用配伍、传统功效、传统药性、可预测化学成分、新的功效、不同产地等7个方面进行预测分析。得出可将绿原酸、芦丁、槲皮素-3-O-葡萄糖苷、异鼠李素等化学有效成分作为金钱草的质量标志物的预测成分,以期为金钱草的质量控制研究及建立质量标准提供参考。

微性状鉴定法在医疗机构中药饮片质量验收中的应用

目的针对易混淆中药饮片采用微性状鉴定法进行鉴别,研究其在医疗机构饮片验收中的应用价值。方法采用微性状鉴定法,借助相关仪器,以花、果实、种子、全草、根与根茎、茎、其他等不同入药部位为分类对10组31种易混淆中药表面肉眼和普通放大镜无法观察到的微观特征进行分析、归纳和总结,并拍照留存。结果观察到10组31种易混淆中药谷精草、华南谷精草、毛谷精草、枳壳、常山胡柚、木瓜、毛叶木瓜、紫苏子、白苏子、野生紫苏、沙苑子、华黄芪、卷柏(卷柏)、卷柏(垫状卷柏)、江南卷柏、深绿卷柏、翠云草、金钱草、点腺过路黄、广金钱草、绵马贯众、狗脊蕨贯众、苏铁蕨贯众、猫人参、藤梨根、雷公藤、野葡萄根、五灵脂、夜明砂、望月砂和蚕砂的微性状特征,发现各类中药具有独特的鉴别特征,花类中药可研究色泽、组织构造及表面特征(如纹理、毛被等);果实类可研究果皮结构、色泽、发达程度及外层特征(如角质层、蜡被等);种子类可研究形态、大小、色泽与纹理;全草类可研究叶的长宽比、最宽处、表面特性与分裂情况,以及茎的茸毛、气孔等;根与根茎、茎类中药可研究皮部、木部构造及维管束或导管的形态与排列,其他类别可从源头入手,借助微观镜头发现其特有微性状鉴别特征。结论微性状鉴定法作为传统性状鉴别的补充,能提高中药饮片鉴定的准确性,该方法经济实用、简便易行且结果直观,可作为一项常用的中药鉴定方法在医疗机构中推广普及,是实现中药快速检验的可行方案。

不同方法提取的金钱草叶挥发油化学成分的GC-MS分析

[目的]研究水蒸气蒸馏法和溶剂萃取法提取金钱草鲜草与干草叶中挥发油成分。[方法]采用气相色谱-质谱法(GC-MS)对金钱草鲜草与干草叶中挥发油成分进行分析,并采用峰面积归一法确定各组分的相对含量。[结果]采用水蒸气蒸馏法从金钱草鲜叶和干叶所得挥发油中分别鉴定出了19和14种化合物,采用溶剂萃取法从金钱草鲜叶和干叶所得挥发油中分别鉴定出了20和11种化合物。用两种方法提取的挥发油中化学成分的组成不同。水蒸气蒸馏法提取的挥发油中,相对含量最高的成分都为β-香叶烯(鲜叶和干叶中分别达到39.67%和42.80%),而用溶剂萃取法提取的挥发油中,相对含量最高的都为邻苯二甲酸二乙酯(鲜叶和干叶中分别达到18.05%和28.64%)。[结论]不同的提取方法所得金钱草挥发油的化学成分不同,且不同的预处理方式对挥发油的成分也会产生影响。

广金钱草与金钱草指纹图谱比较

目的:建立HPLC指纹图谱方法鉴别广金钱草与金钱草药材;方法:以ODS-C_(18)5μm,250mm×4.6mm色谱柱,水(A) -乙腈(B)为流动相,梯度洗脱方式:0～15min,保持85%A,15→60min,85%A→78%A,流速0.7mL·min^(-1),柱温30℃,进样量30μL,检测波长215,270,340nm;结果:广金钱草可得到以异牡荆素为参照的11个指纹峰,金钱草可得到以槲皮素为参照10个指纹峰进行比较;结论:通过指纹图谱方式,可针对性地鉴别广金钱草和金钱草。

