子午流注纳甲法对局灶性脑缺血模型大鼠脑区NSE、NGF、bFGF的影响

目的:通过制作大鼠大脑中动脉永久性闭塞模型,观察不同时段NSE、NGF、b FGF的表达变化,探究子午流注针法对脑缺血后神经干细胞内源性激活作用及其机制,从而为临床治疗提供科学依据。方法:选用体质量200~250 g的144只Wistar大鼠,按随机数字表法分为正常组、假手术组、手术组、辨证取穴组(简称辨证组)和纳甲法组(简称纳甲组)5大组各45只动物,再将5大组动物根据针刺治疗时间的长短,在各组内再随机分为术后6 h、3、7、14、21 d 5个小组,其中每小组各8只动物。参照Longa法建立大脑中动脉栓塞模型局灶性缺血模型(MCAO)。治疗于实验第2天开始针灸治疗,每日同一时间治疗。常规辨证组参照《实验针灸学》选穴,选取水沟、合谷和三阴交用平补平泻法,每天1次,每次留针30 min。纳甲组根据郑魁山《子午流注与灵龟八法》所记载的徐氏子午流注纳甲法,依日按时开穴针刺治疗,手法与留针时间同辨证组。处死动物观察神经元形态学病理变化,用酶联免疫法(ELISA)检测大脑匀浆中神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经生长因子(NGF)、碱性成纤维生长因子(b FGF)浓度。结果:与正常组比较MCAO组大鼠的神经元结构受损,与正常组比较MCAO大鼠大脑的NSE、NGF、b FGF均呈现先升高再降低的动态表达变化,各治疗组均可抑制NSE的升高,增加NGF、b FGF的含量,其作用效应也呈现出同样的先升高再降低动态表达变化规律,其中子午流注纳甲法组、综合组作用在早期优于常规组。结论:针刺能促进MCAO大鼠海马CA1区神经元结构修复,促进MCAO大鼠缺血侧大脑匀浆NGF、b FGF的表达,抑制NSE的表达,纳甲组、联合组效果优于常规针刺。针刺在缺血早期促进脑缺血后神经干细胞的激活、增殖、分化作用更明显,提示针刺早期干预的作用更加明显。

益气通络胶囊对MCAO模型大鼠再灌注后脑组织Ca^(2+)含量影响的研究

1 实验材料 1.1 实验动物普通级sD大鼠60只，雄性，体重（300±20）g，由郑州大学医学院动物实验中心提供，合格证号：医动字第0001645号。

针刺调控miR-128-3p对卒中大鼠神经功能及Nrf2表达影响

目的观察针刺对卒中大鼠的神经功能改善作用,并初步探讨其机制。方法建立脑缺血再灌注大鼠模型,72只SD大鼠随机分为模型组、激动剂组、激动剂阴性对照组、针刺组、针刺+激动剂组,每组12只,另取12只SD大鼠设为假手术组,针刺组、针刺+激动剂组大鼠于双侧阳陵泉穴及曲池穴行针,激动剂组、激动剂阴性对照组、针刺+激动剂组大鼠分别以5 mL/kg剂量尾静脉注射miR-128-3p agomir、miR-128-3p agomir阴性对照,假手术组、模型组和针刺组尾静脉注射等剂量生理盐水,持续7 d。对各组大鼠进行神经功能缺损评分,以苏木素-伊红(HE)染色检测各组大鼠皮质组织病理变化,以酶联免疫吸附法检测血清中枢神经特异性蛋白(S100β)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,以实时荧光定量PCR检测各组大鼠脑皮质组织miR-128-3p、红系衍生的核转录相关因子(Nrf2)mRNA水平,以Western blot法检测脑皮质组织中Nrf2蛋白表达情况。结果与假手术组相比,模型组大鼠脑皮质神经元呈现细胞核收缩变小、细胞坏死、数量减少等病理损伤;神经功能缺损评分,血清中β、NSE、IL-6及TNF-α水平,脑皮质组织miR-128-3p水平均明显升高(P<0.05);脑皮质组织Nrf2 mRNA及蛋白水平明显降低(P<0.05)。与模型组相比,针刺组大鼠脑皮质神经元病理损伤减轻;神经功能缺损评分,血清中S100β、NSE、IL-6及TNF-α水平,脑皮质组织miR-128-3p水平降低(P<0.05);脑皮质组织Nrf2 mRNA及蛋白水平升高(P<0.05)。激动剂组大鼠脑皮质神经元病理损伤加重;神经功能缺损评分,血清中S100β、NSE、IL-6及TNF-α水平,脑皮质组织miR-128-3p水平升高(P<0.05);脑皮质组织Nrf2 mRNA及蛋白水平降低(P<0.05)。激动剂阴性对照组大鼠无明显变化(P>0.05)。与针刺组比较,针刺+激动剂组大鼠脑皮质神经元病理损伤加重;神经功能缺损评分,血清中S100β、NSE、IL-6及TNF-α水平,脑皮质组织miR-128-3p水平升高(P<0.05);脑皮质组织Nrf2 mRNA及蛋白水平降低(P<0.05)。与激动剂组比较,针刺+激动剂组大鼠脑皮质神经元病理损伤减轻;神经功能缺损评分,血清中S100β、NSE、IL-6及TNF-α水平,脑皮质组织miR-128-3p水平降低(P<0.05);脑皮质组织Nrf2 mRNA及蛋白水平升高(P<0.05)。结论针刺可能通过下调miR-128-3p表达,促进Nrf2表达,减轻卒中大鼠炎症损伤,改善其神经功能。