吕梁黑山羊成纤维细胞培养过程中霉菌污染的清除

为建立和完善细胞在体外培养过程中清除霉菌污染的方法,挽救珍贵的细胞资源,试验在被霉菌污染的吕梁黑山羊耳缘成纤维细胞培养液中分别添加2.5,25,250μg/mL的两性霉素B,每天洗涤、换液一次,连续处理14 d,比较不同浓度药物的清除效果。结果显示,细胞培养液中添加25μg/mL的两性霉素B后,细胞中无霉菌生长,细胞生长良好,药物处理过程中可正常传代,处理后细胞生长曲线与对照组细胞无明显差异。说明细胞培养液中添加25μg/mL两性霉素B既能清除霉菌污染又不会对细胞造成影响,该浓度是清除霉菌污染适宜的质量浓度。

日粮中不同粗饲料对吕梁黑山羊生长性能、血液生化指标和屠宰性能的影响

为了探究日粮中不同粗饲料对吕梁黑山羊生产性能、血液生化指标和屠宰性能的影响,试验选取6月龄、体重相近、健康、已去势的吕梁黑山羊公羊24只,随机分为4组(A、B、C、D组),每组6只,分别饲喂以玉米秸秆、花生秧、苜蓿干草、羊草为粗饲料,精粗比为6∶4的全混合日粮,预试期10 d,正试期80 d,测定各组生长性能(初重、末重、平均日增重、平均日采食量和料重比)、血液生化指标(血糖浓度,血清总蛋白、白蛋白、球蛋白水平,血清丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶活性,以及血清尿素氮、三酰甘油和总胆固醇浓度)、屠宰性能(宰前活重、胴体重、屠宰率和净肉率)。结果表明:各组初重均差异不显著(P>0.05)。C组末重最高,略高于B组和D组(P>0.05),显著高于A组(P<0.05);B组和D组末重显著高于A组(P<0.05)。C组平均日增重最高,极显著高于其他3组(P<0.01);B组、D组平均日增重极显著高于A组(P<0.01)。C组平均日采食量最低,略低于B组和D组(P>0.05),显著低于A组(P<0.05);B组和D组平均日采食量显著低于A组(P<0.05)。C组料重比最低,极显著低于其他3组(P<0.01);B组和D组料重比极显著低于A组(P<0.01)。C组血糖浓度最高,略高于B组和D组(P>0.05),显著高于A组(P<0.05);B组和D组血糖浓度显著高于A组(P<0.05)。C组血清总蛋白与球蛋白水平均极显著高于其他3组(P<0.01);B组和D组血清总蛋白与球蛋白水平极显著高于A组(P<0.01)。C组血清白蛋白水平最高,略高于B组(P>0.05),极显著高于A组与D组(P<0.01);B组血清白蛋白水平极显著高于A组与D组(P<0.01);D组血清白蛋白水平极显著高于A组(P<0.01)。各组血清丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶活性,尿素氮、三酰甘油、胆固醇浓度均差异不显著(P>0.05)。C组宰前活重最高,略高于B组和D组(P>0.05),显著高于A组(P<0.05);B组和D组宰前活重显著高于A组(P<0.05)。屠宰后C组胴体重最高,略高于B组、D组(P>0.05),显著高于A组(P<0.05)。各组屠宰率和净肉率均差异不显著(P>0.05)。说明在本试验条件下,饲喂以苜蓿干草为粗饲料的全混合日粮对改善吕梁黑山羊生产性能、屠宰性能和血液生化指标方面的效果最好,花生秧和羊草效果较好,玉米秸秆效果最差。

吕梁黑山羊成纤维细胞培养过程中支原体污染的快速发现及去除

为了快速发现细胞培养过程中的支原体污染,并在污染发生早期有效去除,从而挽救细胞。以吕梁黑山羊耳缘成纤维细胞为研究对象,通过显微镜直接观察法、DNA荧光染色法结合检测细胞,可在1 h内快速发现细胞是否存在支原体污染。对疑似支原体污染的试验组细胞使用25μg/mL支原体抗生素(Plasmocin)连续处理14 d,再通过上述2种方法和PCR法结合检测细胞中是否仍存在支原体污染,绘制药物处理后试验组细胞的生长曲线。结果表明,支原体污染早期,用25μg/mL Plasmocin连续处理试验组细胞14 d后,高倍显微镜下细胞形态恢复,荧光试剂Hoechst 33342染色观察试验组细胞和对照组细胞均只见胞核,核外未见散在荧光,PCR未检测到支原体,药物处理后试验组细胞生长曲线正常。说明细胞已恢复正常生长,支原体抗生素Plasmocin可有效去除细胞培养中早期支原体污染。