胆管癌中m7G甲基化调节因子相关预后风险模型的构建及临床意义

目的表观遗传重编程在胆管癌(CCA)进展中起关键作用,m7G甲基化修饰是转录后调控中最常见的碱基修饰形式之一,其通过调节肿瘤相关基因的表达在增殖、侵袭和转移等多种肿瘤相关的生物学活动中发挥着巨大作用。实验研究是探索m7G甲基化调节因子构建的相关修饰模式及其对CCA临床预后及治疗效果的评估。方法分析基于癌症基因组图谱(TCGA)和基因表达综合数据库(GEO)中27个m7G甲基化调节因子[Argonaute2蛋白(AGO2),细胞质脆性X智力迟钝蛋白1(FMR1)相关蛋白1(CYFIP1),脱帽mRNA2(DCP2)、清道夫脱帽酶(DCPS),真核翻译起始因子3(EIF3)亚基D(EIF3D),真核翻译起始因子4A1(EIF4A1),真核翻译起始因子4E(EIF4E),真核翻译起始因子4E家族成员1B(EIF4E1B),真核翻译起始因子4E家族成员2(EIF4E2),真核翻译起始因子4E家族成员3(EIF4E3),真核翻译起始因子4伽玛3(EIF4G3),宝石核细胞器相关蛋白5(GEMIN5),干扰素诱导蛋白5(IFIT5),La核糖核蛋白1(LARP1),Sm样蛋白(LSM1),甲基转移酶1(METTL1),核帽结合蛋白(NCBP)1,NCBP2,NCBP2样蛋白(NCBP2L),NOP2/Sun RNA甲基转移酶家族成员2(NSUN2),Nudix水解酶(NUDT)10,NUDT3,NUDT4,营养素1(SNUPN),WD重复结构域4(WDR4)]的表达水平,利用CCA患者临床数据进行生存分析。对所有患者数据进行共识聚类分析并筛选预后相关的差异表达基因(DEG),为了检测m7G甲基化调节因子及其DEG的影响进行共识聚类分析,进一步建立m7G甲基化评分系统,评估m7G甲基化评分与CCA患者预后的相关性。结果约48%(12/25)的m7G甲基化调节因子DNA拷贝数增加,其中AGO2的拷贝数增加程度最高;约56%(14/25)的m7G甲基化调节因子DNA拷贝数减少,其中EIF4G3的拷贝数减少程度最高,并且与患者预后密切相关;除IFIT5外,其余调节因子之间存在复杂且密切的相互作用关系。17个与CCA患者预后相关的m7G甲基化调节基因,其中LARP1、NUDT3、SNUPN、NCBP2、EIF4E1B、NUDT11、NSUN2、EIF4A1、GEMIN5和CYFIP1的高表达与患者预后正相关,EIF4E3、WDR4、EIF4E2、NUDT4、NCBP1、EIF4E和DCP2的高表达与患者预后不良相关(P<0.05)。通过对m7G甲基化分型之间取交集DEG,DEG主要富集于血管内皮细胞增殖与新生血管生成等。筛选预后相关基因,得到2个具有预后差异的m7G甲基化基因特征亚组,m7G甲基化评分高低两组分型之间差异有统计学意义,即m7G甲基化低评分组患者预后相对较好。结论研究表明,m7G甲基化修饰异常与CCA的发生发展密切相关,并且在肿瘤调控网络的形成中起着重要作用,评估肿瘤中的m7G甲基化修饰模式将有助于指导制定更有效的治疗策略。

