M2F:由质量信息推测化学式的一个通用程序

提出了一个基于动态规划设计思路的分解质量通用算法,并据此编写了一个由质荷比求解化学式的程序M2F。通过计算文献报道的质荷比数据,证明M2F计算速度快且结果准确。应用M2F程序对化合物的高分辨质量数据进行结构预测,可以大幅简化化合物的质谱解析过程。

仿鱼长鳍波动推进器研究的进展与分析

仿鱼长鳍波动推进是未来水下航行器的一个发展趋势和重要的研究方向,文章介绍了长鳍波动推进器的生物学背景,分析了长鳍波动推进的数学方法,对国内外仿鱼长鳍波动推进器的研究现状和取得的成果进行了综述,并扼要分析了目前仿鱼长鳍波动推进器控制研究的主要问题。推进系统控制遇到的挑战是大扰动情况下的状态保持、迅速机动、高效持久推进和轨迹规划与跟踪,从推进器的设计和控制上解决这些困难将依赖于工程技术科学和生物科学的进展状况。

His-tag不影响RSV重组蛋白G1F/M2的免疫原性

目的:观察His-tag是否影响RSV重组蛋白G1F/M2的免疫原性。方法:PCR扩增G1和F/M2基因片段,插入表达载体pET-His和pET-DsbA-His中,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,采用Ni+螯合亲和层析法纯化得His-G1F/M2和DsbA-His-G1F/M2,将后者用凝血酶消化,再经Ni+螯合亲和层析法纯化得G1F/M2,将His-G1F/M2和G1F/M2免疫BALB/c小鼠,用ELISA测定抗体滴度,MTT法测定细胞毒性T细胞活性(CTL)。结果:两种蛋白在BALB/c小鼠中诱导的RSV特异性抗体和CTL活性无显著差异。结论:His-tag不影响RSV重组蛋白G1F/M2的免疫原性。

RSV CTL表位与G蛋白片段的融合表达对G蛋白片段诱导的免疫应答的调节作用

目的:观察呼吸道合胞病毒(RSV)的CTL表位F/M2与G蛋白抗原活性片段G1融合表达后,对G1诱导的免疫应答的调节作用。方法:将重组表达质粒pET-DsbA-G1和pET-DsbA-G1F/M2分别转化E.coli BL21(DE3),诱导表达融合蛋白DsbA-G1和DsbA-G1F/M2,亲和层析纯化。取上述蛋白,腹腔注射免疫BALB/c小鼠,定期采集血清和脾细胞,用MTT法测定CTL杀伤活性,ELISA测定IgG及其亚类IgG1和IgG2a抗体滴度,空斑抑制实验检测血清中和抗体。结果:经表达和纯化获得了纯度达90%以上的融合蛋白;DsbA-G1F/M2诱导了显著的RSV特异性CTL杀伤活性,而无CTL表位的DsbA-G1则不能诱导产生CTL反应;DsbA-G1F/M2和DsbA-G1均刺激产生了强烈的IgG抗体应答,但DsbA-G1所产生的IgG亚类仅为IgG1,而DsbA-G1F/M2同时诱导了高滴度的IgG1和IgG2a,显著下调了IgG1与IgG2a的比例;二者均诱导了高滴度的中和抗体,但与DsbA-G1相比,DsbA-G1F/M2所诱导的中和抗体滴度有所减弱。结论:CTL表位F/M2与G蛋白片段G1的融合表达产物DsbA-G1F/M2,能够同时诱导细胞免疫和体液免疫应答,CTL的激活下调了IgG1与IgG2a的比例,使得免疫应答更平衡,有利于改善该候选疫苗的安全性。

