lncRNA MAFG⁃AS1在癌症中的研究进展

近年来随着医疗技术的发展,癌症的检出率越来越高,患病群体年轻化。许多研究开始着手于癌症的早期诊断、预后监测标志物、发生机制及耐药性相关方面的研究。近几年,随着生信技术的发展,lncRNA逐渐引起研究者们的注意,越来越多的研究表明,长链非编码RNA(lncRNA)在癌症进展过程中负责多种生物学功能。尤其lncRNA MAFG‐AS1已被证实与多种癌症相关,具有致癌基因的功能,并与不良的临床特征和预后显著相关。本文就lncRNA MAFG‐AS1在癌症中研究进展作一综述,希望能为日后临床上癌症的诊断及治疗提供一定的帮助。

LncRNA MAFG-AS1:恶性肿瘤的潜在生物标志物和治疗靶点

长链非编码RNA(long non-coding RNAs,LncRNAs)在肿瘤发展中的调控作用已引起广泛关注。LncRNA MAFG-AS1是一种新型的致癌长链非编码RNA,在肺癌、乳腺癌和肝细胞癌等多种肿瘤组织中高表达,与肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭等恶性行为密切相关。此外,大量证据表明,LncRNA MAFG-AS1的上调与肿瘤患者的临床病理分期和不良生存预后有关。本文系统总结了近年来LncRNA MAFG-AS1在各种肿瘤中的表达、生物学功能、分子机制和临床意义的研究,并强调了LncRNA MAFG-AS1可作为新型诊断、预后生物标志物,以及癌症治疗的重要靶标。

lncRNA MAFG-AS1靶向miR-3180-3p调控口腔鳞癌HSC4细胞增殖和凋亡

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)MAFG反义RNA1(MAFG-AS1)靶向miR-3180-3p对口腔鳞癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:实时定量PCR检测口腔鳞癌组织和对应正常黏膜中MAFG-AS1和miR-3180-3p表达。以口腔鳞癌细胞HSC4为研究对象,分别构建干扰MAFG-AS1、过表达miR-3180-3p或抑制miR-3180-3p表达的口腔鳞癌细胞株,CCK-8、平板克隆实验、流式细胞术、蛋白印迹法检测细胞活力、克隆形成数、凋亡率及cleaved-caspase 3、cleaved-caspase 9表达。荧光素酶报告实验验证MAFG-AS1和miR-3180-3p的靶向关系。结果:与正常黏膜比较,口腔鳞癌组织MAFG-AS1表达显著升高(P<0.05),miR-3180-3p表达显著降低(P<0.05)。干扰MAFG-AS1或过表达miR-3180-3p均可降低HSC4细胞活力和克隆形成数(P<0.05),促进细胞凋亡(P<0.05),上调cleaved-caspase 3和cleaved-caspase 9蛋白表达(P<0.05)。miR-3180-3p是MAFG-AS1的直接靶点,MAFG-AS1负调控miR-3180-3p表达。抑制miR-3180-3p可增加HSC4细胞活力和克隆形成数(P<0.05),抑制细胞凋亡(P<0.05),下调cleaved-caspase 3和cleaved-caspase 9蛋白表达(P<0.05),进而削弱干扰MAFG-AS1对HSC4细胞的增殖抑制和凋亡促进作用(P<0.05)。结论:干扰MAFG-AS1通过上调miR-3180-3p表达抑制口腔鳞癌HSC4细胞增殖,促进细胞凋亡。

