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Insecticidal Potential of α-Pinene and β-Caryophyllene against Myzus persicae and Their Impacts on Gene Expression 被引量:1
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作者 Talha Ali Chohan Tahir Ali Chohan +9 位作者 Muhammad Zahid Mumtaz Muhammad Waqar Alam Salah ud Din Iqra Naseer Ayesha Riaz Tayyeba Naseem Areeba Iftikhar Dur ENajaf Ali Mubashir Hassan Hayssam M.Ali 《Phyton-International Journal of Experimental Botany》 SCIE 2023年第7期1943-1954,共12页
Myzus persicae(M.persicae)is now considered a threat to agricultural crops due to economic losses.Numerous synthetic insecticides applied every year against M.persicae,are reported to be unsafe for environment,humans,... Myzus persicae(M.persicae)is now considered a threat to agricultural crops due to economic losses.Numerous synthetic insecticides applied every year against M.persicae,are reported to be unsafe for environment,humans,and beneficial insects.Furthermore,several species of Myzus have been found to develop resistance due to over application of these insecticides.Therefore,it is required to find some novel insecticide that would be safe for the environment as well as for humans.In the current study,two major pure constituentsα-pinene andβ-caryophyllene were evaluated for their insecticidal potential against M.persicae using a fumigant toxicity assay.Furthermore,impact ofα-pinene andβ-caryophyllene on expression of five different genes,e.g.,HSP 60,FPPS I,OSD,TOL and ANT responsible for reproduction,dispersion,and growth of M.persicae has also been investigated.To perform fumigant toxicity assay,five different concentrations(3.5,4,4.5,5 and 6μL L−1)ofα-pinene andβ-caryophyllene were prepared.Lethal concentration(LC)was calculated,and gene expression studies were executed through qRT PCR at LC30 ofα-pinene andβ-caryophyllene.Both constituents demonstrated excellent fumigant toxicity effects against M.persicae at all five concentrations.However,α-pinene shows significantly better results(98%)as compared toβ-caryophyllene(80%)after 72 h at 6μL L−1 of dose.The highest upregulation in expression was demonstrated at LC30 dose ofα-pinene in five in three out of five genes understudy(TOL,ANT,and FPPS I).Conversely,two genes HSP 60 and OSD demonstrated downregulation at LC30 dose ofβ-caryophyllene.Conclusively,our results highlighted the promising insecticidal potential of both compoundsα-pinene andβ-caryophylleneby interfering with the reproduction and development related processes in M.persicae,allowing us to recommend the phytoconstituents under investigation as an ecofriendly alternative to synthetic insecticides. 展开更多
关键词 FUmIGATION m.persicae gene expression real time PCR Α-PINENE β-caryophyllene
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CO-EXPRESSION OF MACROPHAGE COLONY-STIMULATING FACTOR WITH ITS RECEPTOR IN HUMAN HEPATOMA CELLS AND ITS POTENTIAL ROLES 被引量:4
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作者 杨文清 吴克复 +4 位作者 宋玉华 赵明河 张陆松 宋乃国 张丽娜 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 1999年第2期79-84,共6页
