黑素瘤细胞培养上清液对人单核细胞体外IL-12产生和CD14、CD1a表达的影响

目的探讨M14黑素瘤细胞培养上清液(MCS)在体外对人外周血单核细胞分泌白介素12 (IL-12)以及单核细胞向树突细胞分化的影响。方法分离并获得人外周血单核细胞,添加不同量的MCS与单核细胞共培养,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测单核细胞IL-12的分泌情况;将MCS与单核细胞连续5d共培养,用流式细胞仪分析单核细胞表面CD14、CD1a的表达情况。结果MCS对单核细胞分泌活性的影响呈浓度依赖关系,随MCS添加量的逐渐增加(25-100μL),单核细胞分泌IL-12的量则呈逐渐降低趋势(158.40±21.37 pg/mL-56.90±15.60 pg/mL,P<0.05);同时MCS妨碍单核细胞由CD14表型(5.47%±1.00%-17.87%±2.40%,P<0.01)向树突细胞CD1a表型(41.00%±2.12%-20.00%±4.24%,P<0.01)转化;且MCS抑制单核细胞IL-12分泌和抑制单核细胞向树突细胞表型转化的作用均能被细胞外信号调节激酶(ERK)特异性抑制剂(PD98059)所逆转(分别为:172.63±8.88 pg/mL,P<0.05; 8.67%±0.47%,P<0.05;36.67%±0.71%,P<0.05)。结论MCS可能通过分泌ERK刺激因子对单核细胞分泌IL-12p40和单核细胞分化起到抑制作用。

普伐他汀对人单核细胞源树突状细胞免疫功能的影响

目的探讨普伐他汀对在免疫调控中起重要作用的人单核细胞源树突状细胞(DC)免疫功能的影响.方法采用免疫磁珠法分离人外周血CD14+单核细胞,经含重组粒细胞-巨噬细胞刺激因子(100 ng/ml)和重组白介素(rhIL)-4(20 ng/ml)的Cellgro培养,使其分化为DC.DC与50～100 μmol/L普伐他汀孵育72 h后,采用流式细胞术检测DC表型(CD1a、CD40、CD86、HLA-DR),混合T淋巴细胞反应检测DC对淋巴细胞增殖的影响,采用酶联免疫吸附试验法检测细胞培养上清液中Th1/Th2 [白介素(IL)-12、干扰素(IFN)-γ/ IL-2、IL-10]细胞因子的浓度.结果与对照组相比,经普伐他汀处理的DC可下调CD80、CD86、 HLA-DR和CD1a的表达,对T淋巴细胞增殖作用明显减弱,明显抑制DC Th1细胞因子IL-12和IFN-γ的分泌(P<0.05),但对Th2细胞因子IL-2 和IL-10水平无明显影响.100 μmol/L甲羟戊酸可逆转普伐他汀的作用.结论普伐他汀可明显抑制DC的成熟和免疫活性,此作用与甲羟戊酸途径有关.这可能是他汀类药物免疫调节的新机制.