植物多酚复配物对水包油型膏霜化妆品抗氧化性能的影响

基于水包油型膏霜化妆品的抗氧化性能测试,研究多酚复配物的配比及在各种不同的外界条件下复配物对化妆品过氧化值的影响;同时考察了复配物配比对羟基自由基清除能力的影响。将膏霜化妆品溶液分别经过紫外光照射、加热到不同温度和添加0.1 mol.L-1MnCl2的条件下各6 h后与添加V(路边青)∶V(过路黄)=2∶1的植物多酚复配物以及添加合成抗氧化剂2,6-二叔丁基对甲酚的同样膏霜化妆品溶液测定过氧化值进行比较。结果表明,加入植物多酚的抗氧化效果较佳,羟基自由基清除率也较大,复配物的抗氧化活性优于合成抗氧剂2,6-二叔丁基对甲酚。

金钱草对食饵性胆色素结石的防治作用

目的 :研究金钱草乙酸乙酯提取物 (EthylacetateextractfromHerbaLysimachiae ,EA)利胆排石的作用及其机理。 方法 :采用对正常大鼠胆汁分泌的影响研究EA的利胆作用 ,采用致石饲料喂养豚鼠制成胆色素结石模型的方法来研究EA对胆色素结石的防治作用 ,并通过对动物的胆汁和血清成分分析其防石的机理。结果 :EA能显著促进大鼠胆汁分泌 ,减少胆色素结石的成石率 ,且能调整和维持胆汁成分比例及动物体内代谢的正常化。结论 :EA是金钱草利胆排石的起效部位 ,它通过调节胆汁成分和血清血脂达到防治胆色素结石的作用 ,这可能是其排石作用的机制。

HPLC法测定金钱草中槲皮素和山柰素含量

目的:建立金钱草中槲皮素和山柰素的HPLC含量测定方法。方法:色谱柱为Diamond ODS柱;流动相为甲醇-0.45%磷酸溶液(50∶50);检测波长为366nm。结果:槲皮素在0.04724～0.2362μg范围内,山柰素在0.1424～0.4272μg范围内线性关系良好,平均加样回收率值分别为99.8%和99.9%,RSD分别为1.39%和1.48%。结论:本方法灵敏、准确,重现性好,为金钱草药材的质量控制提供了依据。

金钱草总黄酮对草酸钙结晶肾损伤的作用机制

目的:探讨金钱草总黄酮对一水合草酸钙(COM)诱导肾小管上皮细胞凋亡所致肾损伤的影响及其机制。方法:应用不同浓度COM处理肾小管上皮细胞(HK-2)建立体外泌尿系结石细胞模型,将肾小管上皮细胞分为对照组、金钱草总黄酮处理组(TF组)、P38丝裂原活化蛋白激酶(p_38/MAPK)抑制组(SB组)、COM处理组(COM组)、COM和金钱草总黄酮处理组(CTF组)、COM和p_38/MAPK抑制组(CSB组)6组,WST-1法检测细胞存活率,Western blot检测人肾损伤分子(KIM-1)、(p-p)_38、p_38、自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的表达,流式细胞术检测不同处理组的细胞凋亡数。结果:COM浓度为0.5、1、2、5 mmol/L时,细胞存活率分别为(85.02±5.50)%、(70.27±3.78)%、(58.09±3.23)%、(42.56±4.13)%,较对照组(99.83±3.65)%降低(P<0.05)。在COM处理的肾小管上皮细胞中,随着时间的增加,KIM-1、(p-p)_38及LC3-Ⅱ表达增加。COM可诱导HK-2细胞过度自噬和凋亡,CSB组细胞凋亡率较COM组降低[(7.91±0.70)%vs(29.90±1.07)%,P<0.05]。CSB组LC3-Ⅱ表达较COM组降低[(0.52±0.04)vs(1.17±0.04),P<0.05]。CTF组(p-p)_38蛋白水平较COM组降低[(0.66±0.06)vs(1.01±0.06),P<0.05]。随着金钱草总黄酮浓度的增加,HK-2细胞存活率也逐渐增加。CTF组细胞凋亡率较COM组降低[(10.54±1.07)%vs(29.90±1.07)%,P<0.05]。CTF组LC3-Ⅱ表达较COM组降低[(0.82±0.10)vs(1.17±0.04),P<0.05]。结论:金钱草总黄酮可通过阻断p_38/MAPK通路抑制肾小管上皮细胞的过度自噬和凋亡,减少肾小管上皮细胞的损伤,从而抑制泌尿系结石的形成。