IL-23、IL-27对RSV重组蛋白疫苗免疫原性的影响

目的:以编码IL-23和IL-27的真核表达质粒pcDNA3.1-IL-23(以下简称IL-23)和pcDNA3.1-IL-27(以下简称IL-27)为佐剂,与呼吸道合胞病毒(RSV)重组蛋白疫苗G1F/M2共免疫小鼠,观察IL-23和IL-27对疫苗的免疫原性的影响。方法:以IL-23、IL-27质粒和Al(OH)3为免疫佐剂,与G1F/M2共免疫BALB/c小鼠,末次免疫后10天杀死小鼠,用ELISA检测特异性IgG、IgG1和IgG2a水平;流式细胞术检测小鼠脾细胞CD4+、CD8+细胞的变化;用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测特异性小鼠脾细胞杀伤活性。结果:G1F/M2+Al(OH)3+IL-23和G1F/M2+Al(OH)3+IL-27可诱导高效价的IgG、IgG1、IgG2a抗体,且显著高于这三种佐剂单独使用诱导的抗体效价;流式细胞检测结果显示G1F/M2+IL-23和G1F/M2+Al(OH)3+IL-23刺激的CD4+T细胞和CD8+T细胞水平显著高于其他组;单独的IL-23或IL-27对G1F/M2诱导的脾细胞杀伤活性没有增强作用,而Al(OH)3+IL-23和Al(OH)3+IL-27佐剂组的杀伤率显著高于单独的IL-23、IL-27或Al(OH)3组。结论:这些结果表明:IL-23或IL-27质粒与传统铝盐佐剂Al(OH)3联合使用能显著增强RSV重组疫苗G1F/M2的免疫原性。

呼吸道合胞病毒重组蛋白DsbA-G1F/M2的制备方法及免疫原性研究

目的建立呼吸道合胞病毒(RSV)重组蛋白DsbA-G1F/M2的制备方法,并研究其免疫原性。方法PCR扩增G1和F/M2基因片段,经酶切后插入原核表达载体pET-DsbA中,构建重组质粒pET-DsbA-G1F/M2,转化大肠杆菌(Escherichiacoli)BL21(DE3),IPTG诱导表达,采用Ni+螯合亲和色谱法纯化尿素变性的包涵体溶液,梯度透析复性,Western-blot鉴定重组蛋白的RSV特异性,免疫BALB/c小鼠,用ELISA测定抗体滴度,MTT法测定细胞毒性T细胞活性(CTL)。结果构建的重组质粒在E.coli中表达了RSV特异性的重组蛋白,经变性、纯化并复性后获得了高纯度的DsbA-G1F/M2(>90%);该蛋白诱导了高滴度的RSV特异性抗体和CTL活性。结论建立了重组蛋白DsbA-G1F/M2的制备方法,该蛋白具有良好的免疫原性,为进一步研究开发RSV重组亚单位疫苗奠定了基础。

siRNA干扰LEF-1的表达对骨肉瘤细胞株F5M2侵袭和迁移的影响

目的:检测LEF-1在骨肉瘤细胞株F4和F5M2中的表达;探讨siRNA干扰前后对骨肉瘤细胞中LEF-1的表达及对细胞侵袭和迁移的影响。方法:采用Western-blot及qRT-PCR检测具有不同转移能力的骨肉瘤细胞株(F4,F5M2)中LEF-1的表达水平;利用RNAi干扰技术将LEF-1 siRNA转染到F5M2细胞中,使用Western-blot检测转染LEF-1 siRNA后细胞中LEF-1蛋白的表达变化;Tanswell实验检测干扰LEF-1的表达对F5M2细胞侵袭和迁移的影响。结果:LEF-1在骨肉瘤细胞株F4,F5M2中差异表达,其中在F5M2细胞中的表达较高。在转染LEF-1 siRNA的F5M2细胞中,LEF-1蛋白表达水平显著降低。Tan-swell实验结果显示,与阴性对照组和空白对照组相比,实验组F5M2细胞的侵袭和迁移能力显著降低。结论:LEF-1 siRNA可以下调骨肉瘤细胞中LEF-1的表达,抑制骨肉瘤细胞的侵袭和转移。LEF-1有可能成为骨肉瘤诊治的新靶点。

基于FPGA的K9F2G08U0M NandFLASH控制器设计

以三星公司的K9F2G08U0M为例,介绍了NandFLASH芯片K9F2G08U0M的基本结构及工作时序,提出了一种基于状态机思想的FLASH控制器的FPGA实现方案,并在ALTERACYCLONE系列的EP1C12芯片上实现了其功能。