Objective: To investigate the potential role of macrophage colony-stimulating factor (M-CSF) and macrophage colony-stimulating factor receptor (M-CSF-R) on the growth of human hepatoma cells. Methods: Specimens of dif... Objective: To investigate the potential role of macrophage colony-stimulating factor (M-CSF) and macrophage colony-stimulating factor receptor (M-CSF-R) on the growth of human hepatoma cells. Methods: Specimens of different origin, including tissues of human hepatocellular carcinoma (HCC), human fetal liver (FL) and normal liver (NL), the hepatoma cell lines, as well as the peripheral blood mononuclear cells (PBMC) from patients with HCC or liver metastatic tumor (LMT), were used to detect the expression levels of M-CSF and M-CSF-R by ABC immunohistochemistry staining and reverse transcription polymerase chain reaction methods the expression levels of M-CSF and M-CSF-R. Influence of monoclonal antibody against M-CSF (B5) or M-CSF-R (RE2) on proliferation ability of hepatoma cell linesin vitro was also studied. Results: The results showed that hepatoma tissues produced elevated levels of both M-CSF and M-CSF-R compared with those of fetal liver (P<0.001). The M-CSF/M-CSF-R expression levels of PBMC from hepatoma patients were higher than those of LMT patients (P<0.01,P<0.05) and the normal people (P<0.001). The hepatoma cell lines showed strong positive for M-CSF and M-CSF-R production. Both B5 and RE2 displayed a dose-dependent inhibitory effect on the growth and proliferation of hepatoma cells. Conclusion: The study indicates a co-expression model for M-CSF-R in hepatoma cells, suggesting an involvement of M-CSF/M-CSF-R in growth signaling of those malignant cells. The M-CSF/M-CSF-R seems to function through an autonomy mechanism in human hepatoma. 展开更多
关键词 macrophage colony-stimulating factor (m-CSF) macrophage colony-stimulating factor receptor (m-CSF-R) HEPATOmA CO-expressION AUTOCRINE
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m^(6)A相关基因在激素性股骨头坏死中的生物信息学分析 被引量:2
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作者 令狐熙涛 桂佳琦 +2 位作者 梁卓智 瓦庆德 黄帅 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第36期5811-5816,共6页
背景:m^(6)A修饰与股骨头坏死的发生发展相关,但在激素性股骨头坏死中的作用尚不清楚。目的:基于GEO数据库,采用生物信息学方法分析激素性股骨头坏死中表达差异的m^(6)A基因及互作miRNAs,探寻其潜在发病机制。方法:在GEO数据库中检索并... 背景:m^(6)A修饰与股骨头坏死的发生发展相关,但在激素性股骨头坏死中的作用尚不清楚。目的:基于GEO数据库,采用生物信息学方法分析激素性股骨头坏死中表达差异的m^(6)A基因及互作miRNAs,探寻其潜在发病机制。方法:在GEO数据库中检索并下载与激素性股骨头坏死相关的mRNA表达谱数据集(GSE123568),通过R软件对数据集进行差异基因筛选及GO功能、KEGG通路富集分析。识别差异基因中的m^(6)A差异表达基因(m^(6)A-DEGs)并对其进行GO功能与KEGG通路富集分析,比较m^(6)A-DEGs的表达量并分析它们之间的相关性。最后通过Cytoscape构建m^(6)A-DEGs的PPI互作网络及筛选核心基因。使用TargetScan,miRTarBase和miRBD数据库预测m^(6)A-DEGs相关的潜在miRNAs,同时使用ChIPBase及hTFtarget数据库预测7个核心基因潜在转录因子,然后分别构建m^(6)A-miRNA与转录因子m^(6)A调控网络。最后使用数据集GSE74089验证7个核心m^(6)A-DEGs的表达水平。结果与结论:①从数据集中共筛选出2460个差异表达的基因,其中1455个上调,1005个下调。②从数据集中筛选出了14个m^(6)A-DEGs,包括3个下调和11个上调基因,m^(6)A-DEGs在激素性股骨头坏死中的表达具有显著差异(P<0.05),Spearman分析表明它们之间具有一定相关性。③m^(6)A-DEGs的GO和KEGG富集分析主要集中在骨髓细胞分化与发育、免疫受体与细胞因子受体活性、破骨细胞分化、AMPK与白细胞介素17信号通路。④m^(6)A-DEGs前7个核心基因包括YTHDF3,YTHDF1,YTHDF2,ALKBH5,METTL3,HNRNPA2B1及HNRNPC,它们在miRTarBase,miRDB和TargetScan数据库中共有44个miRNA重叠,在ChIPBase及hTFtarget数据库中共有79个重叠转录因子。⑤在GSE74089数据集中有6个核心m^(6)A-DEGs的表达水平与GSE123568数据集一致。⑥结果证实,根据生物信息学方法筛选的7个m^(6)A-DEGs可能通过调控多个miRNA、转录因子和AMPK及白细胞介素17信号通路表达,进而影响激素性股骨头坏死中骨髓细胞分化发育与破骨细胞分化,为进一步深入研究激素性股骨头坏死的发病机制和靶向治疗提供了数据支持和研究方向。 展开更多
关键词 激素性股骨头坏死 m^(6)A甲基化 微小RNA 转录因子 生物信息学 差异基因 基因调控网络 核心基因
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Cloning and Expression Analysis of Mlo Gene from Pericallis hybrida B. Nord.
