点击化学制备AChE/MAO-B双抑制剂及活性评价

通过点击化学(Click)设计、合成了22个香豆素衍生物。多数化合物在微摩尔范围内表现出良好的AChE和MAO-B双抑制活性,具有良好的生物相容性。尤其是一种名为A2B5的化合物,对AChE和MAO-B的IC_(50)分别为(0.23±0.02)、(0.31±0.03)μmol/L,是最佳的AChE/MAO-B双抑制剂。实验结果表明香豆素基团是一类有效的AChE和MAO-B双抑制活性基团,羟基取代苯环的存在能够增强抑制活性。分子对接研究发现A2B5是双位点抑制剂,苯基部分结合到AChE的CAS位点,香豆素结合到PAS位点,三氮唑环占据两个活性位点的中间峡谷。A2B5的香豆素部分结合到MAO-B的入口空腔,苯基部分结合到底物空腔,并嵌入到Tyr435、Tyr398和FAD形成的“芳香笼”。总之,香豆素C7位置取代衍生物可以被开发为AChE/MAO-B双抑制剂,为进一步开发抗阿尔茨海默病的双靶点药物提供一个新的起点。

选择性MAO-B抑制剂TM-5对胶质瘤U87细胞自噬和凋亡的影响

目的探讨选择性单胺氧化酶B(MAO-B)抑制剂TM-5对胶质瘤U87细胞体外自噬及凋亡的影响。方法正常培养胶质瘤细胞株U87,随机分为6组:对照组不做处理,5、10、25、50、100μmoL/L TM-5组分别予以5、10、25、50、100μmoL/L TM-5处理细胞,每组设3个复孔。采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测促凋亡蛋白Bcl-2相关蛋白X(Bax)、抑凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的基因表达;蛋白质免疫印迹(WB)检测细胞凋亡相关蛋白Bax和切割后半胱氨酸蛋白酶3(cleaved caspase-3)以及自噬相关标志蛋白Beclin-1、自噬相关蛋白1轻链-Ⅱ(LC3-Ⅱ)和P62表达。结果与对照组比较,10、25、50、100μmoL/L TM-5组U87细胞存活率降低(P<0.05),选取5、10、25μmoL/L TM-5组(细胞存活率>50%)进行后续实验。与对照组比较,10、25μmoL/L TM-5组相对细胞凋亡率、细胞中LC3-Ⅱ和Bax蛋白相对表达量升高,差异有统计学意义(P<0.05);5、10、25μmoL/L TM-5组U87细胞中促凋亡基因Bax mRNA相对表达水平、Beclin-1和cleaved caspase-3蛋白相对表达量升高,抑凋亡基因Bcl-2 mRNA、P62蛋白相对表达量降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TM-5可抑制胶质瘤U87细胞存活,可上调Beclin-1、LC3-Ⅱ、Bax和cleaved caspase-3,下调Bcl-2和P62表达,诱导细胞自噬和凋亡。

内源性MAO-B抑制因子-靛红预防MPTP对多巴胺神经递质的耗竭作用(英文)

研究内源性单胺氧化酶B抑制因子 靛红 (2 ,3 吲哚醌 ,isatin)对MPTP引起的小鼠纹状体DA含量降低的影响。用高效液相色谱配电化学检测器测定纹状体DA ,DOPAC和HVA水平。MPTP 30mg/kgip使纹状体DA ,DOPAC和HVA含量与各自对照组比较显著降低 (P <0 .0 1) ,预先靛红 (2 0 0mg/kg·d ,× 4d ,ig)几乎完全抑制了上述效应 ,并减少了MPTP对DA更新率的升高 ,说明靛红有预防MPTP对中枢DA能神经元的毒性。

