不同处理对苜蓿小孢子离体培养存活率的影响

【目的】探讨不同处理对苜蓿小孢子培养的影响，为苜蓿游离小孢子培养体系的建立提供依据，也为今后苜蓿单倍体育种奠定基础。【方法】以杂花苜蓿新牧1号花蕾为材料进行小孢子离体培养，探讨预处理、培养基类型及接种密度对苜蓿小孢子离体培养前期存活率的影响。【结果】在预处理实验中，4℃低温处理24h存活率最高，达23．5％；33℃高温处理48h后转入25℃暗培养，小孢子存活率最高，达26．58％；按1．5×10^5个／mL的密度接种，小孢子存活率最高，达28．2％；小孢子在B5液体培养基中培养优于其它培养基，存活率达30．1％。【结论】材料在4℃低温下处理24h，将游离小孢子按1．5×10^5个／mL的接种密度接种于B5液体培养基中，置于33℃高温下处理48h后转入25℃恒温培养箱中暗培养，25d后胚细胞诱导率最高，达30．1％。