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作者 Wang Jin-gang Li Wei +3 位作者 Ren Hong-wei Lv Yuan-da Bai Ding Xu Jing 《Journal of Northeast Agricultural University(English Edition)》 CAS 2014年第1期10-15,共6页
The full-length Mlo gene was obtained by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) and RACE. The result of sequence analysis indicated that M/o gene from Pericallis hybrida B. Nord. contained about 12... The full-length Mlo gene was obtained by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) and RACE. The result of sequence analysis indicated that M/o gene from Pericallis hybrida B. Nord. contained about 1296bp open reading frame and encoded 431 amino acids. According to the comparison of the exogenous gene sequences by BLAST analysis and phylogenetic analysis, Mlo gene shared over 85% nucleotide homology and 98% amino acid homology. Finally, through semi-quantitative-PCR and fluorescence quantitative analysis, we found that Mlo gene showed the highest expression levels in leaves and the lowest in roots after inoculated with powdery mildew pathogen for different days. 展开更多
关键词 Pericallis hybrida B. Nord. m/o gene CLONING sequence expression analysis
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A Co-expression System Based on Phage and Phagemid to Select Cognate Antibody-antigen Pairs in vivo
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作者 胡学军 Zhang Zhichao +2 位作者 Yuan Xiaodong Bao Yongming An Lijia 《High Technology Letters》 EI CAS 2002年第2期5-9,共5页
A modified selectively infective phage (SIP) is developed to facilitate the selection of interacting antibody antigen pairs from a large single chain antibody (scFv) library in vivo. The system is constructed with a m... A modified selectively infective phage (SIP) is developed to facilitate the selection of interacting antibody antigen pairs from a large single chain antibody (scFv) library in vivo. The system is constructed with a modified helper phage M13KO7 and phagemid pCANTAB 5 E. The antigen fused to the C terminal of N1 N2 domain and the scFv to the N terminal of CT domain of the gIIIp of filamentous phage are encoded on the phage and phagemid vectors respectively. The phages produced by co transformants restore infectivity via interaction between antigen and antibody fusions in the cell periplasm. In a model system, the scFv fragment of the anti hemagglutinin 17/9 antibody and its corresponding antigen are detected in the presence of a 10 5 fold excess of a non interacting control pairs, which demonstrates this system to be very sensitive and facile to screen a large single chain antibody library. 展开更多
