Neo-Sensitab纸片扩散法与NCCL SM27-A微量稀释法测定97株酵母对抗真菌药物敏感性的比较

目的比较Neo-Sensitab纸片扩散法和NCCLS微量稀释法的一致性,评价该商品化方案的稳定性。方法同时采用NCCLSM27-A微量稀释法和Neo-Sensitab纸片扩散法测定临床分离的97株酵母对两性霉素B(AMB)、氟康唑(FCZ)、5-氟胞嘧啶(5-FC)、酮康唑(KCZ)和伊曲康唑(ITC)等五种常用抗真菌药物的敏感性。结果两种方法的药敏结果一致率分别为AMB100%,FCZ94.8%,5-FC93.8%,KCZ75.3%和ITC84.5%。结论纸片扩散法和微量稀释法药敏测试结果一致率较高,以FCZ、AMB和5-FC最佳,该方法检测敏感株的准确率较高,而在区分耐药株和中介株方面有所不足。

比较3种微量肉汤稀释法检测念珠菌对氟康唑的敏感度

目的比较3种肉汤稀释药敏检测方法检测念珠菌对氟康唑敏感度的检测能力。方法收集河北医科大学第二医院临床分离的念珠菌84株,采取经典微量肉汤稀释法、ATB FUNGUS 3方法和Yeast One真菌药敏板方法检测念珠菌对氟康唑的敏感度。结果84株念珠菌中,白念珠菌26株,热带念珠菌34株,光滑念珠菌22株以及近平滑念珠菌2株。以经典微量肉汤稀释法为参考方法,ATB FUNGUS 3方法的敏感度为87.5%,特异度为100.0%;基本一致性为95.2%,分类一致性为92.9%;假耐药率为7.1%,假敏感率为0。Yeast One方法的敏感度为100.0%,特异度为94.4%;基本一致性和分类一致性均为97.6%,假敏感率和假耐药率均为0。结论Yeast One真菌药敏板方法检测氟康唑对念珠菌活性优于ATB FUNGUS 3方法。

肉汤微量稀释法对耐多药结核分枝杆菌敏感性检测的评价

目的评价肉汤微量稀释(BMD)法在耐多药结核分枝杆菌(MDR-MTB)敏感性检测中的应用效果。方法采用罗氏比例法和BMD法对海南省108株MDR-MTB及11株非MDR-MTB菌株进行药敏试验,并对两种药敏方法检测结果不一致菌株进行全基因组测序(WGS)。结果罗氏比例法和BMD法药敏结果平均判读时间分别为28.0、8.5 d。罗氏比例法检测异烟肼、利福平、乙胺丁醇、卡那霉素和卷曲霉素的耐药率高于BMD法(均P<0.001);BMD法检测丙硫异烟胺和对氨基水杨酸的耐药率高于罗氏比例法(均P<0.001)。以罗氏比例法药敏结果为金标准,BMD法检测耐药性的灵敏度和特异度分别为50.00%~100%、95.69%~100%,除EMB(87.39%)、INH(94.96%)外,BMD法检测其他药物的耐药性符合率均≥95%。罗氏比例法药敏结果与WGS总符合率为76.19%(32/42),BMD法药敏结果与WGS总符合率为23.81%(10/42),差异具有统计学意义(χ^(2)=23.048,P<0.001)。两种药敏方法检测结果不一致的MTB共34株,罗氏比例法耐药+BMD法敏感的26株MTB中,22株(84.62%)相关耐药基因发生突变;罗氏比例法敏感+BMD法耐药的11株MTB中,5株(45.45%)相关耐药基因发生突变。结论BMD法是一种准确、快速的MDR-MTB敏感性检测方法,但仍需要进一步改进和优化,耐药性与相关耐药基因的突变密切相关。