m1A/m5C/m6A/m7G调控基因预测胃癌预后及免疫关联性

目的基于m1A/m5C/m6A/m7G甲基化调控基因建立胃癌预后风险预测模型,并分析该模型与免疫的关联性。方法通过癌症基因组图谱(TCGA)-胃癌数据集筛选表达具有显著差异的m1A/m5C/m6A/m7G调控基因,通过单基因Cox回归分析和LASSO算法构建预后风险评分(risk score,RS)模型,使用Kaplan-Meier(K-M)统计进行RS模型验证,并应用细胞系进行RT-qPCR验证。利用单因素、多因素Cox回归分析建立nomogram模型。使用CIBERSORT算法和estimate包进行免疫关联性分析。结果建立了基于八个甲基化调控基因的预后RS模型,将胃癌患者分为高风险和低风险。这八个基因在胃癌细胞系中高表达(P<0.05)。在TCGA-胃癌训练集和GSE62254-验证集中,患者总生存率(OS)与分组状态之间存在显著相关性(P<0.001)。nomogram生存模型预测的1年(C-index=0.703)、3年(C-index=0.729)和5年(C-index=0.734)生存率与实际生存率的一致性较好。免疫关联性分析表明,与低风险患者组相比,高风险患者组免疫评分和免疫检查点相关基因的表达较高(P<0.05)。结论基于m1A/m5C/m6A/m7G调控基因的预后RS模型可预测胃癌预后并指导个体免疫治疗决策。

浅析青海都兰哈日赛墓地M7出土服饰

2019年,青海省文物考古研究所在青海省海西州都兰县哈日赛墓地发掘7世纪中叶至9世纪末吐蕃时期墓葬7座,出土470余件不同材质的器物。其中M7出土的服饰经整理修复后形制比较完整,包括褐色圆领短上衣、黄地条纹小口合裆裤和黑色长靿尖头靴等。分析服饰面料和制作工艺可知:圆领短上衣主体面料为平纹绢,领、袖缘边镶以织锦,用平面裁剪法裁制而成;小口合裆裤主体面料为黄地条纹提花山形斜纹绫,裆部面料为蓝色条纹染缬平纹绢,依身形裁剪而成;长靿尖头靴为牛皮质地,靴靿前片、后片和靴面分别裁制,共有6道缝线。对比不同时期同类型服装的形制可知,哈日赛M7出土短上衣融合了魏晋时期胡服上衣的短小和唐代袍服圆领、直襟的特点,长裤具有波斯条纹裤的形制风格,长靿靴则属于典型的胡服,这种多元素的搭配方式显示了青海地区吐蕃时期居民服饰穿着的随意性,体现了不同民族和地区服饰交融的特点。

一种基于m7G RNA修饰相关基因的乳腺癌预后预测模型的构建和验证

目的:建立并验证一种基于N7甲基鸟苷(m7G)RNA甲基化修饰相关基因的乳腺癌预后预测模型。方法:检测31种m7G RNA甲基化相关的关键调控因子在乳腺癌组织中的表达模式。下载癌症基因组图谱(TCGA)和基因表达综合数据库(GEO)中的乳腺癌患者的m RNA基因表达和临床预后数据。通过单变量Cox回归分析评估每个m7G相关基因对生存的预后价值。应用最小绝对收缩和选择算子(LASSO)回归方法,构建基于m7G甲基化调节基因的乳腺癌预后风险模型。通过基因集富集分析(GSEA)阐述BC高危人群的主要作用机制。基于m7G建立预后列线图,分别在TCGA和GEO队列中进行验证。结果:构建基于7个m7G甲基化调节基因的预后风险模型。高危组总生存率(OS)明显低于低危组(P<0.001)。GSEA分析表明,在高危人群中“细胞周期”是最重要的致癌通路。利用训练集TCGA队列的风险评分及临床特征,构建了预后列线图,校准曲线和决策曲线分析(DCA)表明其一致性和预测效能很好,并于GEO队列中进行了验证。结论:基于m7G相关基因的预后模型对乳腺癌的预后具有预测作用,可用于指导乳腺癌患者的个体化治疗。

