环腺苷酸拟似物8-CPT-cAMP诱导M2b型急性髓系白血病细胞系Kasumi-1细胞分化的研究

为了解环腺苷酸拟似物8-对氯苯硫基环腺苷酸(8-CPT-cAMP)对M2b型急性髓系白血病(AML-M2b)细胞的作用,以AML-M2b细胞株Kasumi-1细胞为模型,通过观察细胞生长、形态、表面分化抗原、细胞周期分布以及对四氮唑蓝的还原能力的改变,研究8-CPT-cAMP对Kasumi-1细胞增殖及分化的影响,并应用半定量RT-PCR和Western blot检测药物处理前后Kasumi-1细胞内AML1-ETO融合蛋白的变化。结果发现,8-CPT-cAMP(200μmol/L)可明显抑制Kasumi-1细胞增殖而促使细胞趋向分化,但这种分化不是典型的完全终末性分化,8-CPT-cAMP对Kasu-mi-1细胞内AML1-ETO融合基因及其编码蛋白的表达无显著影响。结论:8-CPT-cAMP对AML-M2b细胞具有诱导分化效应。

以宫颈粒细胞肉瘤为首发的M2b型急性髓系白血病一例

患者，女，28岁。因结婚3年未孕于2005年10月11日到我院妇科就诊，发现宫颈不规则肿物3cm×3cm×3cm，怀疑宫颈癌，取活检送病理。病理检查：取灰白小组织4块，大小各为0．8cm×0．5cm×0．3cm，镜下示瘤细胞大小相对一致，呈弥漫性浸润，核圆形或卵圆形，核膜厚，可见1至多个核仁，有少量胞质，肿瘤细胞间可见较多量单圆核嗜酸粒细胞，表皮已溃破。免疫组化：LCA、KER、S-100、CD20、CD3均阴性，CD15（＋）、MPO（＋）。诊断为宫颈粒细胞肉瘤。血常规：WBC2．4×10^9／L，中性粒细胞0．32，淋巴细胞0．45，

高三尖杉酯碱联合尼洛替尼治疗M2b型急性髓系白血病

目的:研究高三尖杉酯碱(homoharringtonine,HHT)联合尼洛替尼(nilotinib)治疗M2b型急性髓系白血病(AML-M2b)的效果。方法:应用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测药物对AML-M2b细胞株Kasumi-1的杀伤作用。蛋白质印迹检测干细胞因子受体(C-KIT)和凋亡相关蛋白的表达。通过Compu Syn软件计算药物联合作用效应。应用携带AML1-ETO融合基因与C-KIT突变的AML-M2b白血病移植小鼠模型,研究HHT和尼洛替尼在体内的作用。通过流式细胞术检测小鼠体内绿色荧光蛋白(GFP)阳性白血病细胞的增殖情况。应用Graphpad prism软件统计小鼠生存期。结果:HHT和尼洛替尼对Kasumi-1细胞株作用敏感并呈剂量依赖性(分别为r=0.933,P=0.007和r=0.897,P=0.03),两药联用时具有协同作用(协同系数<0.9)。在体内,与HHT或尼洛替尼单药组相比,HHT联合尼洛替尼可显著抑制小鼠白血病细胞的增殖,协同延长白血病小鼠生存时间(P=0.001 4和P=0.047 5)。结论:HHT联合应用尼洛替尼可协同杀伤AML-M2b白血病细胞,由此为AML-M2b提供了一种潜在的治疗策略。

AML1、AML1-ETO对nucb2基因转录调控活性的影响

本研究旨在探讨造血特异转录因子AML1及M2b型急性髓系白血病(AML-M2b)累及的异常融合蛋白AML1-ETO对凋亡相关基因nucb2(nucleobindin-2)启动子转录活性的影响,探索AML1-ETO对AML-M2b型白血病的分子致病机制。利用实时RT-PCR方法在AML1-ETO诱导型白血病细胞株中研究AML1-ETO在转录水平对于nucb2的调控情况;利用ChIP-qPCR方法在AML1-ETO阳性白血病细胞株中研究AML1、AML1-ETO与nucb2基因启动子之间直接的体内相互作用情况;采用双荧光素酶报告基因检测方法,研究AML1、AML1-ETO对nucb2启动子转录活性的调节作用。结果表明:AML1-ETO的表达与nucb2的表达呈负相关;nucb2可能是AML1、AML1-ETO的靶基因;AML1、AML1-ETO皆对nucb2启动子具有转录抑制作用,且AML1-ETO对nucb2抑制更强。结论:nucb2是AML1、AML1-ETO的直接靶基因,AML1、AML1-ETO通过抑制nucb2启动子的活性对其进行转录调控。

白血病发病原理研究：“多次打击”学说

白血病是一种基因组发生动态变化的造血干/祖细胞疾病。染色体易位和/或基因突变是常见的遗传学异常。近来,研究提示白血病的发生遵循"多次打击"模式。在慢性粒细胞白血病中,GATA-2突变可能与BCR-ABL共同作用导致"急变";在M2b型急性髓性白血病中,C-KIT突变可能是在AML1-ETO基础上的再次遗传学异常;在TEL- AML1相关的儿童急性淋巴细胞白血病中,正常TEL基因丢失作为第二次打击而致病。作者以上述三种白血病为例,阐述其发病原理以及靶向治疗研究所取得的进展。