比较Thermo STP6F药敏测定卡与微量肉汤稀释法测定链球菌对抗菌药物的敏感性

目的为临床提供快速、准确、方便的链球菌药敏试验测定方法,比较ThermoSTP6F药敏测定卡与金标准微量肉汤稀释法测定链球菌对抗菌药物的敏感性。方法按CLSI要求,用ThermoSTP6F药敏测定卡检测199株链球菌(肺炎链球菌、化脓链球菌和无乳链球菌),与微量肉汤稀释法结果进行比较。结果两种药敏测试方法涵盖10种抗菌药物对肺炎链球菌的药敏试验结果,分类一致率(CA)为94.6%,基本一致率(EA)为95.5%,重大偏差(VMD)为0.5%,较大偏差(MD)为1.2%,次要偏差(mD)为4.6%;对化脓链球菌两种方法测试结果的CA为99.2%,EA为95.0%,VMD为0.8%,MD为0.8%,mD为0;对无乳链球菌两种方法测试结果的CA为97.8%,EA为93.6%,VMD为1.1%,MD为0.9%,mD为1.2%。ThermoSTP6F药敏测定卡所得数值常比标准方法略高。结论ThermoSTP6F药敏测定卡对链球菌的检测结果与微量肉汤稀释法一致性较好,在用于检测肺炎链球菌对美罗培南敏感性时建议结合E试验法复核确认。

96点阵琼脂稀释法与微量肉汤稀释法药敏试验结果的对比

目的为了验证96点阵琼脂稀释法进行药敏试验的可靠性和有效性,与国际通用的微量肉汤稀释法进行对比。方法用微量肉汤稀释法和96点阵琼脂稀释法分别对质控菌株E.coli ATCC25922、临床分离E.coli进行4种不同药物(头孢噻呋、庆大霉素、氟苯尼考和多西环素)的药敏试验,并经过多次重复和对比。结果这两种检测方法所测定的菌株的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)完全相同者占30%~50%,相差1个梯度占80%,3个梯度以内的吻合率高达96%以上,96点阵琼脂稀释法具有很好的重复性和稳定性。结论 96点阵琼脂稀释法与微量肉汤稀释法两种方法测定的MIC没有显著差异,可共用一个质控标准。96点阵琼脂稀释法的标准化和规范化,有利于高通量药敏检测的进行,推动建立完善的抗药性监测技术体系。

纸片扩散法与微量肉汤稀释法检测鲍曼不动杆菌对替加环素体外敏感性的比较

目的比较微量肉汤稀释法和纸片扩散法对耐药饱曼不动杆菌替加环素敏感性试验检测结果。方法收集临床分离的非重复鲍曼不动杆菌42株,其中MDR菌株11株,XDR菌株31株,采用微量肉汤稀释法和纸片扩散法进行替加环素药物敏感性试验,比较检测结果的符合性。结果微量肉汤稀释法检测替加环素的敏感率、中介率和耐药率分别为97.6%、2.4%和0%,MIC500.5μg/mL,MIC902μg/mL。纸片扩散法药敏检测,不同药敏折点替加环素的敏感率从高到低依次为:Jones标准为28.6%,Kulah C标准为16.7%,FDA标准为2.4%,3种折点标准的中介率都很高,在45.2%～61.9%之间。与微量肉汤稀释法比较,不同药敏折点标准的总误差分别为Jones标准71.4%,Kulah C标准83.3%,FDA标准97.6%。以抑菌环直径≥12 mm作为敏感折点时总误差最小。结论耐药鲍曼不动杆菌的替加环素药敏检测中,纸片扩散法与微量肉汤稀释法之间存在差异,稀释法仍是首选检测手段,如只能行纸片法检测,建议以抑菌环直径≥12 mm判定为敏感。

微量肉汤稀释法测定长裙竹荪多种提取物对食品中常见细菌的抑制效果

选取长裙竹荪为样品,采用索氏抽提后水蒸馏萃取获得挥发油,同时分别以乙醇、正丁醇、石油醚等有机溶剂萃取得到相应提取物。以8种食品中常见细菌为供试对象,由微量肉汤稀释法测得各类提取物对其的MIC值,作为评价其抑菌效果的指标。结果表明:纯培养环境下,挥发油的抑菌效果优于三种有机溶剂提取物。通过与平板涂布计数结果及其它方法比较分析,进一步证明肉汤稀释法作为测定抑菌效果所具有的优越性。