金钱草抗炎利胆有效部位研究

目的:寻找金钱草抗炎利胆有效部位。方法:采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验和醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高实验对金钱草各提取部位进行了抗炎活性筛选,用小鼠及大鼠胆汁分泌实验进行利胆活性筛选。结果:金钱草醇提物和乙酸乙酯提取物能显著抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀和醋酸所致的小鼠腹腔毛细血管通透性亢进,明显促进小鼠和大鼠胆汁的分泌。结论:乙酸乙酯提取部分可能是金钱草抗炎利胆的有效部位。

基于网络药理学预测金钱草治疗泌尿系结石的作用机制

【目的】基于网络药理学预测金钱草治疗泌尿系结石的作用机制。【方法】通过中药系统药理学技术平台(TCMSP)检索金钱草化学成分,通过SwissTargetPrediction数据库得到金钱草的预测靶点,通过GeneCards数据库获取泌尿系结石相关靶点,将金钱草的预测靶点与泌尿系结石相关靶点进行映射得到金钱草治疗泌尿系结石的预测靶点。通过Cytoscape 3.6.0软件,生成金钱草治疗泌尿系结石的蛋白质相互作用(PPI)网络。通过DAVID网站京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析,运用systems Dock网站对预测靶标与其对应的成分进行分子对接。【结果】金钱草活性化合物有9种,筛选出金钱草可能与泌尿系结石相关的靶点21个,关键靶点共8个,包括表皮生长因子受体(EGFR)、雌激素受体α(ESRα)、醛糖还原酶(AR)、表皮生长因子受体2(ERBB2)等。通过KEGG通路分析得到126条通路,结合文献检索,筛选出金钱草治疗泌尿系结石的可能通路为8条,主要分两类:①泌尿系炎症及黏膜相关通路:磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路、血趋化因子信号通路、核因子E2相关因子2/Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Nrf2/Keap1)信号通路、p38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)信号通路、酪氨酸激酶/信号转导和转录激活子(JAK/STAT)信号通路等;②尿钙相关通路:核因子κB(NF-κB)信号通路、辣椒素受体5(TRPV5)信号通路。【结论】金钱草治疗泌尿系结石的作用机制可能与调节炎症及黏膜相关通路、尿钙相关通路有关,但对已有结石成分破坏及分解尚无明确结论。

大孔树脂对零陵香总黄酮的富集与纯化工艺研究

目的:研究用大孔树脂富集与纯化零陵香总黄酮工艺条件,为建立质量评价指标和中药药效组分新药研究奠定基础。方法:通过静态吸附和解吸附方法筛选大孔树脂,通过动态单因素考察确定零陵香总黄酮富集与纯化工艺。结果:D101大孔树脂对零陵香总黄酮有良好的富集纯化效果。其动态富集纯化工艺条件为:零陵香总黄酮上样浓度为1 g/mL,树脂和药液的体积比为1∶1,吸附流速为1 mL/min,用3 BV50%的乙醇以1 mL/min的流速洗脱,零陵香总黄酮的纯度由1.2%提高到18.4%。结论:D101大孔树脂用于零陵香总黄酮的富集与纯化,可提高纯度15倍。

复方金钱草减轻小鼠草酸钙结晶肾损伤的实验研究

目的:探讨复方金钱草对小鼠草酸钙结晶肾损伤的作用及可能的作用机制。方法:24只C57 BL/6小鼠按随机数字表法随机分为对照组(A组)、单纯结晶组(B组)、复方金钱草干预组(C组),每组8只。B组:给予100 mg/kg乙醛酸盐;C组:给予100 mg/kg乙醛酸盐+20 ml/kg复方金钱草浸膏;A组:给予100 mg/kg的生理盐水,在连续给药7 d后,检测各组小鼠血生化指标,肾组织钙含量水平,光镜下观察各组小鼠肾组织切片中草酸钙结晶体分布及组织病理改变,免疫组化及免疫荧光染色对TRPV5、Calbindin-D28进行定位分析,Western Blot法检测各组肾组织中TRPV5、Calbindin-D28k的含量。结果:与单纯结晶组相比,复方金钱草干预组小鼠血清尿素氮(BUN)及肌酐(Scr)水平、肾组织钙含量显著下降(P<0.05),肾组织草酸钙结晶沉积及肾脏病理组织损伤均显著减轻(P<0.05),但肾脏TRPV5及Calbindin-D28k表达量均强于单纯结晶组(P<0.05)。结论:复方金钱草可能通过上调肾脏TRPV5及Calbindin-D28k表达量从而减少了肾小管内钙盐结晶体的形成,起到了保护肾脏的作用。

