基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术快速鉴定耐万古霉素屎肠球菌

目的:利用全自动生物质谱检测系统即基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)快速鉴别耐万古霉素屎肠球菌(vancomycin resistant Enterococcus faecium,VRE)和万古霉素敏感屎肠球菌(vancomycin susceptible Enterococcus faecium,VSE)。方法:收集临床分离的屎肠球菌,用仪器法和纸片扩散法(Kirby-Bauer,K-B)进行万古霉素耐药性确认。用MALDI-TOF MS对菌株进行再鉴定,采集图谱。用Clin Pro Tools 3.0软件对质谱峰图进行分析:随机选取25株VRE和50株VSE的质谱峰图用于模型的建立,用建立的模型验证剩余的15株VRE和35株VSE。结果:用Clin Pro Tools 3.0软件建立了遗传算法(GA)、快速分类算法(QC)、监督式神经网络算法(SNN),3种模型的交叉验证和识别能力分别为95.65%、100%,87.62%、94.98%,62.54%、100%。质荷比为2 194.94、3 022.15、3 167.47和4 058.08的质谱峰是用于区分VRE和VSE的最为明显的特征性峰,即两类菌株间存在的差异蛋白质谱峰(分别是峰6、峰27、峰32、峰52)。受试者工作特征曲线显示,这4个特征性峰的曲线下面积(AUC)均约为0.9。用3种模型分别进行的外部验证显示,GA算法、QC算法、SNN算法对VRE的敏感性和特异性分别为86.7%、82.8%,73.3%、85.7%,66.7%、80.0%。结论:在严格控制实验条件的情况下,MALDI-TOF MS可以在鉴定屎肠球菌的同时大致区分VRE和VSE,具有耗时短,敏感性、特异性相对较高的优势。

激光解吸电离飞行时间质谱技术及应用

本文简述了激光解吸电离飞行时间质谱(NALDI-TOF-MS)技术及其应用,同时介绍了MALDI-TOF-MS的构造、原理及特点。

玉米麸皮半纤维素由来的各分子质量片段的制备及鉴定

目的:为探讨玉米麸皮半纤维素生理活性与其分子大小的关系,采用体外的方法制备玉米麸皮半纤维素由来的各分子质量片段。方法:采用纯乙醇沉淀法、内源性木聚糖酶水解法和酸分解法制备各分子质量片段,通过薄层层析和基质辅助激光解析电离化-飞行时间质谱进行鉴定及分子质量测定。结果:玉米麸皮半纤维素多糖、玉米麸皮半纤维素低聚糖和玉米麸皮半纤维素单糖分别为分子质量在20～140ku范围的阿拉伯木聚糖,分子质量在286～930u的木糖低聚糖和木糖阿拉伯低聚糖以及分子质量为157u的木糖、阿拉伯糖。本研究结果可为玉米麸皮半纤维素生理活性研究打下基础。