吴茱萸碱联合CDK1抑制剂RO3306对鼠结肠癌CT26的协同杀伤作用

目的:探讨吴茱萸碱(EVO)联合CDK1的特异抑制剂RO3306对鼠结肠癌细胞CT26的生长抑制、诱导凋亡是否有协同增效作用.方法:采用MTT法求出EVO对CT26作用24h的IC50及诱导CT26细胞发生不可逆凋亡的时间点,比较EVO和RO3306同时用药与序贯用药(EVO先作用24h,再加入RO3306共同作用6h)对CT26细胞的抑制作用.采用金正均q值法检验其联合作用是否有协同性(q为实际药效与理论药效比值,q>1.15为协同性).同时用药实验与序贯用药实验的分组情况均为对照组、2mg/LEVO组,4mg/LEVO组,15mg/LRO3306组(加药时间同相应联合组),2mg/LEVO+15mg/LRO3306联合组,4mg/LEVO+15mg/LRO3306联合组.采用克隆集落形成法检测药物单独和联合作用下对CT26细胞的抑制率.采用流式细胞术检测药物作用对CT26凋亡率的影响.结果:MTT法结果显示EVO对结肠癌细胞CT26具有显著抑制作用,其抑制作用有明显的浓度依赖性,作用24h的IC50为10.8mg/L;EVO诱导CT26细胞进入不可逆凋亡的时间点在24h左右.MTT检测EVO和RO3306序贯用药的各组抑制率依次分别是22.0%±4.4%、30.4%±3.2%、12.3%±4.8%、48.0%±3.2%、62.2%±2.2%(序贯用药联合组q=1.52,1.60>1.15,同时加药联合组q=0.68,0.72).克隆集落形成法显示相应各组的抑制率依次分别是9.7%±5.8%、38.9%±3.8%,10.8%±3.7%,29.8%±10.7%,68.3%±12.7%(q>1.15).流式细胞术显示各组细胞凋亡率依次分别是5.5%±1.1%,18.3%±1.9%,25.6%±1.5%,9.2%±1.1%,39.1%±9.8%,54.6%±1.2%(q>1.15).结论:EVO能抑制鼠结肠癌细胞CT26的生长,其作用呈剂量依赖关系,EVO诱导CT26发生不可逆凋亡的时间点约在24h左右;EVO联合CDK1抑制剂RO3306并序贯用药对CT26的抑制作用具有协同增效效应,同时加药联合作用未显示协同性.