MAGEA3基因表达对亚洲胃癌患者免疫微环境的影响

目的:通过对亚洲肿瘤研究组(ACRG)中的胃癌数据集进行生物信息学分析并收集临床胃癌患者血清进行验证,揭示MAGEA3基因对亚洲胃癌患者免疫微环境的影响。方法:从GEO下载GSE52254/ACRG数据集,根据MAGEA3基因表达值的中位数,将300例胃癌患者分为MAGEA3高表达组和低表达组。然后应用ESTIMATE和CIBERSORT计算方法计算两组胃癌组织免疫和基质成分的数量以及22种浸润淋巴细胞的比例,通过比较两组间免疫微环境及免疫细胞浸润的差异,利用GSEA进一步分析相关通路的变化以确定MAGEA3对胃癌免疫微环境的影响。收集2022年1月至2022年4月在温州医科大学附属第一医院胃肠外科住院的86例胃癌患者血清,通过ELISA法检测血清中MAGEA3表达量,并使用流式细胞技术检测血清中不同淋巴细胞亚群的数量,分析MAGEA3蛋白与外周血淋巴细胞亚群的相关性。结果:ESTIMATE结果显示MAGEA3高表达组的免疫评分、基质评分均显著低于MAGEA3低表达组(P<0.001),并通过Spearman分析发现MAGEA3表达与免疫评分(r=-0.244,P<0.001)、基质评分(r=-0.266,P<0.001)呈负相关。GSEA分析进一步提示MAGEA3低表达组存在T细胞活化、增殖、巨噬细胞活化以及免疫细胞调节的相关通路富集。CIBERSORT结果提示在MAGEA3低表达组中,幼稚B细胞、浆细胞、CD8^(+)T细胞、γδT细胞、激活的NK细胞浸润更多,而巨噬细胞M0浸润更少。通过临床胃癌血清样本MAGEA3蛋白ELISA检测以及流式细胞检测血清中各淋巴细胞亚群发现,MAGEA3表达与CD8^(+)T细胞数量呈显著负相关(r=-0.310,P=0.004),结果与ACRG数据分析一致。结论:MAGEA3的表达水平可能通过影响胃癌免疫微环境的免疫细胞发挥作用,同时也提示了MAGEA3可能是胃癌免疫治疗的潜在靶点和生物标志物。

MAGEA1和MAGEA3基因在胃癌中的表达及应用

目的:对近年来胃癌组织中黑色素瘤抗原基因A1(MAGEA1)和黑色素瘤抗原基因A3(MAGEA3)表达及应用的研究进行综述。方法:参阅新近公开发表的中外文献进行阐述MAGEA1和MAGEA3在胃癌组织中的表达及应用。结果:MAGEA1和MAGEA3基因仅在胃癌组织中表达,在癌旁正常组织中不表达。结论:①MAGEA1和MAGEA3在胃癌组织中有较高的表达。②作为特异性肿瘤标记物有助于肿瘤的早期诊断和微小转移灶的检测。③作为靶抗原用于肿瘤的免疫治疗。

睾丸肿瘤抗原MAGEA1及MAGEA3在小鼠头颈部鳞癌及癌旁组织中的表达

目的:探讨MAGEA1及MAGEA3蛋白在头颈部鳞癌的发生过程中的表达以及在头颈部鳞癌及癌旁组织中的表达情况,了解其与头颈部鳞癌发生的相关性,并为鳞癌手术安全切缘的范围提供理论依据。方法:利用诱癌剂4-硝基喹啉-1-氧化物饮水法建立头颈部鳞癌小鼠模型,用免疫组化法检测MAGEA1、MAGEA3蛋白的在各组中的表达,包括头颈部鳞癌形成过程中的不同阶段、41例头颈部鳞癌中心区、癌旁<5mm区、>5mm区及正常黏膜组织。结果:与正常黏膜组织相比,头颈部鳞癌MAGEA1及MAGEA3的表达差异有统计学意义(P<0.001),并且其不同阶段的上皮异常增生程度与MAGEA1及MAGEA3的表达程度分别呈正相关(rs=0.55,P<0.001;rs=0.49,P<0.001)。癌中心区、癌旁<5mm区、>5mm区比较,MAGEA1、MAGEA3、MAGEA1和MAGEA3、MAGEA1或MAGEA3表达阳性率逐渐减小,并有显著性差异(P<0.001),>5mm区基本正常。结论:MAGEA1及MAGEA3蛋白在头颈部鳞癌中有较高的表达率,并与头颈部鳞癌的发生、发展中有一定的相关性,可以作为判断头颈部鳞癌发展生物学特性的参考指标。鳞癌手术切除范围以距肿瘤边缘5mm以上作为安全切缘的标准较为适宜。