关键词 co expression m13KO7 selectively infective phage single chain Fv antibody interacting antibody antigen pairs
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TNF-α regulates the expression of transcription factor FoxM1 in bladder cancer and cystitis glandularis
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作者 Ying-Kai Hong Ming-En Lin Hua-Tao Wu 《Journal of Hainan Medical University》 2020年第3期44-47,共4页
Objective:To study the expression and significance of TNF-transcription factor M1(FoxM1)in bladder cancer and cystitis glandularis(CG).Methods:A total of 30 patients with bladder cancer admitted to our hospital and re... Objective:To study the expression and significance of TNF-transcription factor M1(FoxM1)in bladder cancer and cystitis glandularis(CG).Methods:A total of 30 patients with bladder cancer admitted to our hospital and received surgical treatment from February 2017 to February 2019 were included for the study.During surgery,bladder cancer tissues and normal bladder tissues(tissues more than 5cm away from the cancer tissue center)were collected.Meanwhile,we retained 30 CG tissues from 30 CG patients who received surgical treatment in our hospital at the same time.Bladder cancer cell lines RT4 and BIU87 were cultured and treated with TNF-αat different concentrations(0nM,1nM,5nM,10nM).The expressions of TNF-αand FoxM1 in different bladder tissues were analyzed,and the effects of different concentrations of TNF-αon the expressions of FoxM1 in bladder cancer cell lines and cyclin B1 and cyclin D1 in bladder cancer cell lines were analyzed.Results:The expression levels of TNF-αand FoxM1 in normal bladder,CG and bladder cancer tissues were gradually increased,and univariate analysis of variance showed that the differences between groups were statistically significant(all P<0.05).FoxM1 expression in bladder cancer cell lines treated with TNF-αat concentrations of 0nM,1nM,5nM and 10nM showed a gradual increase trend,and one-way anova showed that the difference between the groups was statistically significant(all P<0.05).After the treatment of bladder cancer cell lines with TNF-αat concentrations of 0nM,1nM,5nM and 10nM,the expression of cyclin B1 and cyclin D1 showed a gradually increasing trend,and one-way anova showed that the difference between groups was statistically significant(all P<0.05).Conclusion:TNF-αmay play a crucial role in the occurrence and development of CG by regulating the expression of transcription factor FoxM1,and then affecting the expression of cyclin B1 and cyclin D1,which is worthy of clinical attention. 展开更多