直肠癌中m7G调控因子构建的修饰模式探索

目的构建基于N7-甲基鸟嘌呤(N7-methylguanosine,m7G)相关基因的直肠癌(rectal cancer,RC)预后预测模型。方法本研究从TCGA和GEO数据库中收集了292例直肠癌患者资料,综合分析了26个m7G调控因子的表达水平、突变情况及与患者预后的关系。笔者定义了两种m7G修饰模式并使用主成分分析(PCA)构建了m7G评分系统。结果与邻近正常组织比较,m7G调节因子在直肠癌中普遍存在差异表达,并且多数与患者预后相关。笔者进一步在RC样本中确定了两种不同的m7G修饰模式,发现不同m7G分型之间存在临床特征和总生存期差异,并且证明m7G评分系统可以判断患者的预后。结论m7G甲基化修饰异常与直肠癌的发生密切相关,对大量直肠癌样本中不同m7G模式的分析增进了对肿瘤调控网络的理解,m7G评分系统的构建可以为患者的预后评估和个性化治疗策略提供新的思路。

CT冠脉成像联合血清IMA、TRPM7在缺血性心肌病诊断中的应用价值

目的分析CT冠脉成像(CTA)联合血清缺血修饰白蛋白(IMA)、瞬时受体电位M7(TRPM7)在缺血性心肌病(ICM)诊断中的应用价值。方法收集2021年2月-2022年2月在我院治疗的ICM患者146例即为ICM组,根据纽约心脏病学会(NYHA)分级分为轻度组45例、中度组54例、重度组47例,入院后行CTA检查;同期选择本院正常体检健康者140例作为对照组。酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清IMA、TRPM7的表达水平;采用受试者工作特征曲线(ROC)评估血清IMA、TRPM7水平对ICM的诊断价值。采用四格表评估CTA联合血清IMA、TRPM7水平对ICM的诊断效能。结果与对照组相比,ICM组患者血清IMA、TRPM7水平较高(P<0.05)。重度组的IMA、TRPM7表达水平显著高于中度组和轻度组,中度组高于轻度组(P<0.05)。相关性分析结果显示,ICM组患者血清中IMA的表达水平与TRPM7呈正相关关系(P<0.05)。ROC曲线显示,血清IMA、TRPM7水平联合诊断的AUC高于IMA、TRPM7单独诊断的AUC值(P<0.05);四格表计算显示,CTA联合IMA、TRPM7诊断ICM的准确度为92.18%,其敏感度为98.38%,特异性为38.58%,其中三者联合诊断敏感度高于CTA、IMA、TRPM7单独诊断的敏感度(P<0.05)。结论ICM患者血清中IMA、TRPM7表达水平升高,CTA联合IMA、TRPM7可明显提高ICM诊断的价值。

m7G甲基转移酶METTL1在肿瘤中的作用

N7甲基鸟嘌呤核苷酸(N7-methylguanosine,m7G)是一种常见的RNA转录后修饰,在RNA加工、代谢和功能中起着重要作用。其主要由甲基转移酶1(methyltransferase 1,METTL1)和WD重复结构域4(WD repeat domain 4,WDR4)复合物调控。多项研究表明,METTL1/WDR4复合物促进或抑制许多肿瘤的进程,包括头颈部肿瘤、肺癌、肝癌、结肠癌、膀胱癌和食管鳞癌等,这依赖于tRNA或miRNA的m7G甲基化修饰。因此,METTL1和m7G修饰可以用作生物标志物或潜在的干预靶点,为肿瘤的早期诊断和治疗提供新的方向。本文将主要讨论METTL1通过m7G在肿瘤发生中的作用机制和相关的研究进展。