喉鳞癌组织MAGEA1和MAGEA3蛋白表达及其生物学意义的研究

目的:检测黑色素瘤抗原基因MAGEA1和MAGEA3在喉鳞癌组织中的表达,探讨其作为喉癌免疫治疗靶标的可行性及其与喉癌生物学行为的关系。方法:采用免疫组化PV9000两步法检测69例喉鳞癌原发灶及其常规病理报告为阳性的121枚颈淋巴结中MAGEA1和MAGEA3的表达,同时采用蛋白质印迹法检测其在喉癌标本的癌中心区(TC),癌周0.5和1.0 cm及9例喉正常黏膜组织中的表达,并结合临床病理资料进行分析。结果:69例喉鳞癌组织中,MAGEA1蛋白的阳性表达率为58.0%(40/69),MAGEA3蛋白的阳性表达率为29.0%(20/69)。两种蛋白在癌中心区,癌周0.5和1.0 cm区中的表达逐渐下降(P<0.05),9例喉正常黏膜组织中无表达。MAGEA1和MAGEA3表达与肿瘤的T分期无关(P>0.05),MAGEA1蛋白的表达与病理分级相关(P<0.05),伴淋巴结转移的患者MAGEA3的表达率高于未转移者(P<0.05),颈转移淋巴结中两种蛋白的表达均下调。结论:MAGEA1和MAGEA3在喉鳞癌组织中特异高表达,可能以某种方式参与了喉癌的发生、发展,是进行喉癌免疫治疗的理想靶分子之一。

应用多重RT-PCR技术检测食管癌患者外周血多种肿瘤基因标志物的研究

目的:建立多重RT-PCR同步检测技术,联合检测黑色素瘤抗原MAGEA3基因、人类斯钙素hsTC1基因、上皮细胞角质蛋白CK20、CK19基因及癌胚抗原CEA基因mRNA在食管癌患者外周血中的表达。方法:在分析MAGEA3、hSTC1、CK20、CK19、CEA和β-actin六种基因mRNA全长序列资料的基础上,自行设计并筛选出6对引物及6条寡核苷酸探针,利用多重RT-PCR技术并结合基因芯片对样本进行检测。结果:全部样品均可检出β-actin,55例食管癌患者外周静脉血中MAGEA3、hSTC1、CK20、CK19和CEA的阳性表达率分别为25.45%、47.27%、49.09%、34.55%和52.73%;多重RT-PCR技术同时检测MAGEA3、hSTC1、CK20、CK19和CEA基因,如果至少表达其中一种即可作为阳性表达者,其阳性表达率可达72.73%。而10例食管癌组织中均为阳性,28例正常健康捐献者的外周血中有2例CEA表达阳性,27例非肿瘤病人的外周血中有3例CK20阳性,3例CK19阳性,3例CEA阳性。测序结果证实RT-PCR产物确为MAGEA3、hSTC1、CK20、CK19和CEA基因。结论:联合检测MAGEA3、hSTC1、CK20、CK19和CEA可以增加外周血循环癌细胞检测的敏感性,本研究建立的多重RT-PCR技术可以做为一种快速、灵敏的检测手段。

早期宫颈癌外周血MAGE_(A3)和hSTC_1 mRNA的检测及意义

目的研究早期宫颈癌患者外周血中MAGE。和hSTC1mRNA的表达及临床意义。方法采用RT-PCR法检测60例ⅠA～ⅡA期宫颈癌患者及15例同期入院的排除其他恶性肿瘤的子宫肌瘤患者外周血中MAGEA3和hSTC，mRNA的表达，并分析其与临床病理因素之间的关系。结果60例早期宫颈癌患者外周血中MAGEA3和hSTC1mRNA的阳性表达率分别为46．67％（28/60）和40％（24／60），子宫肿瘤均为0％。MAGEA3和hSTC1mRNA的单独阳性表达率和双阳性表达率除与淋巴结转移和脉管瘤栓显著相关外（P〈O．05），与宫颈癌的预后因素如年龄、分期、分化、组织类型、肿瘤大小均无关（P〉0．05），但随着肿瘤分期及肌层浸润深度的增加有逐步上升的趋势。结论MAGEA3和hSTC1可作为检测早期宫颈癌外周血微转移的生物学指标，但对预后的意义有待于进一步研究。