Sensititre YeastOne显色药敏板与微量肉汤稀释法检测曲霉体外抗真菌药物敏感性的一致性研究

目的评估显色药敏板Sensititre YeastOne与微量肉汤稀释法检测曲霉体外抗真菌药物敏感性的一致性。方法使用同样的孢子悬液按照CLSI M38-A2微量肉汤稀释法和Sensititre YeastOne YO10对307株曲霉进行体外抗真菌药物敏感性试验,计算两种药敏方法结果间的基本一致性、分类一致性以及错误率。结果CLSI M38-A2药敏试验显示98.4%(302/307)曲霉菌株对测试的6种抗真菌药物持野生型状态,Sensititre YeastOne则检出97.1%(298/307)菌株为野生型。除伊曲康唑外,其余5种抗真菌药物在Sensititre YeastOne与CLSI M38-A2间的基本一致性均>90%。两种方法在曲霉药物敏感性检测的分类一致性为98.1%(301/307),极显著错误率为0.3%(1/307),显著错误率为1.6%(5/307)。结论Sensititre YeastOne在检测曲霉体外药物敏感性方面与CLSI方法一致性良好,可用于临床实验室曲霉体外药敏检测。

微量肉汤稀释法比较分析不同培养时间念珠菌属对唑类药物的敏感性

目的探讨微量肉汤稀释法检测念珠菌属对唑类药物的体外敏感性时,培养24h和48h读取MIC值的差异。方法微量肉汤稀释法检测653株念珠菌对氟康唑、伏立康唑和伊曲康唑的体外药物敏感性,分别于24h和48h读取MIC值,比较不同孵育时间所得MIC总一致率(EA)、敏感性判定一致率(CA)及敏感性判定错误率(Error)。结果绝大多数念珠菌培养24h能够生长充分并进行MIC值读取;孵育24h和48h读取MIC值总EA较好,分别为:氟康唑(91.9%),伏立康唑(92.0%),伊曲康唑(95.6%);CA分别为氟康唑(96.9%),伏立康唑(90.4%),伊曲康唑(88.2%),不同菌种类型CA有差异;未发现极严重错误(VME)的结果,错误多为一般错误(MiE),653株菌敏感性判定错误率ME/MiE分别为氟康唑(1.7%/2.9%)、伏立康唑(2.0%/10.6%)和伊曲康唑(1.5%/13.0%)。结论微量肉汤稀释法检测念珠菌属对唑类药物体外敏感性时,孵育24h与48h MIC值一致率较好,24h读取MIC值可缩短药敏报告时间,减少拖尾现象导致的判读错误。

Etest方法与微量肉汤稀释法检测念珠菌属对唑类抗真菌药物的敏感性评价

目的比较分析Etest法检测临床常见念珠菌对氟康唑、伏立康唑和伊曲康唑敏感性与微量肉汤稀释法的一致率。方法针对220株临床常见的5种念珠菌,分别采用CLSI M27微量肉汤稀释法和Etest法进行药物敏感性检测。分别统计Etest法与微量肉汤稀释法检测三种唑类药物的基本一致率(EA)和分类一致率(CA)。结果 Etest方法和微量肉汤稀释法的EA分别为氟康唑(96.8%)、伏立康唑(97.3%)和伊曲康唑(81.8%)。对于氟康唑、伏立康唑和伊曲康唑,白念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌、光滑念珠菌和克柔念珠菌中两种检测方法的CA分别为96.2%,97.5%和—;92.5%,82.5%和97.5%;92.5%,97.5%和—;97.5%,—和70%;—,100%和90%。结论 Etest法检测念珠菌对唑类药物敏感性与微量肉汤稀释法一致率较高,是念珠菌唑类药物敏感性测定简便并且准确性较高的检测方法,推荐在真菌实验室常规使用。

微量肉汤稀释法检测中药香囊挥发油对5种呼吸道致病菌抗菌作用

目的：探讨中药香囊提取挥发油在体外对5种呼吸道常见致病菌的抗菌作用。方法采用微量肉汤稀释法测定中药香囊挥发油对肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌标准菌株的最小抑菌浓度值和临床分离菌株最小抑菌浓度范围。结果挥发油对以上5种菌标准菌株最低抑菌浓度值分别为小于或等于0．00015、0．000125、0．00125、0．00145、＞0．08，对临床分离菌最低抑菌浓度范围分别为小于或等于0．00015、0．00025～0．000145、0．0025～0．000625、0．0025～0．00125、＞0．08。结论除铜绿假单胞菌外，中药香囊挥发油对肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌均有较好的抗菌效果。