肝癌中m7G甲基化相关lncRNAs预后模型和动态列线图的开发

目的基于癌症基因组图谱(TCGA)数据库探究m7G甲基化相关的长非编码RNAs(lncRNAs)在肝癌中的预后价值并开发动态列线图。方法应用TCGA数据库来检索临床和转录组数据。采用单因素Cox回归分析和多因素Cox回归分析筛选预后相关的m7G甲基化相关lncRNAs,最后构建预后模型和动态列线图。结果通过单因素和多因素Cox回归分析,得到4个m7G甲基化相关的lncRNAs(AL031985.3、AL365203.2、AC009403.1和AC015908.3)。构建了预后模型并验证了该模型的有效性。在评估了免疫细胞浸润水平、免疫功能、免疫检查点后,发现高风险组和低风险组之间存在显著差异。最后开发了有效的在线版动态列线图。结论基于m7G甲基化相关的lncRNAs的肝癌预后模型和动态列线图可以更准确预测肝癌患者的预后,并为临床的诊治提供了更大的方便性。

METTL1介导的m7G RNA甲基化在肿瘤发生发展中的调控作用

RNA甲基化在许多基本的生物学过程中起着关键作用,包括基因表达的调控、信使RNA的稳定性和稳态。m7G甲基化通过修饰各种RNA分子,包括信使RNA(mRNA)、核糖体RNA(rRNA)、microRNA和转运RNA(tRNA)等,参与生理和病理功能。m7G是发生在tRNA可变环中最普遍的修饰之一,由人类METTL1-WDR4复合物调控。m7G修饰调控mRNA的转录、microRNA的生物合成、生物学功能、tRNA的稳定性、18SrRNA的加工和成熟。作为m7G的甲基转移酶,METTL1在各种肿瘤中发挥着重要作用,包括影响甲基化水平、肿瘤相关基因稳定性、癌细胞信号通路等多种调节机制。因此,阐明METTL1在肿瘤发生发展过程中的机理,对肿瘤的诊疗具有重要意义。本研究综述了METTL1介导的m7G RNA甲基化在急性髓细胞白血病(AML)、肝内胆管癌(ICC)、肝细胞癌(HCC)、结肠癌(CC)、肺癌、鼻咽癌、膀胱癌等各种肿瘤发生发展过程中调控作用的研究进展,探讨了METTL1与RNA稳定性的关系以及对多种肿瘤的调节机制,认为METTL1可能成为新的诊断标志物和治疗靶点。

2013年4月20日四川芦山M7.0级地震介绍

2013年4月20日四川芦山M7.0级地震发生在龙门山断裂带南段,震源机制解为逆冲型.震后3天震区已发生3000多次余震,其中M5级余震4次,最大余震是4月21日17时05分芦山、邛崃交界M5.4级地震,余震区长轴约45km,短轴约20km.芦山M7.0级地震与2008年5月12日汶川M8.0级地震均位于龙门山断裂带,但汶川地震发生在该断裂带中-北段,两个地震的余震区存在约45km的间隔,芦山M7.0级地震不是汶川地震的余震,但两者密切相关.

肉制品乳酸菌发酵剂小片球菌M7发酵条件的研究

高质量的发酵肉专用发酵剂是工业化生产发酵肉的关键。本研究从发酵肉中分离鉴定了可作为发酵剂的乳酸菌小片球菌M7,并对其发酵条件(包括5L罐放大试验)、冷冻干燥条件、浓缩培养、菌株安全性等方面进行了研究。结果表明:在最适培养温度30℃下,以1#简单培养基为最佳培养基,用2mol/L的NaOH作为中和剂控制发酵pH为7.0,发酵周期为16h,小片球菌M7活菌数即可达到3.5×109CFU/ml。冷干保护剂以蔗糖效果最好,冷干后活菌数能达到1.0×1011CFU/g。发酵剂菌株经动物毒性试验表明属无毒级微生物。