中药“四金”治疗泌尿系结石的研究进展

综述海金沙、金钱草、鸡内金、郁金("四金")4味药物的研究进展及其组方配伍治疗泌尿系结石的相关文献报道,以明确中药"四金"治疗泌尿系结石的作用机制,更好地指导临床用药。

利尿消炎合剂的薄层色谱鉴别

目的研究利尿消炎合剂的定性质量标准。方法采用薄层色谱法鉴别利尿消炎合剂中黄柏、金钱草、黄芩等成分。结果制剂中黄柏、金钱草、黄芩等成分的薄层色谱斑点清晰、专属性强。结论该法专属性强、可靠、简单、准确,重现性好,可用于控制利尿消炎合剂的药品质量。

RP-HPLC法同时测定金钱草和广金钱草中绿原酸、槲皮素和山柰酚的含量

目的建立同时测定金钱草和广金钱草中绿原酸、槲皮素和山柰酚含量的RP-HPLC方法。方法色谱柱为Dikma Diamonsil TMC18柱（250mm×4.6mm,5μm）;流动相为甲醇-4mL·L-1甲酸,梯度洗脱;流速为1.0mL·min-1;检测波长360nm。结果绿原酸、槲皮素和山柰酚的线性范围分别为42.08~84.16ng（r=0.999 8）,19.13~382.68ng（r=0.999 5）和16.96~339.20ng（r=0.999 5）,平均加样回收率分别为99.91%,97.92%和99.31%,方法精密度RSD分别为1.6%,1.4%和1.6%（n=6）。结论该方法快速、简便、准确度高、重复性好、专属性强,可用于金钱草和广金钱草的质量控制。

基于GC-MS技术的金钱草干预结晶肾损伤小鼠血清代谢组学研究

目的 利用血清代谢组学方法监测结晶肾损伤相关的代谢变化,评价金钱草提取物治疗结晶肾损伤的作用。方法 将21只野生型C57BL/6小鼠随机分为3组:空白对照组、结晶肾损伤模型组和金钱草干预组。采用乙醛酸盐诱导小鼠结晶肾损伤模型,给予6 d相应的治疗后,取小鼠血清进行气相色谱-质谱联用仪分析,结合模式识别筛选模型组和对照组之间的差异代谢物,并以此评价金钱草的治疗作用。结果 血清代谢组学分析鉴定了14种结晶肾损伤相关的生物标志物,包括嘌呤代谢物、氨基酸代谢物、脂肪酸代谢物等,同时数据显示金钱草提取物对结晶肾损伤有改善作用。结论 金钱草提取物能够通过调节失衡的嘌呤代谢、氨基酸代谢、糖代谢等途径而发挥预防和治疗结晶肾损伤作用。

金芪降纤保肝颗粒对大鼠肝纤维化治疗作用的实验研究

目的探讨金芪降纤保肝颗粒对大鼠实验性肝纤维化的治疗作用。方法以四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝实质损伤性肝纤维化模型。将大鼠随机分为3组,分别为金芪降纤保肝颗粒治疗组、模型组和空白对照组。除空白对照组外,其余2组以40%CCl4橄榄油混合液皮下注射制备大鼠肝纤维化模型。于造模第4周起治疗组予金芪降纤保肝颗粒灌胃,空白对照组和模型组予0.9%氯化钠注射液灌胃,均连续用药8周,观察各组肝纤维化指标、肝功能指标及肝组织病理的变化。结果①与模型组相比,治疗组血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)明显低于模型组(P<0.05),白蛋白水平显著升高(P<0.05),球蛋白水平显著下降(P<0.05);②治疗组大鼠血清肝纤维化指标明显低于模型组(P<0.05);③光镜观察治疗组肝组织病理明显改善(P<0.05)。结论金芪降纤保肝颗粒能延缓已形成的肝纤维化的进展,有明显的肝细胞保护作用,对40%CCl4诱导的大鼠实验性肝纤维化有良好的治疗作用。