纸片扩散法和微量肉汤稀释法检测念珠菌氟康唑和伏立康唑药物敏感性的比较

目的评价纸片扩散法与微量肉汤稀释法检测念珠菌对氟康唑和伏立康唑药物敏感性的一致率。方法针对218株侵袭性真菌感染部位分离的念珠菌,分别采用美国临床和实验室标准协会(CLSI)M44-A2纸片扩散法和CLSIM27微量肉汤稀释法进行药物敏感性检测。依据2018年颁布的CLSIM60新的纸片扩散法判定折点,以微量肉汤稀释法为标准评估纸片扩散法测定结果的分类一致率和错误率。结果2种方法检测白念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌和光滑念珠菌氟康唑药物敏感性的一致率分别为97.6%、95.1%、97.4%和90.5%。2种方法在检测白念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌和克柔念珠菌伏立康唑敏感性的一致率分别为97.6%、90.2%、97.4%和81.2%。结论纸片扩散法检测念珠菌对氟康唑和伏立康唑的药物敏感性与微量肉汤稀释法一致率较高,是念珠菌药物敏感性测定简便且准确性较高的检测方法,推荐在真菌实验室常规检测或耐药监测网使用。

Sensititre YeastOne显色药敏板与微量肉汤稀释法检测阿萨希毛孢子菌体外药物敏感性比较研究

目的以CLSI微量肉汤稀释法为参考方法,探讨商品化显色药敏板(Sensititre YeastOne)检测阿萨希毛孢子菌体外药物敏感性的临床应用价值。方法分别用微量肉汤稀释法和Sensititre YeastOne同时检测62株阿萨希毛孢子菌对临床常用7种抗真菌药物的体外敏感性,MIC值读取时间分别为24h和48h。结果微量肉汤稀释法结果显示卡泊芬净和米卡芬净对阿萨希毛孢子菌无体外活性,二者MIC90均为16μg/mL;唑类药物对阿萨希毛孢子菌体外活性较好,培养24h MIC90分别为氟康唑8μg/mL、伏立康唑0.125μg/mL、伊曲康唑0.5μg/mL;4.8%(3/62)阿萨希毛孢子菌对两性霉素B有高MIC值(4μg/mL);经24h培养,Sensititre YeastOne与微量肉汤稀释法检测阿萨希毛孢子菌对7种抗真菌药物的体外MIC一致率(essential agreement,EA)分别为氟康唑93.5%,伏立康唑98.4%,伊曲康唑98.4%,两性霉素B 98.4%,5-氟胞嘧啶88.7%,卡泊芬净100%,米卡芬净100%;培养48h后,二者检测两性霉素B和5-氟胞嘧啶MIC一致率有所下降,分别为83.9%和67.7%;对微量肉汤稀释法而言,培养时间对两性霉素B和5-氟胞嘧啶MIC值影响较大,24h和48hMIC一致率分别为69.4%和53.2%,对Sensititre YeastOne,MIC值明显受培养时间影响的药物仅见于5-氟胞嘧啶,24h和48h MIC一致率为11.3%,其余药物不同MIC读取时间一致率非常好。结论唑类药物对阿萨希毛孢子菌体外抗菌活性较好,Sensititre YeastOne和微量肉汤稀释法检测阿萨希毛孢子菌体外MIC值一致率较高,用于临床阿萨希毛孢子菌体外药物敏感性检测具有一定的实用价值。

两种微量肉汤稀释法药敏板用于沙门菌药敏检测结果比较

目的比较和评价2种品牌微量肉汤稀释法药敏板用于沙门菌药敏检测的可重复性和一致性。方法选择6株不同血清型的沙门菌,同一检测人员使用两种药敏板测试13种药物的最小抑菌浓度(MIC),分别重复2次,观察两种药敏板实验结果的可重复性和一致性。结果在2种药敏板的可重复性评价中,2种药敏板分别有17.95%和5.12%的实验孔存在差异,均只相差一个梯度值;2种药敏板MIC出现差异的实验孔在定性判断上无差异。在实验结果一致性评价中,2种药敏板中16.67%的实验孔存在差异,有差异结果的实验孔均只相差一个梯度值;在定性判断方面,未出现"敏感"和"耐药"的差异。结论 2种MIC药敏板用于沙门菌药敏检测的可重复性和一致性好,其实验结果可以进行综合分析,但是需要考虑MIC一个梯度的实验误差。