关键词 Bladder cancer CYSTITIS glandularis Tumor NECROSIS FACTOR Fork-head frame transcription FACTOR m1 express meaning
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ETxexpress——高速传输的嵌入式COM模块
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《国外电子测量技术》 2005年第7期51-51,共1页
近年来COM(Computer On Module)一直专注于其效能及技术的改进上,但是当大部分的标准如ATX、SBC和CompactPCI采用最新的芯片时,x86based的COM却无法跨入64.bit的PCI及高效能CPU的领域。因此OEM常常需要在依赖许多不同标准或昂贵耗时... 近年来COM(Computer On Module)一直专注于其效能及技术的改进上,但是当大部分的标准如ATX、SBC和CompactPCI采用最新的芯片时,x86based的COM却无法跨入64.bit的PCI及高效能CPU的领域。因此OEM常常需要在依赖许多不同标准或昂贵耗时的架构中选出合乎需求的高端解决方案。PCI Express的ETXexpress标准诞生之后,让COM解决了这个问题, 展开更多
关键词 高速传输 COmPACTPCI m模块 嵌入式 express 解决方案 COm ATX 标准 SBC CPU 高效能 bit OEm
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Synopsys的Design Ware USB2.0 nanoPHY和PCI Express PHY IP可用于中芯国际的0.13μm工艺
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《单片机与嵌入式系统应用》 2007年第11期69-69,共1页
Synopsys公司宣布基于中芯国际130nm G工艺的DesignWare USB2.0nanoPHY IP已获USB标志认证,PCI Express(PCIe)PHY IP已通过一致性测试。作为用于PCI Express和USB2.0的完整IP解决方案的技术供应商,Synopsys一贯为设计者提供高质... Synopsys公司宣布基于中芯国际130nm G工艺的DesignWare USB2.0nanoPHY IP已获USB标志认证,PCI Express(PCIe)PHY IP已通过一致性测试。作为用于PCI Express和USB2.0的完整IP解决方案的技术供应商,Synopsys一贯为设计者提供高质量IP,该IP不但集成风险低、上市时间短,而且具有很高的互操作能力和标准兼容性。 展开更多
关键词 0.13μm工艺 USB2.0 express PCI WARE 国际 Synopsys公司 PHY
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鸡脾脏METTL3、METTL14基因对肠炎沙门氏菌感染的表达调控
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作者 赵亚男 任艳茹 +2 位作者 谢宾 王园美 李显耀 《中国畜禽种业》 2024年第1期13-18,共6页
为探讨鸡METTL3、METTL14基因对肠炎沙门氏菌感染的调控作用,该试验将40只2日龄肠炎沙门氏菌阴性广西瑶鸡(父本)和济宁百日鸡(母本)杂交的F1代随机均分为2组,试验组和对照组分别接种0.3mL肠炎沙门氏菌菌液及PBS,在接种后第1天和第7天鸡... 为探讨鸡METTL3、METTL14基因对肠炎沙门氏菌感染的调控作用,该试验将40只2日龄肠炎沙门氏菌阴性广西瑶鸡(父本)和济宁百日鸡(母本)杂交的F1代随机均分为2组,试验组和对照组分别接种0.3mL肠炎沙门氏菌菌液及PBS,在接种后第1天和第7天鸡的脾脏组织提取总RNA,采用实时荧光定量PCR检测不同时间点METTL3、METTL14基因的表达水平。结果显示:METTL3和METTL14具有相似的表达趋势,均在感染后第1天试验组高于对照组(P<0.05),感染后第7天试验组低于对照组,但只有METTL14差异显著(P<0.05)。可见,鸡感染肠炎沙门氏菌后,可以引起脾脏组织METTL3和METTL14基因的差异表达。 展开更多
关键词 m^(6)A 肠炎沙门氏菌 mETTL3 mETTL14 基因表达
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M66express多参数监护仪
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《中国医疗器械信息》 2004年第4期63-63,共1页
关键词 m66express多参数监护仪 医疗设备 技术特点 功能
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结核分支杆菌MPT63抗原的表达及其血清学诊断价值的研究 被引量:10
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作者 吴雪琼 张俊仙 +2 位作者 夏湘萱 刘军 李洪敏 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2001年第4期8-10,共3页