当归补血汤对尿毒症大鼠心肌纤维化组织瞬时受体电位M7通道表达及胶原蛋白合成的影响

目的观察当归补血汤(DBD)对尿毒症大鼠心肌组织瞬时受体电位M7通道(TRPM7)表达及胶原蛋白合成的影响,探讨DBD抗尿毒症心肌纤维化(UMF)作用机制。方法采用腺嘌呤核苷酸灌胃制作尿毒症模型,雄性SD大鼠32只,随机分为对照组、模型组、依那普利组及DBD组。依那普利和DBD组自造模第1天开始分别以依那普利10 mg/(kg·d)或DBD 6 g/(kg·d)灌胃;直至第21天,模型组和对照组以等体积的生理盐水灌胃。造模后第21天处死大鼠,留取血液标本检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)和心肌肌钙蛋白Ⅰ(c TnⅠ)。留取心肌标本,行苏木精-伊红染色(HE)和Masson染色,观察各组大鼠心肌组织病理改变。采用实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测心肌组织TRPM7 m RNA和转化生长因子-β1(TGF-β1)m RNA的表达。应用Western blot检测心肌组织TRPM7、Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)和Ⅲ型胶原蛋白(ColⅢ)的表达。结果与对照组比较,模型组大鼠心肌病理评分增加,心肌间质胶原蛋白相对面积增大,血清BUN、Scr和(c TnⅠ)水平提高,TRPM7 m RNA和TGF-β1m RNA的表达增强,心肌组织TRPM7、ColⅠ和ColⅢ的表达增强。与模型组比较,经依那普利和DBD治疗后,心肌组织病理评分和心肌间质胶原蛋白相对面积缩小,血清BUN、Scr和c TnⅠ水平下降,TRPM7 m RNA和TGF-β1m RNA的表达减弱,心肌组织TRPM7、ColⅠ和ColⅢ的表达减弱,差异有统计学意义(P<0.05)。与依那普利组比较,DBD组能明显降低TGF-β1m RNA的表达。结论 DBD可减轻尿毒症大鼠心肌纤维化程度,这一作用与抑制心肌组织TRPM7表达,从而抑制胶原蛋白合成有关。

厚壳贻贝M7lysin分子的克隆与表达

M7 lysin位于贻贝精子顶体中,是溶解卵黄膜、促进受精作用的重要蛋白质,决定了贻贝种间精卵识别的特异性。采用同源克隆法得到厚壳贻贝M7 lysin分子,并在原核生物中对该分子进行重组表达。结果表明,扩增产物为540 bp左右的片段,进一步测序发现其开放阅读框cDNA为543 bp,与贻贝、地中海贻贝、盖勒贻贝具有较高的相似性;在线翻译所得蛋白质片段中含有180个氨基酸,分子量为20 ku,等电点为8.48;通过M7 lysin氨基酸序列构建系统进化树发现,贻贝和地中海贻贝亲缘关系最近,其次为盖勒贻贝,最后是厚壳贻贝;将M7lysin分子在E.coli Rosseta(DE3)中融合表达,得到包括载体氨基酸序列在内的25 ku蛋白质,符合预期分子质量。

瞬时受体电位M7通道蛋白对大鼠肝星状细胞凋亡的影响

目的通过转染特异性siRNA,下调瞬时受体电位M7通道蛋白(TRPM7)在大鼠肝星状细胞系HSC-T6中的表达,研究其对HSC-T6凋亡的影响及内在机制。方法利用Li-pofectamineTM2000将特异性TRPM7-siRNA转染到HSC-T6内,分别运用流式细胞术检测HSCs凋亡变化;Western blot检测TRPM7、Caspase-3蛋白的表达;RT-PCR检测TRPM7,Caspase-3、Bid mRNA的表达。结果 TRPM7-siRNA明显抑制TRPM7 mRNA和蛋白的表达。与正常组或对照组相比,转染组细胞凋亡率、凋亡蛋白Caspase-3及凋亡基因Bid的表达均明显上调。结论特异性TRPM7-siRNA能明显抑制TRPM7表达,诱导HSCs凋亡,其机制可能与其诱导凋亡基因Bid表达上调有关。