利胆排石片与金钱草片中金钱草替以广金钱草或聚花过路黄后对大鼠尿液、胆汁排出量的影响研究

目的研究利胆排石片、金钱草片中金钱草替以广金钱草或聚花过路黄后对大鼠尿液、胆汁排出量的影响。方法以广金钱草、聚花过路黄替代利胆排石片、金钱草片中的金钱草,制备成相应的药物,给大鼠一次性灌胃给药,采用大鼠代谢笼法,分别记录给药后动物在1、2、3、4、5、6 h的尿液量及6 h内尿液总量;采用胆汁引流法,于动物一次性灌胃给药后,每30 min收集并记录1次胆汁排出量,连续收集3 h,采用t检验,比较各组间尿液与胆汁排出量的差异性。结果与空白组比较,各药物组在6 h内排出的尿液总量明显增加(P<0.01),但尿液明显增加的具体时间各异;与LDPS组比较,LDPS-G组、LDPS-JH组在6 h内尿液总量无明显变化,LDPS-G组尿液量第1 h明显减少(P<0.01),第5、6 h明显增加(P<0.05);与JQC组比较,GJQC组、JHGLH组在6 h内尿液总量无明显变化,GJQC组在第1 h尿液排出量明显增加、第5 h尿液排出量明显减少(P<0.01)。与空白组比较,各药物组在用药30 min后至3 h内的各时间段胆汁排出量都有明显增加(P<0.05或P<0.01);与LDPS组比较,LDPS-G组在给药后的第5、6个30 min胆汁排出量明显减少(P<0.05);与JQC组比较,JHGLH组在给药后30 min内胆汁排出量明显增加(P<0.05)。结论利胆排石片、金钱草片及其组方中金钱草替以广金钱草与聚花过路黄后都呈现出明显的利尿、利胆作用;以金钱草为君药,以防治胆石症为主要疗效的复方中,以广金钱草代替金钱草会降低其疗效,但是以防治尿石症为主要疗效的,用广金钱草替代后可能通过促进尿液的排出增强其疗效;广金钱草利尿作用显效较快,但维持时间较短;聚花过路黄利尿、利胆作用与金钱草类似,可以进一步在临床开展小范围的对照研究,为后期开发提供临床资料。

高效液相色谱法测定小叶金钱草中槲皮素和山奈素的含量

目的:建立用高效液相色谱(HPLC)法测定小叶金钱草中槲皮素和山奈素含量的方法。方法:采用AlltimaC18(150mm×4.6mm,5μm)柱,以甲醇-水-磷酸(500:500:1)为流动相,流速:1.0mL.min-1,检测波长为360nm柱温:30℃。结果:该法线性关系良好,槲皮素平均回收率为95.42%,RSD为3.11%;山奈素平均回收率为100.5%,RSD为0.978%。结论:该方法简便、准确、重现性好,可用于小叶金钱草的质量控制。

金钱草联合中成药治疗胆囊结石临床研究

目的:观察金钱草联合中成药治疗胆囊结石的临床疗效。方法:将确诊为胆囊结石的90例患者按随机数字表法分为结合治疗组、对照组各45例。2组均予以熊去氧胆酸胶囊治疗,结合治疗组在此基础上加予胆石利通片、消炎利胆片、金钱草水煎剂治疗,共治疗4周。记录2组治疗前后胆囊收缩素(CCK)、血管活性肠肽(VIP)水平及结石个数、结石直径,比较2组临床疗效。结果:与治疗前比较,2组血清CCK水平升高,VIP水平降低,胆囊结石个数减少、结石直径缩小(P<0.05)。治疗后,结合治疗组较对照组CCK水平升高更显著,VIP水平降低更显著,结石个数减少、结石直径缩小更显著(P<0.05)。对照组总有效率为86.67%,结合治疗组为97.78%,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:金钱草联合中成药治疗胆囊结石效果显著,能够有效减轻患者的临床症状,减少其结石个数及缩小结石直径,可能与降低VIP水平、提高CCK水平有关。