癞葡萄降糖活性成分的提取及其降糖活性的研究

对癞葡萄中水溶性降糖活性成分的提取进行了研究。以水作为溶剂提取癞葡萄的降糖活性成分,通过10kdal的超滤膜将水提物分为二个组分,并对这两个组分分别进行了降糖活性动物实验。结果表明,大、小分子组分均有一定降糖效果,但相对分子量大于10kdal的组分降糖效果不显著;相对分子量小于10kdal的组分降糖活性显著,起着主要的降糖作用。

采用大孔吸附树脂对癞葡萄酶解物进行脱盐

通过测定7种树脂对癞葡萄蛋白酶解物的吸附率和解吸率,选择DA201-C型大孔吸附树脂对癞葡萄酶解物进行脱盐。结果表明,在酶解物以60 mg/mL、0.5 BV/h流速上样,采用75%乙醇解吸的条件下,酶解物的脱盐率为92.49%,回收率为78.38%;酶解物中蛋白的含量从脱盐前的76.67%提高至脱盐后的85.69%。脱盐后的酶解物仍有显著的降血糖作用,且降血糖作用较脱盐前稍有提高。

癞葡萄籽油的脂肪酸分布分析及共轭亚麻酸的鉴定

柱色谱法测定癞葡萄籽油中甘油一酯、甘油二酯、甘油三酯含量分别为2.64%、0.66%和85.43%。研究发现猪胰脂酶定向水解法及其改进方法不适于癞葡萄籽油的脂肪酸分布分析;根据RP-HPLC/ESI-MS、紫外光谱及红外光谱的分析结果,鉴定出癞葡萄籽油所含的主要共轭亚麻酸为α-桐酸(9c,11t,13t-C18∶3),次要的2个共轭亚麻酸可能分别为石榴酸(9c,11t,13c-C18∶3)和β-桐酸(9t,11t,13t-C18∶3)。

超滤分离癞葡萄水溶性降糖活性物质

采用超滤法从癞葡萄水提物中初步分离降血糖活性物质。考察了进料流量、操作压力、操作温度及料液质量浓度等工艺参数对超滤过程中膜通量的影响,并对超滤后两组分的相对分子质量分布及降血糖活性进行了测定。结果表明:用截留相对分子质量为10 000的中空纤维膜对癞葡萄水提物进行超滤分离的最适工艺条件为:进料流量200 L/h、温度25℃、压力0.10 MPa、料液质量浓度20 g/L。超滤有效地将癞葡萄水提物分成两个组分,其中相对质量较小的组分具有显著的降血糖活性,而相对质量较大的组分不具有降血糖活性。

癞葡萄籽油的特异甘油三酯的酶法酯交换制备

采用癞葡萄籽油(MCVO)或桐油和硬脂酸甲酯作为底物,在Lipozyme TL.IM的催化下进行酯交换反应制备具有较强抗肿瘤活性的Sn-1,3-二硬脂酸-2-共轭亚麻酸甘油酯(SCLnS)。响应面试验获得最优的酶法酯交换反应条件为:在无溶剂体系里,硬脂酸甲酯4.92 g(以2 g MCVO为底物),酶量为底物质量的20%,搅拌速度204 r/min,反应温度52.4℃,反应时间4 h,得到SCLnS含量的理论值为20.03%;以MCVO为原料,实际得到SCLnS含量为19.73%;以桐油为原料,实际得到SCLnS含量为18.95%。

适合癞葡萄皂甙分离纯化的大孔树脂的筛选

大孔吸附树脂法是20世纪70年代发展起来的一种新工艺,具有吸附容量大、再生简单、效果可靠等特点,在对总皂甙的粗分离和除去水溶性色素、多糖和无机盐等杂质时都显示出其独特的效果。本文选用了大孔吸附树脂法对癞葡萄粗皂甙进行分离纯化,对癞葡萄粗皂甙的进一步纯化的条件进行了研究。在文中首先确定了粗皂甙的正丁醇萃取条件,结果得出用正丁醇萃取癞葡萄皂甙次数3次为宜,三次萃取后总萃取率达到89.76%。然后测定了五种大孔吸附树脂(D3520,AB-8、D4520、DA201,S-8)对癞葡萄皂甙的吸附率和解吸率,得出AB-8大孔吸附树脂的吸附率和解析率为五种大孔吸附树脂之冠,分别为86.18%和92.2%,从而筛选出AB-8树脂对癞葡萄皂甙有较好的吸附率和较高的解吸率,是适合分离癞葡萄皂甙的树脂。

癞葡萄总皂甙测定方法的研究

研究了以花旗参皂甙为标准品,采用比色法对癞葡萄皂甙进行定量测定的方法。通过比较,确定在546nm下,以5%香草醛-冰乙酸溶液和0.8ml高氯酸溶液为显色剂、显色时间为15min、显色温度为60℃时比色体系最稳定。所得回归方程为Y=0.0039X-0.0015,线性可靠,曲线高度显著,失拟性小。方法的精密度好,相对标准差RSD=0.39%,平均回收率102.56%,标准差S=6.12,变异系数小,CV=5.97%。

癞葡萄水提物的降糖效果研究

为研究癞葡萄水提物对正常小鼠及四氧嘧啶型糖尿病小鼠血糖浓度的影响,将不同剂量(250mg/kg体重、500mg/kg体重和750mg/kg体重)的水提物灌胃给予禁食12h的正常小鼠和四氧嘧啶型糖尿病小鼠。试验结果表明,癞葡萄水提物对正常小鼠的血糖浓度没有影响,而对四氧嘧啶型糖尿病小鼠的血糖浓度有显著影响。其中500mg/kg剂量组糖尿病小鼠的血糖值在灌胃4h后较相应的初始血糖值下降45.28%,糖尿量提高38.39%;给予500mg/kg水提物治疗15d后,糖尿病小鼠血糖值较治疗前下降59.88%,同时对小鼠体重的恢复有一定的促进作用。结果表明癞葡萄水提物对四氧嘧啶型糖尿病小鼠具有良好的预防和治疗效果。

癞葡萄皂甙的降糖功效探索

以血糖值为评价指标,以小鼠为动物模型,对癞葡萄皂甙的降血糖作用进行了探讨。实验结果表明,粗皂甙对正常小鼠没有显著不良影响,对糖尿病小鼠的降血糖作用非常显著。通过不同剂量癞葡萄皂甙对小鼠降糖效果的影响可知:低、中剂量组具有更好的降糖效果。通过糖耐量实验可知,癞葡萄皂甙对试验性糖尿病小鼠的糖耐量具有显著的增强作用。