LncRNA-MAFG-AS1在结直肠癌中的表达及临床意义

目的探讨LncRNA-MAFG-AS1在结直肠癌中的表达及临床意义。方法选取我院行手术切除的结直肠癌组织及对应的癌旁正常组织各80例,应用定量即时聚合酶链锁反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测结直肠癌组织及癌旁正常组织中LncRNA-MAFG-AS1的表达水平,并分析其与结直肠癌临床病理特征之间的关系,所有患者随访截止日期到2019年12月31日,应用Kaplan-Meier(K-M)法进行生存分析,采用Cox回归模型分析结直肠癌预后的危险因素。结果结直肠癌组织中LncRNA-MAFG-AS1相对表达量为2.398±0.214,高于癌旁正常组织的1.032±0.132,差异有统计学意义(P<0.05)。当患者TNM分期更高、中高分化及存在淋巴结转移和远期转移时,LncRNA-MAFG-AS1过表达(P<0.05)。K-M生存分析显示高表达患者无进展生存时间(progression-free survival,PFS)为(20.36±3.21)个月,低表达患者为(29.71±4.23)个月;高表达患者的总生存时间(overall survival,OS)为(38.69±6.24)个月,低高表达患者为(54.26±5.14)个月;两组患者的PFS和OS差异有统计学意义(P<0.05)。Cox多因素回归分析显示,TNM分期更高、中高分化及存在淋巴结转移、远期转移以及LncRNA-MAFG-AS1高表达是影响结直肠癌预后的独立危险因素。结论LncRNA-MAFG-AS1在结直肠癌组织中呈高表达,且与结直肠癌患者分化程度、TNM分期、淋巴结和远期转移有关,是影响结直肠癌患者预后的独立风险因素。

LncRNA MAFG-AS1、miR-21对宫颈癌细胞增殖与凋亡的作用研究

目的:分析lncRNA MAFG-AS1、miR-21在宫颈癌细胞增殖与凋亡中的作用。方法:检测正常宫颈组织、宫颈癌组织与宫颈癌Hela细胞株中miR-21与lncRNA MAFG-AS1表达水平。si-MAFG-AS1、AS-miR-21转染宫颈癌Hela细胞,检测细胞活力、细胞凋亡、凋亡相关蛋白和增殖相关蛋白的表达;双荧光素酶法检验miR-21与MAFG-ASI的靶向作用关系。结果:宫颈癌组织和Hela细胞中lncRNA MAFG-AS1与miR-21表达高于正常宫颈组织和正常宫颈上皮细胞(均P<0.01)。与si-NC组相比,si-MAFG-AS1组Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达降低,而p21、p27、Cleaved Caspase-3、Bax蛋白表达升高(均P<0.01)。与CTRL oligo组相比,AS-miR-21组Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达减少,p21、p27、Cleaved Caspase-3、Bax蛋白表达增加(均P<0.01)。双荧光素酶检测显示,lncRNA MAFG-AS1可靶向调控miR-21。结论:LncRNA MAFG-AS1可通过靶向调控miR-21调节宫颈癌细胞的增殖与凋亡。

LncRNA MAFG-AS1调节miR-331-3p/SERPINE1轴对胃癌细胞恶性生物学行为的影响

目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)重组人V-maf肌腱膜纤维肉瘤癌基因G反义RNA1(MAFG-AS1)调节miR-331-3p/SERPINE1轴对胃癌细胞恶性生物学行为的影响。方法:qRT-PCR检测人胃癌组织(n=30)、癌旁组织(n=30)、胃黏膜正常上皮细胞GES-1、人胃癌细胞BGC-823、SGC-7901、MGC-803中MAFG-AS1、miR-331-3p、SERPINE1表达;将BGC-823细胞随机分为ctrl组、pcDNA3.1组、pcLncRNA MAFG-AS1组、pcLncRNA MAFG-AS1+miR-NC组、pcLncRNA MAFG-AS1+miR-331-3p组;qRT-PCR检测各组BGC-823细胞MAFG-AS1、miR-331-3p、SERPINE1水平;CCK-8法检测各组BGC-823细胞活力;EDU法检测各组BGC-823细胞增殖;Transwell检测各组BGC-823细胞迁移和侵袭;western blot检测各组BGC-823细胞SERPINE1、PCNA、MMP-2表达;双荧光素酶报告基因实验分别验证MAFG-AS1和miR-331-3p、miR-331-3p和SERPINE1的关系。结果:与癌旁组织相比,胃癌组织中MAFG-AS1、SERPINE1 mRNA表达显著性升高(3.01±0.37 vs 1.02±0.12,2.49±0.26 vs 1.01±0.10,t=28.022、29.000,P<0.05),miR-331-3p表达显著性降低(0.32±0.03 vs 1.03±0.07,t=51.063,P<0.05)。与GES-1细胞比较,不同胃癌细胞中MAFG-AS1、SERPINE1 mRNA表达显著性升高,miR-331-3p表达显著性降低(P<0.05),且BGC-823细胞变化结果更显著,后续实验选择BGC-823细胞。与ctrl组、pcDNA3.1组比较,pcLncRNA MAFG-AS1组BGC-823细胞MAFG-AS1、SERPINE1 mRNA水平、细胞活力A值、EDU阳性细胞率、迁移与侵袭细胞数、SERPINE1、PCNA、MMP-2蛋白水平均显著性升高,miR-331-3p mRNA水平显著性降低(P<0.05);与pcLncRNA MAFG-AS1组、pcLncRNA MAFG-AS1+miR-NC组比较,pcLncRNA MAFG-AS1+miR-331-3p组BGC-823细胞SERPINE1 mRNA水平、细胞活力A值、EDU阳性细胞率、迁移与侵袭细胞数、SERPINE1、PCNA、MMP-2蛋白水平均显著性降低,miR-331-3p mRNA水平显著性升高(P<0.05);MAFG-AS1靶向负调控miR-331-3p表达,miR-331-3p靶向负调控SERPINE1表达。结论:过表达LncRNA MAFG-AS1可能通过靶向下调miR-331-3p来上调SERPINE1表达,进而促进BGC-823细胞增殖、迁移和侵袭。