获得结核分支杆菌重组MPT6 3蛋白 ,研究其免疫学特性 ,评价其在结核病血清学诊断中的价值 ,寻找更有效的结核病诊断试剂。方法 :应用基因工程技术表达、纯化MPT6 3蛋白 ,通过Westernblotting和免疫双扩散试验分析其抗原性 ,通过斑点免... 获得结核分支杆菌重组MPT6 3蛋白 ,研究其免疫学特性 ,评价其在结核病血清学诊断中的价值 ,寻找更有效的结核病诊断试剂。方法 :应用基因工程技术表达、纯化MPT6 3蛋白 ,通过Westernblotting和免疫双扩散试验分析其抗原性 ,通过斑点免疫试验、结明试验和结核病一步法检测血清中抗结核抗体。结果 :重组质粒 pET2 4b -MPT6 3测序表明具有正确的编码序列 ,MPT6 3蛋白在大肠杆菌细胞内以可溶性蛋白的形式高效表达 ,表达量占菌体总蛋白的 40 %左右 ,分子量约 16kDa ,Westernblotting和免疫双扩散试验检测抗结核抗体的阳性率分别为 46 .7%和 5 0 % ,结核病一步法检测的阳性率为 70 % ,结明试验的阳性率为 80 %。在34例正常血清中 ,MPT6 3和PPD斑点免疫试验检测抗结核抗体的阳性率分别为 38.2 %和 35 .3 % ,结核病一步法检测的阳性率为 2 3 .5 %。结论 :pET2 4b -MPT6 3大肠杆菌工程菌能以可溶性蛋白的形式高效表达 ,重组的MPT6 3也许可作为结核病血清学诊断的一组抗原之一。 展开更多
关键词 抗原 mPT63基因表达 血清学诊断 分支杆菌 结核
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M-GEP:基于多层染色体基因表达式编程的遗传进化算法 被引量:32
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作者 彭京 唐常杰 +1 位作者 李川 胡建军 《计算机学报》 EI CSCD 北大核心 2005年第9期1459-1466,共8页
该文提出了一种新的基于多层染色体基因表达式编程的遗传进化算法MGEP,新算法引入了多层染色体的概念,利用染色体构建的层次调用模型对个体进行表达,在解决实际函数发现、电路进化等实际问题中取得了良好效果.该文主要贡献包括:(1)提出... 该文提出了一种新的基于多层染色体基因表达式编程的遗传进化算法MGEP,新算法引入了多层染色体的概念,利用染色体构建的层次调用模型对个体进行表达,在解决实际函数发现、电路进化等实际问题中取得了良好效果.该文主要贡献包括:(1)提出了基于多染色体的基因表达式编程算法(MGEP);(2)建立了不同染色体的层次调用模型及存储结构;(3)提出并实现了基于染色体的重组算子和基因随机重组算子.对多基因GEP和单基因GEP的对比实验结果表明,平均进化辈数仅为后者的29%~81%. 展开更多
关键词 多层染色体 m-GEP 遗传进化 基因表达式编程
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黄瓜单性花决定基因M的表达分析 被引量:12
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作者 陶倩怡 李征 +2 位作者 何欢乐 潘俊松 蔡润 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期632-638,共7页
植物成花性型决定过程涉及多种机制,而单一基因位点控制非完全花(单性花)的发育为葫芦科植物所特有,其中以黄瓜(Cucumis sativusL.)和甜瓜(C.meloL.)研究最深入。文章利用两对黄瓜近等基因系材料,结合定量PCR技术,研究黄瓜单性花决定基... 植物成花性型决定过程涉及多种机制,而单一基因位点控制非完全花(单性花)的发育为葫芦科植物所特有,其中以黄瓜(Cucumis sativusL.)和甜瓜(C.meloL.)研究最深入。文章利用两对黄瓜近等基因系材料,结合定量PCR技术,研究黄瓜单性花决定基因M(CsACS2,GenBank登陆号:FJ529216)的表达情况。利用药剂(AgNO3和艾维激素)处理不同基因型黄瓜材料,研究在内源乙烯作用被干扰的情况下CsACS2基因的表达变化。结果表明:内源乙烯可以诱导CsACS2基因的表达。在正常生长条件下,这种内源乙烯可能来自CsACS1G基因(F基因)或CsACS2基因(M基因)本身,而后一种情况可能涉及一种正回馈激活机制。 展开更多
关键词 黄瓜 性型决定 m基因 CsACS2 表达分析
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新城疫病毒F48E9株M和NP基因的原核表达 被引量:6
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作者 闻晓波 吴芬芳 +4 位作者 闫丽辉 曹殿军 刘培欣 刘春国 孔宪刚 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期181-185,共5页
根据新城疫病毒(NDV)F48E9国内标准强毒株编码序列设计了2对特异性引物,分别用于扩增M和NP基因。经序列测定,将其克隆到原核表达载体pET-30a(+)上,转化E.coliBL21(DE3),筛选表达NDV F48E9株M蛋白和NP蛋白的菌株。IPTG诱导表达后,SDS-PAG... 根据新城疫病毒(NDV)F48E9国内标准强毒株编码序列设计了2对特异性引物,分别用于扩增M和NP基因。经序列测定,将其克隆到原核表达载体pET-30a(+)上,转化E.coliBL21(DE3),筛选表达NDV F48E9株M蛋白和NP蛋白的菌株。IPTG诱导表达后,SDS-PAGE分析结果表明,NDV M蛋白在E.coliBL21(DE3)内以可溶形式存在,而NP蛋白以包涵体的形式表达。用纯化的M和NP蛋白免疫鸡制备超免疫血清,进行Western-blot分析;结果,它们可以与真核表达系统表达的M和NP蛋白以及NDV发生特异性反应,表明,原核表达系统表达的NDV M和NP蛋白具有良好的免疫原性和反应原性。 展开更多