反转录病毒介导靶向瞬时感受器电位M7基因siRNA抑制RBL-2H3细胞的活化

背景:钙离子在肥大细胞活化后的脱颗粒反应起重要作用。瞬时感受器电位M7(transient receptor potential melastatin7,TRPM7)是肥大细胞重要的候选通道。目的:构建携带大鼠靶向TRPM7-siRNA的反转录病毒载体并检测其对大鼠RBL-2H3细胞抗原活化的影响。方法:实验设计3个TRPM7-siRNA序列和1个无关对照序列,克隆到酶切的pSuper-retro-neo-GFP反转录病毒载体,用重组质粒pSuper-retro-neo-GFP-shTRPM7-(1,2,3)采用脂质体Lipofectamine 2000转染RBL-2H3细胞,采用Western blot检测干扰效率。筛选出最有效的pSuper-retro-neo-GFP-siTRMP7与包装质粒共转染293FT细胞生成反转录病毒并感染RBL-2H3细胞,荧光实时定量PCR及Western blot检测TRPM7-siRNA的沉默效果。检测β-氨基已糖苷酶活性探讨RBL-2H3细胞抗原活化程度的改变。结果与结论:转染后的各组细胞中siTRPM7-3转染组的沉默效率最高(P<0.05)。pSuper-retro-neo-GFP-siTRMP7-3干扰组的TRPM7基因的mRNA水平和蛋白水平显著下调,致敏后其β-氨基已糖苷酶活性明显降低(P<0.05)。结果提示,降低TRPM7基因的表达可抑制RBL-2H3细胞的抗原活化。

瞬时感受器电位M7通道对RBL-2H3细胞增殖及凋亡的影响

【目的】观察瞬时感受器电位M7通道(TRPM7)在大鼠肥大细胞系RBL-2H3的表达,探讨其对RBL-2H3增殖和凋亡的影响。【方法】Western blot及细胞免疫荧光分别检测TRPM7在RBL-2H3的表达。通过离子通道阻断剂2-APB抑制TRPM7通道的表达,以WST-1法检测细胞增殖,流式细胞术及Hoechst33342荧光染色检测细胞凋亡。【结果】Westernblot及细胞免疫荧光法均检测到TRPM7在RBL-2H3的表达,细胞免疫荧光提示TRPM7主要表达于RBL-2H3细胞膜。100μmol/L和200μmol/L的2-APB可明显抑制TRPM7的表达。100μmol/L和200μmol/L的2-APB对RBL-2H3的增殖抑制率分别为(30.4±4.2)%和(42.0±0.8)%,早期凋亡率分别为(36.9±6.7)%和(49.3±1.8)%,总凋亡率分别为(40.2±7.0)%和(76.8±5.5)%。【结论】TRPM7通道表达于RBL-2H3肥大细胞系并参与其增殖和凋亡。

TRPM7参与血管紧张素Ⅱ介导的心肌成纤维细胞胶原合成

目的研究瞬时受体电位通道亚族M7(TRPM7)在血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)介导的心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)胶原合成中的作用。方法将分离培养出的SD乳鼠CFs用1μmol/L的AngⅡ干预至不同时间点(0、6、12、24、48h),分别检测CFs上TRPM7蛋白的表达水平,从而找出1μmol/L的AngⅡ诱导CFs上TRPM7蛋白表达的最佳时间点。然后,用腺病毒-TRPM7-shRNA(Ad-TRPM7-shRNA)基因沉默的方法敲低CFs上TRPM7基因的表达,1μmol/L的AngⅡ干预至最佳时间点,检测CFs在TRPM7基因沉默前后胶原合成情况的变化。结果 CFs用1μmol/L的AngⅡ干预至24h后TRPM7蛋白表达量达最高水平;CFs在1μmol/L的AngⅡ干预至24h后,与心脏纤维化相关的胶原蛋白(胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ)合成增多,而在TRPM7基因沉默后这些胶原的合成量则呈明显下降的趋势。结论 TRPM7参与AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞胶原合成,从而促进心脏纤维化的发生。

