M-sol保存液添加L-肉碱对血小板体外保存的影响

目的探讨在M-sol保存液中添加L-肉碱(LC)对体外保存血小板的影响。方法采集无偿献血志愿者的全血,采用白膜法制备浓缩血小板。将8袋ABO同型的浓缩血小板汇集,配制M-sol为血小板保存液。依据保存介质和LC浓度不同分为6组,即血浆组、M-sol组、M-sol+0.5mmol/L LC组、M-sol+5mmol/L LC组、M-sol+15mmol/L LC组和M-sol+25mmol/L LC组。置于(22±2)℃持续振荡保存,分别于保存d0、3、7取样。用全自动血细胞分析仪检测血小板计数(Plt)、平均血小板体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW),用流式细胞仪检测血小板膜外磷脂酰丝氨酸(PS)和CD62p的阳性率,用半自动生化分析仪检测葡萄糖和乳酸含量,并计算保存7d期间葡萄糖消耗量和乳酸生成量。结果随保存时间的延长,各组Plt均下降,MPV和PDW均升高,在同一时间点各组间差异无统计学意义(P>0.05)。PS和CD62p阳性率逐渐升高,保存d7时,M-sol+15mmol/L LC组PS和CD62p阳性率低于其他各组(P<0.05)。葡萄糖消耗量和乳酸生成量M-sol+15mmol/L LC组最低(P<0.05)。结论将合适浓度的LC加入M-sol血小板保存液中,可降低血小板贮存损伤。

PASⅢM血小板保存添加液对保存期血小板质量的影响

目的:探讨PASⅢM血小板保存添加液对保存期血小板质量的影响。方法:采集正常献血者标本15份,制备浓缩血小板。应用PASⅢM血小板保存添加液保存浓缩血小板(PASⅢM保存组),富含血小板的血浆作对照(血浆组)。分别在保存1、5、7、10d,检测血小板计数、平均血小板体积(MPV)、胶原诱导的聚集反应、血小板活化率及葡萄糖消耗和乳酸生成。结果:PASⅢM保存组血小板溶液的pH、pCO2和MPV比血浆组稳定。血小板活化率在血浆组随保存时间上升,在PASⅢM保存组比较稳定。血小板聚集率在PASⅢM保存组比血浆组下降幅度小。PASⅢM保存组葡萄糖消耗和乳酸生成幅度低于血浆组。结论:PASⅢM保存添加液在血小板的体外保存期维持血小板质量的作用上优于血浆。

冻干血小板保护液优化的实验研究

目的优化冻干血小板保护液,减少冻干过程对血小板的损害,有效保护其功能。方法采用3因素3水平的正交设计法,对血小板膜保护剂、血小板激活抑制剂、蛋白质类保护剂的3类成分组成的保护液进行优选。检测血小板最大聚集率、血小板活化标志PAC-1、CD62P的阳性表达率和血小板回收率,通过比较其差异,筛选出本实验的最优冻干血小板保护液。以优化保护液对血小板处理后进行冻干,并以此为实验组,与新鲜血小板和原保护液处理后冻干血小板进行比较验证,验证指标与优选指标相同,比较3者4项指标之间的差异。结果正交设计试验结果显示：血小板最大聚集率组间最高（74.33±24.01）%,血小板活化标志PAC-1和CD62P低于9组平均水平,血小板回收率高于9组平均水平。以主要体现血小板功能的血小板最大聚集率为优先指标,结合其余3项检测指标进行综合分析,在原保护液的基础上,筛选出添加了2%DMSO、第2信使调节剂、2 mmol/L维生素B6,75%的PPP保护液组为最优组合。验证实验结果显示,优化保护液组血小板最大聚集率（76.12±6.02）%,与原保护液组相比,差异有统计学意义（P〈0.05）,与新鲜血小板组相比,差异没有统计学意义（P〉0.05）。最优保护液组血小板激活标志PAC-1和CD62P阳性表达率分别为（3.23±0.49）%和（36.83±8.21）%,2者与原保护液组、新鲜血小板组相比,差异无统计学意义（P〉0.05）;最优保护液组冻干血小板复水化后血小板回收率为（85.90±2.24）%,与原保护液组相比,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论本实验优化的血小板保护液优于原保护液,明显提高了冻干血小板复水化后最大聚集率,能更好地保护血小板的功能,但对血小板冻干过程的保存损害问题没有得到更好的改善,有待下一步深入研究。