lnc RNA MAFG-AS1调控miR-532-3p表达对肺癌A549细胞糖酵解的影响

目的:探讨lncRNA MAFG反义RNA1(MAFG-AS1)调控miR-532-3p表达对肺癌A549细胞糖酵解的影响。方法:用qPCR法检测人肺癌A549细胞和正常肺上皮细胞BEAS-2B中MAFG-AS1和miR-532-3p的表达水平。利用脂质体介导转染技术,分别构建MAFG-AS1表达下调和miR-532-3p过表达的A549细胞,用分光光度法检测细胞培养上清中葡萄糖消耗量与乳酸含量,qPCR和WB法分别检测细胞中M2型丙酮酸激酶(pyruvate kinase M2,PKM2)、己糖激酶2(hexokinase 2,HK2)mRNA和蛋白的表达水平。用双荧光素酶报告基因实验验证MAFG-AS1与miR-532-3p的靶向关系,观察MAFG-AS1和miR-532-3p同时低表达对A549细胞葡萄糖及乳酸含量和PKM2、HK2表达的影响。结果:与BEAS-2B细胞比较,A549细胞中MAFG-AS1表达上调而miR-532-3p表达下调(均P<0.01)。下调MAFG-AS1或miR-532-3p过表达均可降低A549细胞葡萄糖消耗量及乳酸含量,并抑制PKM2、HK2 mRNA和蛋白的表达(均P<0.01)。miR-532-3p可与MAFG-AS1靶向结合抑制野生型MAFG-AS1细胞的荧光素酶活性(P<0.01),下调MAFG-AS1可使A549细胞中miR-532-3p表达升高(P<0.01)。miR-532-3p低表达可逆转MAFG-AS1表达下调对细胞葡萄糖消耗量及乳酸含量和PKM2、HK2表达的影响(均P<0.01)。结论:下调MAFG-AS可通过促进miR-532-3p表达而抑制肺癌A549细胞糖酵解。

IncRNA MAFG-AS1及miR-143-3p对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响及机制研究

目的探讨lncRNA MAFG-AS1和miR-143-3p对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响及其潜在的作用机制。方法MAFG-AS1和miR-143-3p表达载体转染至宫颈癌细胞Hela后,采用qRT-PCR检测宫颈癌组织及相应癌旁正常组织,宫颈癌细胞Hela和正常宫颈细胞株Ect1/E6E7中miR-143-3p和MAFG-AS1 mRNA的表达水平;Western blot检测增殖相关蛋白Bcl-2、Cyclin D1及凋亡相关蛋白Bax、Cleaved-Caspase-3、p21、p27的表达;MTT法检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测lncRNA MAFG-AS1与miR-143-3p的相互作用。结果与癌旁正常组织相比,宫颈癌组织中MAFG-AS1 mRNA表达升高(0.905±0.115 vs 2.835±0.164,t=43.091,P<0.001),miR-143-3p表达降低(0.944±0.075 vs 0.382±0.071,t=24.336,P<0.001);相较于正常宫颈细胞株Ect1/E6E7,宫颈癌细胞Hela中MAFG-AS1 mRNA的表达显著升高(P<0.001),miR-143-3p表达显著降低(P<0.001)。下调MAFG-AS1和过表达miR-143-3p均可抑制Hela细胞增殖活性,促进细胞凋亡;抑制Bcl-2和Cyclin D1蛋白表达,促进Bax、Cleaved、Caspase-3、p21、p27蛋白表达。MAFG-AS1可靶向调控miR-143-3p表达,且抑制miR-143-3p表达可逆转下调MAFG-AS1表达对Hela细胞抑制细胞增殖、促进细胞凋亡作用。结论 lncRNA MAFG-AS1可抑制宫颈癌细胞增殖,促进凋亡,其机制可能与靶向调控miR-143-3p有关。

