抗肿瘤多肽M1-21的剂型优化

通过去溶剂化方法,将单体抗肿瘤多肽M1-21纳米化,形成50 nm左右大小的多肽纳米颗粒(Nano-M1-21).运用动态光色散技术(DLS)和低压透射电镜(TEM)对Nano-M1-21进行表征,并进行体外37℃条件下颗粒稳定性测试.运用乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7和4T1细胞验证Nano-M1-21的抗肿瘤效果,结果表明Nano-M1-21更容易被细胞摄取;相比单体多肽,达到抑制肿瘤细胞的浓度更低.运用小鼠乳腺癌4T1细胞活体肿瘤移植模型,发现Nano-M1-21展示出良好的抑瘤效果.总之,单体肽M1-21经纳米剂型优化后,有利于改善细胞的摄取,显示出更好的抑瘤效果.

miR-21通过调控FOXM1抑制食管癌细胞的迁移及侵袭能力研究

目的探讨miR-21通过调控叉头框蛋白M1(FOXM1)抑制食管癌细胞的迁移及侵袭能力的效果。方法食管癌细胞系Eca-10在转染时分为3组,miR-21组转染100 pmol miR-21反义核苷酸,对照组转染100 pmol无义核苷酸,空白组转染等剂量的磷酸盐缓冲液。分别于转染24 h与48 h后采用四唑盐比色法(MTT)检测细增殖,Transwell小室检测细胞迁移和侵袭,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)法检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测FOXM1、蛋白激酶B(Akt)蛋白表达。结果转染24 h与48 h后,miR-21组的细胞增殖指数(24 h:35.96±2.48;48 h:45.98±3.11)、迁移(24 h:13.14±1.48;48 h:14.87±2.11)与侵袭指数(24 h:16.98±1.33;48 h:18.77±2.47)、FOXM1(24 h:0.84±0.13;48 h:0.92±0.23)与Akt蛋白(24 h:1.09±0.10;48 h:0.98±0.14)相对表达水平低于对照组与空白组,差异有统计学意义(P<0.05),细胞凋亡指数(24 h:24.92±3.19;48 h:26.09±2.18)高于对照组与空白组,差异有统计学意义(P<0.05),而对照组与空白组以上指标相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论抑制miR-21表达可通过调控FOXM1的表达从而对食管癌细胞的增殖、迁移及侵袭发挥抑制作用,并可促进细胞凋亡。

阻断TIM-4分子对M1/M2型巨噬细胞极化及同种异体免疫排斥反应的影响

目的:运用特异性单克隆抗体阻断抗原T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域蛋白-4(T-cell immunoglobulin and mucin domain containing protein-4,TIM-4),探讨其对巨噬细胞(M1/M2)极化及同种异体免疫排斥反应的影响。方法:构建同种异体免疫排斥模型,将BALB/c小鼠脾细胞悬液注入C57BL/6小鼠腹腔,分为同型对照组(n=6)和抗TIM-4组(n=6);分别腹腔注射同型对照免疫球蛋白和抗TIM-4单克隆抗体,300μg/只;第5天,重复注射1次;第10天,处死两组小鼠,采用流式细胞术检测受体鼠脾和腹腔中M1和M2型巨噬细胞百分比;用实时荧光定量PCR法检测受体鼠脾和腹腔细胞中微小RNA-21(miR-21)、IL-10、p40、p35和EB病毒诱导基因3(Epstein-Barr virus-induced gene-3,EBi-3)等mRNA表达水平。结果:在脾细胞中,与同型对照组相比,抗TIM-4组M1和M2型巨噬细胞百分比、miR-21和p40 mRNA表达水平无明显变化(P均>0.05),但IL-10和p35 mRNA表达水平明显升高(P均<0.05),EBi-3 mRNA表达水平明显下降(P<0.05);在腹腔中,与同型对照组相比,抗TIM-4组M1型巨噬细胞百分比和p35 mRNA表达水平无明显变化(P均>0.05),而M2型巨噬细胞百分比、IL-10、p40和EBi-3 mRNA表达水平均显著升高(P均<0.05),miR-21表达水平显著降低(P<0.05)。结论:阻断TIM-4分子促进小鼠腹腔M2增殖分化,上调脾和腹腔细胞中抑炎因子和促炎因子mRNA表达,减轻同种异体免疫排斥反应。

miR-21及FOXM1在妊娠期高血压与子痫前期患者血清中的表达

目的探讨微小RNA-21(miR-21)及叉头框蛋白M1(FOXM1)在妊娠期高血压(GHT)与子痫前期(PE)患者中的表达及意义。方法选取妊娠期高血压疾病(HDP)患者150例,其中GHT患者112例作为GHT组、PE患者38例作为PE组,选择年龄及孕周匹配同期产检正常孕妇150例作为对照组;3组均于入组当天采集晨空腹外周静脉血4 mL,检测血清miR-21及FOXM1水平;分析GHT组及PE组患者血清miR-21与FOXM1 mRNA的相关性,绘制受试者工作特征曲线(ROC)计算曲线下面积(AUC),评估PE的影响因素;分析miR-21及FOXM1 mRNA对PE的预测价值及对妊娠结局的影响。结果PE组、GHT组血清miR-21及FOXM1 mRNA水平低于对照组,PE组低于GHT组(P<0.05);PE组、GHT组miR-21与FOXM1 mRNA均呈正相关(P<0.05);miR-21及FOXM1 mRNA是PE的独立保护因素(P<0.05);基于miR-21及FOXM1 mRNA构建的风险模型评估PE的AUC值为0.841,高于miR-21及FOXM1 mRNA单独评估的AUC值(P<0.05);PE组不良妊娠结局发生率高于GHT组(χ^(2)=4.053,P=0.044),不良妊娠结局患者血清miR-21及FOXM1 mRNA水平低于正常妊娠者(P<0.05)。结论miR-21表达降低可能会靶向下调FOXM1 mRNA表达,促进GHT与PE的发生、发展,且与不良妊娠结局有关。

猪源植物乳杆菌JL01调节巨噬细胞极化抗鼠伤寒沙门菌作用的研究

为探讨猪源植物乳杆菌JL01对巨噬细胞极化的作用,本试验使用猪肺泡巨噬细胞系3D4/21作为研究对象,采用JL01体外与3D4/21共培养,通过检测M1型与M2型巨噬细胞标志蛋白i NOS、Arg-1表达及细胞因子TNF-α、IL-6和IL-10的分泌情况,以明确JL01调节巨噬细胞极化的方向。通过免疫荧光及涂板计数,检测巨噬细胞对鼠伤寒沙门菌的吞噬杀伤效应。结果显示,JL01可以提高i NOS和Arg-1的表达,并促进TNF-α、IL-6和IL-10的分泌,但i NOS表达增强更为显著,且能增强巨噬细胞杀伤沙门菌的能力。上述结果表明,植物乳杆菌JL01能够促进巨噬细胞的M1型极化并增强对沙门菌的抵抗能力。