国际参考电离层关键输入参数计算及应用

国际参考电离层的关键输入参数是F2层临界频率foF2和传输因子M(3000)F2,文章给出了关于这两个参数的详细计算流程,分析了F2层临界频率foF2和峰值高度hmF2随时间和季节的变化情况,以及F2层峰值电子浓度NmF2和地磁纬度的关系,并简要介绍IRI模型在短波三维数字射线追踪中的应用。

基于“M4R2F”原则的信息系统“监控+”研究与应用

当前,信息系统日益增多,其高可用性要求也日趋严苛,如何保障信息系统的正常、高效运转,是摆在IT管理者面前的严峻课题。本文对传统监控的作用和意义进行客观分析,指出了传统监控理念的局限性和不完备性,归纳出完备性监控应该具备的若干特点（＂M4R2F＂原则）,并提出了＂监控＋＂的概念,丰富和拓展了传统监控的内涵。同时,本文还辅以实例,对＂监控＋＂如何应用于信息系统进行了分析探讨。

EFEMP1促进骨肉瘤侵袭及转移能力的研究

目的检测EFEMP1在骨肉瘤组织及细胞株F4和F5M2中的表达,探讨EFEMP1在骨肉瘤细胞中的表达,明确其对骨肉瘤细胞侵袭和迁移的影响。方法采用免疫组织化学SP法检测45例临床骨肉瘤及12例骨软骨瘤病例肿瘤组织中EFEMP1表达;采用免疫印迹法(Western blot)及逆转录定量PCR(qRT-PCR)检测具有不同转移潜能的骨肉瘤细胞株(F4、F5M2)中EFEMP1的表达水平;Tanswell实验检测重组人EFEMP1对F5M2细胞侵袭和迁移的影响。结果免疫组化结果显示在45例骨肉瘤标本中,有42例EFEMP1阳性(93.3%),其中强阳性为29例(64.4%),3例(6.7%)为阴性。骨软骨瘤中EFEMP1表达均为阴性。qRT-PCR检测以及Western-blot结果显示,在mRNA和蛋白水平上,骨肉瘤细胞株F4和F5M2中均有EFEMP1的表达,F5M2细胞株EFEMP1的表达高于F4细胞株,Western-blot显示EFEMP1在F4和F5中均有表达,且在F5M2中EFEMP1表达水平高于F4(P<0.05),这一结果与qRT-PCR检测结果一致。Tanswell实验结果显示,与阳性对照组和空白对照组相比,实验组F5M2细胞的侵袭和迁移能力显著增加,重组人全长蛋白EFEMP1可促进骨肉瘤细胞的侵袭和迁移能力。结论EFEMP1在人骨肉瘤组织中表达水平增高,骨肉瘤细胞株F4及F5M2中EFEMP1表达阳性,且高转移骨肉瘤细胞株F5M2中EFEMP1表达量较低转移细胞株F4表达水平明显增高,重组人EFEMP1能够促进骨肉瘤细胞侵袭及转移。EFEMP1可为骨肉瘤患者早期诊断和治疗提供一个新的策略。

抗CD3人源化抗体恒定区突变体的体外生物学特性研究

目的 研究抗CD3人源化抗体hu12F6的恒定区突变体hu12F6m的体外生物学活性。方法 通过细胞因子释放分析及早期活化标志分子的检测对hu12F6m的T细胞活化性质进行评价 ;通过体外抗原调变实验考察hu12F6m对T细胞的抑制功能。结果 hu12F6m激活T细胞释放TNF α、IFN γ、IL 10等细胞因子及表达早期活化标志CD6 9分子的水平明显低于hu12F6 ,但其调变CD3抗原的能力保持与hu12F6相似。结论 hu12F6m对T细胞的激活作用显著减弱并保留了对T细胞的抑制功能 ,有望成为一种抗排异能力强、免疫原性和毒副作用小的有效免疫抑制剂。

小型药用内加热旋扭筒真空干燥机

药品干燥大多是间歇生产,规模较小,可是现有小型动态真空干燥机无论是加热面积或F(m2)/V(m3)值都难以满足药品干燥的需要,现实需要开发高效率小型真空干燥机,以填补此方面的空白。