针刺调控miR-128-3p对卒中大鼠神经功能及Nrf2表达影响

目的观察针刺对卒中大鼠的神经功能改善作用,并初步探讨其机制。方法建立脑缺血再灌注大鼠模型,72只SD大鼠随机分为模型组、激动剂组、激动剂阴性对照组、针刺组、针刺+激动剂组,每组12只,另取12只SD大鼠设为假手术组,针刺组、针刺+激动剂组大鼠于双侧阳陵泉穴及曲池穴行针,激动剂组、激动剂阴性对照组、针刺+激动剂组大鼠分别以5 mL/kg剂量尾静脉注射miR-128-3p agomir、miR-128-3p agomir阴性对照,假手术组、模型组和针刺组尾静脉注射等剂量生理盐水,持续7 d。对各组大鼠进行神经功能缺损评分,以苏木素-伊红(HE)染色检测各组大鼠皮质组织病理变化,以酶联免疫吸附法检测血清中枢神经特异性蛋白(S100β)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,以实时荧光定量PCR检测各组大鼠脑皮质组织miR-128-3p、红系衍生的核转录相关因子(Nrf2)mRNA水平,以Western blot法检测脑皮质组织中Nrf2蛋白表达情况。结果与假手术组相比,模型组大鼠脑皮质神经元呈现细胞核收缩变小、细胞坏死、数量减少等病理损伤;神经功能缺损评分,血清中β、NSE、IL-6及TNF-α水平,脑皮质组织miR-128-3p水平均明显升高(P<0.05);脑皮质组织Nrf2 mRNA及蛋白水平明显降低(P<0.05)。与模型组相比,针刺组大鼠脑皮质神经元病理损伤减轻;神经功能缺损评分,血清中S100β、NSE、IL-6及TNF-α水平,脑皮质组织miR-128-3p水平降低(P<0.05);脑皮质组织Nrf2 mRNA及蛋白水平升高(P<0.05)。激动剂组大鼠脑皮质神经元病理损伤加重;神经功能缺损评分,血清中S100β、NSE、IL-6及TNF-α水平,脑皮质组织miR-128-3p水平升高(P<0.05);脑皮质组织Nrf2 mRNA及蛋白水平降低(P<0.05)。激动剂阴性对照组大鼠无明显变化(P>0.05)。与针刺组比较,针刺+激动剂组大鼠脑皮质神经元病理损伤加重;神经功能缺损评分,血清中S100β、NSE、IL-6及TNF-α水平,脑皮质组织miR-128-3p水平升高(P<0.05);脑皮质组织Nrf2 mRNA及蛋白水平降低(P<0.05)。与激动剂组比较,针刺+激动剂组大鼠脑皮质神经元病理损伤减轻;神经功能缺损评分,血清中S100β、NSE、IL-6及TNF-α水平,脑皮质组织miR-128-3p水平降低(P<0.05);脑皮质组织Nrf2 mRNA及蛋白水平升高(P<0.05)。结论针刺可能通过下调miR-128-3p表达,促进Nrf2表达,减轻卒中大鼠炎症损伤,改善其神经功能。