国产微量肉汤稀释法药敏试剂检测常见多重耐药菌

目的观察一种国产自动化微量肉汤稀释法药敏试剂检测常见多重耐药菌的准确性和实用性。方法采用珠海迪尔生物有限公司生产的细菌测定系统微量肉汤稀释法(MIC法)药敏试剂与纸片扩散法(K-B法)药敏试剂同时对葡萄球菌、大肠埃希氏菌和肺炎克伯菌的耐药性菌进行检测。结果 63株葡萄球菌中耐甲氧西林的葡萄球菌(MRS)检测MIC法阳性37株、阴性26株,K-B法阳性37株、阴性26株;45株葡萄球菌中红霉素诱导克林霉素耐药检测MIC法阳性19株、阴性26株,K-B法阳性20株、阴性25株;42株大肠埃希氏菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测MIC法阳性30株、阴性12株,K-B法阳性30株、阴性12株;53株肺炎克雷伯菌中产ESBLs检测MIC法阳性20株、阴性33株,K-B法阳性20株、阴性33株。结论该自动化细菌MIC法药敏试剂与经典药敏K-B法比较对常见多重耐药菌检测结果一致。

简易法与微量肉汤稀释法测定抗生素敏感性的比较研究

目的在微量肉汤稀释法的基础上，建立简易微量肉汤稀释法。方法同时采用两种方法检测了５３株临床分离Ｇ＋球菌和Ｇ－杆菌对多种抗生素的敏感性，并对其结果进行了比较。结果两种方法所测得的敏感率之间的差异无统计学意义，两方法相符合率达９０％以上。结论简易法准确性较高，此外还具有重复性好、操作更简便。

微生物生长传感器药敏试验方法与微量肉汤稀释法的对比研究

渔业生态环境监测与保护、水产病害防治等众多领域的活动都需要对病原微生物进行药敏试验(Antimicrobial susceptibility testing,AST)。本研究以副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)为模式微生物,以卡那霉素、四环素、青霉素和恩诺沙星为代表性抗生素,对比研究了微生物生长传感器AST法和标准微量肉汤稀释(Broth microdilution,BMD)AST法的性能特征。结果显示,无论是标准菌株还是来自养殖环境和对虾的分离菌株,分别测定4种抗生素对它们的剂量效应时,2种方法所得最小抑菌浓度(Minimum inhibitory concentration,MIC)值的基本一致率(Essential agreement,EA)都是100%,因而具有高度吻合性。微生物生长传感器AST法测定的MIC值往往不小于BMD AST法的测定结果,表明自动化仪器法的灵敏度高于肉眼观察。比较而言,微生物生长传感器AST法因为能提供细菌生长实时动力学曲线而呈现更高的效率和更多的抗生素响应信息,而且自动化程度高,操作简便,用户友好,因而具有更好的应用推广前景。

微量肉汤稀释法在肠杆菌科细菌药敏试验中的应用研究

目的:对微量肉汤稀释法检测抗菌药物最低抑菌浓度(MIC)的准确性进行评价,为其应用推广奠定基础。方法:收集351株肠杆菌科细菌,采用微量肉汤稀释法和自动化仪器法检测抗菌药物的MIC,比较两者药敏结果的一致性。结果:微量肉汤稀释法与自动化仪器法的药敏结果比较差异无统计学意义,两种方法的药敏检测结果无明显的差异。结论:微量肉汤稀释法具有较高的准确性,利用该方法检测抗菌药物MIC的成本低于自动化仪器法,药物选择更加灵活,可应用于常规工作,为临床合理使用抗生素提供依据。

用NCCLS M27-A微量法测定白色念珠菌对氟康唑的药物敏感性

目的:探讨体外药物敏感试验测定白色念珠茵的药物敏感性。方法:根据美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)M27-A方案的微量液体稀释法,对34株健康人口腔中分离的白色念珠菌进行药敏试验,测定其MIC值。结果:34株白色念珠茵MIC值在0.25-2.0μg/ml之间,所有菌株对氟康唑均有不同程度的敏感性。结论:NCCLS推荐的M27-A微量稀释法具有易操作、实用性强、结果稳定、重复性好的优点。健康人群来源的白色念珠茵对氟康唑敏感存在差异。