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MHC-Ⅱ类分子与hTSH受体共表达系统的建立 被引量:2
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作者 田竹芳 雒文田 +1 位作者 吴晓燕 朱本章 《实用医技杂志》 2004年第10A期1949-1952,共4页
目的 :应用电击基因导入法 ,建立 MHC- 类分子与 h TSHR共表达体系 (h Ml2 ) ,为 GD发病机制的研究奠定基础。方法 :采用电击基因导入法将质粒 p CRTM3- h TSHR转染于 M12细胞 (H- 2 d) ,应用 G4 18筛选出阳性细胞 ,经有限稀释获得单... 目的 :应用电击基因导入法 ,建立 MHC- 类分子与 h TSHR共表达体系 (h Ml2 ) ,为 GD发病机制的研究奠定基础。方法 :采用电击基因导入法将质粒 p CRTM3- h TSHR转染于 M12细胞 (H- 2 d) ,应用 G4 18筛选出阳性细胞 ,经有限稀释获得单克隆细胞株。用逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)法检测单克隆细胞内 h TSHR胞外段 m RNA的表达 ;用甲亢病人血清粗提 Ig G及 b TSH刺激后测定上清中 c AMP值以检测单克隆细胞株表达的 h TSHR是否具有天然 h TSHR功能。结果 :应用有限稀释法获得 14株单克隆细胞。RT- PCR结果显示 :3号、5号、6号、8号、11号细胞内有高水平的 h TSHR胞外段 m RNA的转录。应用甲亢病人血清粗提 Ig G及 b TSH刺激后 ,6号、8号细胞上清中c AMP值明显升高 ,与对照组之间存在显著差别 (P<0 .0 5 )。结论 :应用电击基因导入法成功地建立了 MHC- 类分子与 h TSH受体共表达体系。 展开更多
关键词 单克隆 TSH受体 MHC 共表达 胞外段 细胞内 病人 基因导入 稀释 应用
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主要组织相容性复合物Ⅱ对Graves病发病影响的研究
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作者 田竹芳 雒文田 +1 位作者 吴晓燕 徐利 《中国现代医药杂志》 2009年第11期1-4,共4页
目的应用主要组织相容性复合物(MHC)Ⅱ与人TSH受体(TSHR)共表达细胞(hM12细胞)模拟Graves病(GD)时的甲状腺细胞,免疫C57BL/6小鼠,诱导GD动物模型,以研究异常表达于GD患者甲状腺滤泡上皮细胞上的MHC-Ⅱ分子是否是GD的致病因素。方法试验... 目的应用主要组织相容性复合物(MHC)Ⅱ与人TSH受体(TSHR)共表达细胞(hM12细胞)模拟Graves病(GD)时的甲状腺细胞,免疫C57BL/6小鼠,诱导GD动物模型,以研究异常表达于GD患者甲状腺滤泡上皮细胞上的MHC-Ⅱ分子是否是GD的致病因素。方法试验组C57BL/6小鼠8只,用hM12细胞进行腹腔免疫,每2周1次,共6次,对照组C57BL/6小鼠5只,用M12细胞免疫,方法同试验组。受试小鼠末次免疫5周后,检测以下指标:甲状腺激素水平;甲状腺刺激性抗体(TSAb);甲状腺组织学检查。结果C57BL/6小鼠试验组2/8小鼠诱导为Graves甲亢。C57BL/6小鼠的T细胞(MHC-Ⅱ为H-2b)不能识别由hM12细胞(H-2d)提呈的抗原,C57BL/6小鼠出现GD样变化可能是hM12细胞表达的TSHR被小鼠体内职业性抗原递呈细胞(APCs)获取,经加工处理提呈给T细胞,诱发自身免疫反应的结果。结论异常表达于GD患者甲状腺滤泡上皮细胞上的MHC-Ⅱ分子可能与GD的发病无关,而是一种自身免疫反应的继发现象。 展开更多
关键词 主要组织相容性复合物Ⅱ 促甲状腺素受体 m12细胞 格雷夫斯病
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Induction of animal model of Graves' disease in BALB/c mice
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作者 Zhu-fang Tian1,2,Bing-yin Shi1,Xiao-yan Wu1,Li Xu1 1.Department of Endocrinology,the First Affiliated Hospital,Medical School of Xi’an Jiaotong University,Xi’an 710061 2.Department of Endocrinology,Xi’an Central Hospital,Xi’an 710003,China 《Journal of Pharmaceutical Analysis》 SCIE CAS 2009年第4期211-214,221,共5页
Objective To construct an animal model of Graves’ disease(GD)by immunizing BALB/c mice with hM12 cells co-expressing major histocompatibility complex(MHC)class II molecules and human thyrotropin receptor(TSHR)molecul... Objective To construct an animal model of Graves’ disease(GD)by immunizing BALB/c mice with hM12 cells co-expressing major histocompatibility complex(MHC)class II molecules and human thyrotropin receptor(TSHR)molecules.Methods BALB/c mice in experimental group(H-2d)were immunized with hM12 cells intraperitoneally every 2 weeks for six times,while mice in control group were immunized with M12 cells.Five weeks later,the thyroids were histologically examined,and serum samples were tested for thyroid-stimulating antibodies(TSAb)and thyroid hormone levels.Results One BALB/c mouse in experimental group developed Graves’-like disease.Total T4 and T3 levels in this mouse were above the upper limit of normal,TSAb activity was displayed in its serum.The thyroid histologically showed the features of thyroid hyperactivity including thyrocyte hypercellularity and colloid ABSorption.None of control mice developed Graves’-like disease.Conclusion An animal model with some characteristics of human Graves’ disease was successfully induced and the model will facilitate studies aimed directly at understanding the pathogenesis of autoimmunity in Graves’ disease. 展开更多
关键词 major histocompatibility complex thyrotropin receptor m12 cell Graves' disease
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