基于ARM Cortex-M7内核的配电自动化终端设计

针对当前配电自动化终端设备成本高、自动化水平低、可管理性差等问题,设计一种基于ARM Cortex-M7内核的配电自动化终端设备。该终端设计包括硬件设计与软件设计,其中硬件设计以STM32F767芯片为主控芯片,主要对采集电路与通信电路进行设计;软件设计采用FreeRTOS操作系统多任务实时调度功能,实现信息传输与远程监控。实验结果表明,该设备成本低、自动化水平高,可管理性强、通信速度快,在配电自动化研究中具有较好的应用前景。

人牙髓干细胞增殖与瞬时受体电位M7通道的作用

背景:瞬时受体电位M7通道广泛存在于机体组织和细胞,对细胞存活、增殖和维持细胞镁离子平衡是必须的。目的:探讨瞬时受体电位M7通道对人牙髓干细胞增殖的作用。方法:酶消化法分离培养人牙髓干细胞,运用不同浓度(50,100μmol/L)瞬时受体电位M7通道抑制剂2-氨基乙基二苯硼酸酯作用于人牙髓干细胞72h后,Western-blot检测2-氨基乙基二苯硼酸酯对瞬时受体电位M7通道蛋白水平的影响,MTT法观察其对人牙髓干细胞增殖的影响;构建特异抑制瞬时受体电位M7通道表达慢病毒载体,运用慢病毒感染人牙髓干细胞。进行RT-PCR和Western-blot沉默效果分析,在1,3,5,7d进行MTT法检测特异沉默瞬时受体电位M7通道后对细胞增殖的影响。结果与结论:50,100μmol/L2-氨基乙基二苯硼酸酯均能抑制瞬时受体电位M7通道蛋白水平的表达并且能明显抑制人牙髓干细胞增殖(P<0.01),特异性沉默瞬时受体电位M7通道表达后,在不同时间段人牙髓干细胞增殖能力均明显降低(P<0.01)。提示瞬时受体电位M7通道对维持人牙髓干细胞增殖能力有重要作用。

MiR-9-5p调控瞬时受体电位M7对心肌缺血/再灌注大鼠的保护作用

目的探讨miR-9-5p调控瞬时受体电位M7(TRPM7)对心肌缺血/再灌注(MIR)大鼠的作用。方法将32只SD大鼠分为假手术组、模型组、miR-9-5p过表达组及空载体对照组,通过左冠状动脉结扎法建立MIR模型,假手术组不结扎,miR-9-5p过表达组和空载体对照组于模型建立前24 h分别尾静脉注入miR-9-5p agomir和agomir NC。通过HE染色观察各组大鼠心肌损伤情况;Real-time PCR检测各组大鼠心肌组织中miR-9-5p表达水平;酶联免疫吸附测定法检测各组大鼠血清中白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-1β、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)、乳酸脱氢酶(LDH)水平以及心肌组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量;TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况;双荧光素酶实验验证miR-9-5p与TRPM7的关系;免疫印迹法检测各组大鼠TRPM7、Bcl-2、Bax、磷酸化核因子κB 65(p-NF-κB p65)、toll样受体4(TLR4)蛋白表达。结果MiR-9-5p在大鼠心肌组织中低表达(P<0.05);miR-9-5p过表达能够降低CK-MB、cTnI、LDH表达水平,改善大鼠心肌损伤程度;与模型组相比,miR-9-5p过表达组心肌细胞凋亡率、Bax蛋白表达及MDA、IL-6、TNF-α及IL-1β含量均下降,而Bcl-2蛋白表达和SOD含量上升(P<0.05);双荧光素酶实验结果显示,TRPM7为miR-9-5p的靶基因,且miR-9-5p过表达组TRPM7、p-NF-κB p65、TLR4蛋白表达均较模型组降低(P<0.05)。结论MiR-9-5p通过调控TRPM7抑制心肌缺血再灌注导致的心肌细胞凋亡、氧化应激及炎症反应,并抑制TLR4/NF-κB通路。