关键词 新城疫病毒 m基因 NP基因 原核表达
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猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5和M蛋白共表达的自杀性DNA疫苗的构建及其免疫应答 被引量:17
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作者 江云波 方六荣 +2 位作者 肖少波 张辉 陈焕春 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期1011-1017,共7页
目的探讨猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)自杀性DNA疫苗的免疫效果。方法将ORF5和ORF6基因分别插入可以同时表达两个外源基因的表达载体pSCA2的26S启动子下游,获得ORF5和ORF6双基因共表达自杀性DNA疫苗pSFV-56。结果Westernblot检测证实O... 目的探讨猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)自杀性DNA疫苗的免疫效果。方法将ORF5和ORF6基因分别插入可以同时表达两个外源基因的表达载体pSCA2的26S启动子下游,获得ORF5和ORF6双基因共表达自杀性DNA疫苗pSFV-56。结果Westernblot检测证实ORF5和ORF6基因获得正确表达,并且所表达的GP5和M蛋白可以形成异源二聚体。将pSFV-56免疫Balb/c小鼠,首免后4周可检测到特异性PRRSV中和抗体,首免后8周的中和抗体最高可达1﹕32,同时还可检测到较高的特异性细胞免疫应答。进一步将pSFV-56免疫断奶仔猪,二免后4周即可产生1:8~1:16的中和抗体,直到二免后6周仍维持这种高水平的中和抗体,而且也可检测到较高的特异性细胞免疫应答。结论上述研究结果表明pSFV-56具有良好的免疫原性和诱发免疫动物产生较高免疫应答的能力。 展开更多
关键词 “自杀性”DNA疫苗 猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5和m蛋白共表达
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新城疫病毒F_(48)E_9株M NP F和HN基因的真核表达 被引量:11
16
作者 闻晓波 闫丽辉 +3 位作者 曹殿军 刘培欣 刘春国 步志高 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期429-433,共5页
将新城疫病毒(NDV)F48E9株的M、NP、F和HN基因克隆到真核细胞表达载体 pCAGG上,经酶切、PCR鉴定和序列分析,分别筛选出了含有M、NP、F和HN基因的重组质粒, 命名为pCAGG-M、pCAGG-NP、pCAGG-F和pCAGG-HN。纯化后的重组质粒通过脂质体单... 将新城疫病毒(NDV)F48E9株的M、NP、F和HN基因克隆到真核细胞表达载体 pCAGG上,经酶切、PCR鉴定和序列分析,分别筛选出了含有M、NP、F和HN基因的重组质粒, 命名为pCAGG-M、pCAGG-NP、pCAGG-F和pCAGG-HN。纯化后的重组质粒通过脂质体单独转染HeLa细胞,经间接免疫荧光试验检测到了M、NP、F和HN蛋白的表达。pCAGG-M、 pCAGG-NP、pCAGG-F和pCAGG-HN重组质粒组合共转染HeLa细胞48 h后,可以观察到明显的细胞融合现象。试验结果表明,NDV F48E9株的M、NP、F和HN蛋白均在HeLa细胞内得到了成功表达,同时证明在该表达系统中F蛋白不足以诱导细胞融合。 展开更多
关键词 新城疫病毒 m基因 NP基因 F基因 HN基因 真核细胞表达 病毒样颗粒
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禽流感病毒GD/1/96株M基因在sf9昆虫细胞中的表达 被引量:7
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作者 王幼明 邓国华 +1 位作者 于康震 黄克和 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2002年第9期3-5,共3页
从pUCM 1质粒中亚克隆禽流感病毒M基因至转移载体 pFastBac1质粒 ,PCR鉴定后 ,转化DH10 BAC感受态细胞。提取重组杆粒rBacM ,以M 13为通用引物作PCR分析 ,证明M基因已转入其中。用CellFectin试剂包裹rBacM杆粒转染sf9细胞 ,96h收取感染... 从pUCM 1质粒中亚克隆禽流感病毒M基因至转移载体 pFastBac1质粒 ,PCR鉴定后 ,转化DH10 BAC感受态细胞。提取重组杆粒rBacM ,以M 13为通用引物作PCR分析 ,证明M基因已转入其中。用CellFectin试剂包裹rBacM杆粒转染sf9细胞 ,96h收取感染细胞。细胞表达产物裂解后作SDS PAGE蛋白电泳和Westernblot分析 ,证明M基因在昆虫细胞中成功表达且具有与天然M 1蛋白相似的活性。琼脂扩散试验结果进一步证明 ,重组M 1蛋白可作为诊断抗原。 展开更多
关键词 GD/1/96株 禽流感病毒 m基因 杆状病毒表达系统 基因表达
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猪流行性腹泻病毒M基因及其片段原核表达效果分析 被引量:10
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作者 高慎阳 邹运明 李一经 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期27-31,41,共6页