lncRNA MAFG-AS1通过调控miR-11181-3p/GLG1轴促进胃癌AGS细胞迁移、侵袭和有氧糖酵解

目的:探讨lncRNA MAFG-AS1/miR-11181-3p/GLG1分子轴对胃癌(gastric cancer,GC)细胞迁移、侵袭和有氧糖酵解的影响及其可能的机制。方法:选取MAFG-AS1相对高表达的GC细胞系AGS作为研究对象,采用qPCR法检测其MAFGAS1、miR-11181-3p、GLG1的RNA表达水平,Transwell实验、糖酵解分析等检测细胞迁移、侵袭和有氧糖酵解的变化,利用生物信息学分析及双荧光素酶报告基因验证MAFG-AS1、miR-11181-3p、GLG1之间的相互作用关系。结果:敲减MAFG-AS1显著上调miR-11181-3p及下调GLG1的表达(均P<0.01),并可显著抑制GC细胞迁移、侵袭和有氧糖酵解(均P<0.01);荧光素酶报告基因证实MAFG-AS1竞争性吸附miR-11181-3p(P<0.01);抑制miR-11181-3p或过表达GLG1可部分逆转敲减MAFG-AS1对GC细胞迁移、侵袭和有氧糖酵解的抑制作用(均P<0.05或P<0.01)。结论:MAFG-AS1通过miR-11181-3p/GLG1分子轴增强GC迁移、侵袭和有氧糖酵解,可能是GC诊疗的潜在分子靶点。

MAFG-AS1调控miR-24-3p对急性淋巴细胞白血病细胞Molt4增殖及凋亡的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)MAFG-AS1通过调控miR-24-3p对急性淋巴细胞白血病细胞Molt4的增殖和凋亡的影响。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析MAFG-AS1和miR-24-3p在白血病血清、细胞中的表达。将Molt4细胞分为si-NC组、si-MAFG-AS1组、miR-NC组、miR-24-3p mimic组、si-MAFG-AS1+anti-miR-NC组、si-MAFG-AS1+miR-24-3p inhibitor组,分别转染si-NC、si-MAFG-AS1、miR-NC、miR-24-3p mimic、si-MAFG-AS1+anti-miR-NC和si-MAFG-AS1+miR-24-3p inhibitor。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)、流式细胞术、蛋白质印迹实验(Western blot)分别测定细胞增殖、凋亡、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)蛋白表达。双荧光素酶报告实验进行MAFG-AS1和miR-24-3p靶向关系的验证。结果在白血病患者血清、细胞中MAFG-AS1表达升高,miR-24-3p表达降低(P<0.01)。与si-NC组相比,si-MAFG-AS1组Molt4细胞24 h、48 h和72 h的细胞抑制率、凋亡率、Bax蛋白表达量增加,Bcl-2蛋白表达量降低(P<0.01)。MAFG-AS1可以靶向miR-24-3p。与miR-NC组相比,miR-24-3p mimic组Molt4细胞24 h、48 h和72 h的细胞抑制率、凋亡率、Bax蛋白表达量增加,而Bcl-2蛋白表达量降低(P<0.01)。si-MAFG-AS1+miR-24-3p inhibitor组Molt4细胞24 h、48 h和72 h的细胞抑制率、凋亡率、Bax蛋白表达量均低于si-MAFG-AS1+anti-miR-NC组,Bcl-2蛋白表达量高于si-MAFG-AS1+anti-miRNC组(P<0.01)。结论MAFG-AS1在白血病患者中高表达,干扰其表达可通过靶向miR-24-3p抑制急性淋巴细胞白血病细胞Molt4的增殖和促进凋亡。