海洋双RNA病毒(MABV)VP3基因的克隆与表达

海洋双RNA病毒(MABV)可引起多种海洋生物的腹水病等病症。从MABV基因组中克隆到VP3基因,将其连接到GST融合表达载体pGEX-4T-2上,在大肠杆菌中表达,并对其表达条件进行了优化。结果表明,在温度为30℃、IPTG浓度为0.8 mmol.L-1时,表达的融合蛋白相对最高,占细菌总蛋白的20.7%。试验结果为该病毒结构蛋白和MABV病毒疫苗研究提供了基础。

海洋双RNA病毒(MABV)VP5基因的克隆与表达

从海洋双RNA病毒(MABV)基因组中克隆到VP5基因,将其连接到6×His融合表达载体pET-28a(+)上,在大肠杆菌中表达,并对其表达条件进行了优化。研究结果表明,在温度为28℃、IPTG浓度为0.1 mmol.L-1时,表达的融合蛋白相对最高,占细菌总蛋白的7.3%。

海洋双RNA病毒VP2e基因的克隆和表达

从海洋双RNA病毒(MABV)Y-6毒株基因组中克隆到VP2 e基因,将其连接到GST融合表达载体pGEX-6P-1,在大肠杆菌中表达,并对其表达条件进行了优化。通过温度和诱导物浓度优化试验,经SDS-PAGE和Western-Blot检测表明,在温度为37℃、IPTG浓度为0.1mmol/L时,表达的融合蛋白含量最高,占细菌总蛋白的28.6%。

Efficient detection of pathogen virus in sand dabs,Paralichthys olivaceus using loop-mediated isothermal amplification(LAMP)

Viral hemorrhagic septicemia virus（VHSV） and marine birnavirus（MABV） are the causative pathogens for some of the most explosive epidemics of emerging viral diseases in many Asian countries, leading to huge economic losses in aquaculture. Rapid molecular detection for surveillance or diagnosis has been a critical component in reducing the prevalence of pathogen infection. The loop-mediated isothermal amplification（LAMP） of DNA is currently one of the most commonly used molecular diagnostic tools, as it is simple, quick, and easy to amplify target DNA under isothermal conditions. In the present study, a novel and highly specific LAMP assay for the sensitive and rapid detection of VHSV and MABV infection in fish was developed. Using a set of synthesized primers matching a specific region of the genome, the efficiency and specificity of the LAMP assay were optimized in terms of the reaction temperature and DNA polymerase concentration, as they are the main determinants of the sensitivity and specificity of the LAMP assay. In particular, we demonstrated that our assay could be applied to efficient detection of VHSV and MABV infection in the wild fish, Paralichthys olivaceus. Our results demonstrate the simplicity and convenience of this method for the detection of viral infection in aquatic organisms.

Viral Diseases of Olive Flounder in Korean Hatcheries

以便阐明，并且阻止病毒的疾病发生在橄榄疾病的状态，特别病毒的疾病挣扎育种站，包括流行病学的学习，研究的一个范围从 1997 ～ 2003 被执行。调查的育种站的地点在东方包括几个代表性的地点( Kangnung ， Uljin ， Pohang ， Yangsan ，Ul圣，釜山)，南方( Wando ， Changheung ， Goheung ， Yeosu ， Namhae ， Tongyeong ， Geoje ， Jeju )并且西方( Seosan ， Kunsan ， Gochang ， Yeongkwang ， Mokpo ， Chindo )朝鲜半岛的肋骨的区域。A 总数 of2000 案例在 7 年，死亡由病毒的代理人报道 for22% ，或 446 个案例在引起了里被检验了。更加与病毒的感染联系的死亡在 2003 从 14% in1997 增加了到 27% 。许多病毒的疾病被观察，并且病毒的表皮的增生，病毒的腹水和病毒的畸形，病毒的紧张的坏死，和 hiramerhabdoviral 疾病的出现分别地是 14% ， 51% ， 25% ，和 8% 。由调查病毒的感染 ofbroodstock 挣扎，在育种站的海洋的 birnavirus (MABV ) 的感染率被识别因此，是约 30% 获得并且使窝雪鱼干非感染是高度必要的。