将猪流行性腹泻病毒的M基因及编码M蛋白膜外区M基因片段(M)'分别亚克隆到原核表达载体pJLA605和pGEX-6p-1中,构建了重组质粒pJLA605-M、pGEX-6p-M-GST、pGEX-6p-M和pGEX-6p-M',转化大肠杆菌后,探索了M蛋白在N端和C端不带有谷胱... 将猪流行性腹泻病毒的M基因及编码M蛋白膜外区M基因片段(M)'分别亚克隆到原核表达载体pJLA605和pGEX-6p-1中,构建了重组质粒pJLA605-M、pGEX-6p-M-GST、pGEX-6p-M和pGEX-6p-M',转化大肠杆菌后,探索了M蛋白在N端和C端不带有谷胱苷肽巯基转移酶(GST)、N端和C端均带有GST、只在N端带有GST以及只含有M蛋白的膜外区M'蛋白的表达情况。SDS-PAGE分析结果表明,N端和C端带有GST的pGEX-6p-M-GST和只含有膜外区M'基因的重组质粒pGEX-6p-M'获得了高效表达,经Bandscan5.0软件分析,其表达产物分别以融合蛋白GST-M和GST-M'形式存在,表达量分别为20%和45%。在对重组质粒pJLA605-M转化的大肠杆菌诱导表达过程中发现菌体生长的抑制现象,说明M蛋白对宿主菌有一定的毒性,进一步提取包涵体进行SDS-PAGE发现M蛋白以包涵体的形式得以表达。猪流行性腹泻病毒M蛋白的毒性作用可能与M蛋白具有的出芽功能有关,因而表现出对大肠杆菌的细胞壁的破坏作用。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 重组m蛋白 原核表达
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密码子优化提高PRRSV GP5/M双基因在真核细胞中的同步表达 被引量:3
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作者 张永红 徐建 +5 位作者 张建楼 霍珊珊 王利月 林洪羽 李秀锦 仲飞 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期92-97,115,共7页
为提高猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)GP5和M蛋白基因在动物细胞中同步表达水平,本试验依据动物偏爱的密码子对GP5和M蛋白基因分别进行了密码子优化,并利用本室构建的含内部核蛋白体进入位点(IRES)载体pcDNA-IRES,将密码子优化的和... 为提高猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)GP5和M蛋白基因在动物细胞中同步表达水平,本试验依据动物偏爱的密码子对GP5和M蛋白基因分别进行了密码子优化,并利用本室构建的含内部核蛋白体进入位点(IRES)载体pcDNA-IRES,将密码子优化的和野生型的GP5基因和M蛋白基因分别插入到IRES的上下游,分别构建成GP5与His-标签融合和M蛋白与Myc-标签融合的密码子优化的和野生型的GP5/M双基因表达载体pcDNA-OpGP5/His-IRES-OpM/MH和pcDNA-GP5/His-IRES-M/MH,将双基因表达载体转染HEK293T细胞使其表达,通过Western blot检测,比较GP5和M蛋白在真核细胞的表达水平。结果显示,密码子优化可明显提高GP5和M在HEK293T细胞中的表达水平,本试验为GP5和M蛋白功能的研究提供了有利条件。 展开更多
关键词 密码子优化 PRRSV GP5蛋白 m蛋白 表达水平
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慢性髓系白血病初诊患者M-BCR/ABL与M-BCR/ABL融合基因转录子共表达的临床意义 被引量:2
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作者 孟文彤 刘霆 +5 位作者 李建军 史青 余江 崔旭 吴俣 向兵 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期97-100,共4页
目的探讨慢性髓系白血病(CML)初诊患者M-BCR/ABL与M-BCR/ABL融合基因转录子共表达的临床意义。方法对111例初诊CML患者抽取骨髓,分离单个核细胞后,使用巢式PCR检测M-BCR/ABL融合基因转录子的表达。结果111例CML患者M-BCR/ABL和M-BCR/AB... 目的探讨慢性髓系白血病(CML)初诊患者M-BCR/ABL与M-BCR/ABL融合基因转录子共表达的临床意义。方法对111例初诊CML患者抽取骨髓,分离单个核细胞后,使用巢式PCR检测M-BCR/ABL融合基因转录子的表达。结果111例CML患者M-BCR/ABL和M-BCR/ABL共表达率为51.4%;共表达与单M-BCR/ABL阳性的初诊CML患者相比在血红蛋白浓度、白细胞数、中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)比例及积分、PH染色体比例和肝脾肿大均无差异,仅血小板数差异有统计学意义(P<0.05)。B3A2型共表达患者血小板数比单M-BCR/ABL阳性患者高(P<0.05);B2A2型共表达和单表达患者比较差异均无统计学意义。有2例患者阴茎异常勃起,均为M-BCR/ABL阴性CML患者。结论共表达M-BCR/ABL的B3A2型初诊CML患者易有血小板数增高;共表达M-BCR/ABL对B2A2型初诊CML患者的临床表现无影响。 展开更多
关键词 慢性髓细胞白血病 m-bcr/abl m-bcr/abl 共表达
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