敦煌石室大宝胶囊对衰老大鼠脑组织MAO-B、Na^+-K^+-ATP酶活性的影响

目的:通过敦煌石室大宝胶囊对衰老大鼠脑组织MAO B和Na+K+ATP酶活性的影响,探讨敦煌石室大宝胶囊延缓衰老的作用机理。方法:采用D-半乳糖颈后皮下注射的方法,造成亚急性衰老动物模型。将60只大鼠随机分为空白组、模型组、脑复康组、中药大宝(大、中、小)剂量组,分别对各组大鼠脑组织MAO B和Na+K+ATP酶活性进行检测。结果:与空白组比较,模型组大鼠脑组织MAO B显著升高(P<0.01),Na+K+ATP酶活性显著下降(P<0.01)。与模型组比较,敦煌石室大宝胶囊可显著降低脑组织MAO B(P<0.01),显著升高Na+K+ATP酶活性(P<0.01)。结论:敦煌石室大宝胶囊具有调节脑细胞能量代谢和脑神经递质、保护脑细胞的功能。

五参方对疲劳紧张所致老年前期大鼠脑MAO-B活性的影响

老年前期是人类45～59岁年龄阶段,是人体由盛至衰的转折时期,老年前期的抗衰防老应该成为现代老年医学研究的一个重要方面。而老年前期的主要致衰因素存在特殊性,如心理生理的过度疲劳导致机体脏器功能失调等,本研究主要探讨疲劳紧张对老年前期大鼠脑MAO-B活性的影响和中?..

益脑方对小鼠脑、心、肝组织及血中MAO-B、SOD、LPO和蛋白质含量的影响

经临床和药效研究表明,益脑方有改善记忆障碍,促进学习记忆功能的作用。为探讨其机理,本文报告对小鼠脑、心、肝组织及血中单胺氧化酶B(MAO-B)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化脂质(LPO)和蛋白质含量等的影响。1

甘草对老年大鼠SOD、LPO、MAO-B影响的实验研究

以Ｗｉｓｔａｒ大鼠为研究对象，对大鼠红细胞ＳＯＤ活性、脑组织ＭＡＯ－Ｂ活性、红细胞ＬＰＯ含量进行测定，观察上述指标的随龄变化，甘草对老年大鼠上述指标的影响。结果表明：大鼠的ＳＯＤ活性在其成长阶段随龄升高（Ｐ＜０．０１）；红细胞ＬＰＯ含量随龄增加（Ｐ＜０．０１）；脑组织ＭＡＯ－Ｂ活性随龄增加，甘草水煎剂能提高老年大鼠ＳＯＤ活性，降低ＬＰＯ含量，降低ＭＡＯ－Ｂ活性（Ｐ＜０．０１）。不同的用药时间对上述指标的影响无明显差异（Ｐ＞０．０５）。提示甘草可以抗衰老。

大白鼠下丘、桥脑B型单胺氧化酶(MAO-B)的研究

脊椎动物听觉皮层下该团的功能性研究被揭示时尚很有限,(?)报导用神经生化的方法,研究了大白鼠中枢神经系统中,与听觉有关的下丘,桥脑比全脑MAO-B monoamme oxidase E C 1.23.4的活性,及在药物作用下的变化,以探讨单胺类神经递质在支因下听觉中枢作用的可能性,结果表明:1.与听觉有关的下丘,桥脑MAO-B活性明显高于全脑的平均水平.2.药物制首乌对下丘、桥脑及全脑的MAO-B活性均有显著的抑制作用,结果提示:下丘、桥脑MAO-B对单胺类神经递质的氧化脱氨作用高于全脑的平均水平,单胺类神经递质有可能作为皮层下听觉中枢的神经递质参与听觉的活动.

抗衰I号方对亚急性衰老小鼠血清MAO-B活性及脑蛋白含量的影响

目的观察抗衰I号方对亚急性衰老小鼠血清MAO-B活性及脑蛋白含量的影响。方法采用D-半乳糖致亚急性衰老小鼠模型。分离脑组织称重计算脑指数;采用紫外分光光度法测定小鼠血清MAO-B活性;考马斯亮蓝测定小鼠脑组织中蛋白含量。结果与模型组比较,抗衰1号方各给药组均能不同程度降低血清中MAO-B活性(P<0.05),增加脑蛋白含量(P<0.05),对脑指数无显著性影响。结论抗衰I号方抗衰老作用机理可能与其降低血清MAO-B活性,提高脑蛋白含量有关。

吲哚醌抗帕金森病药理作用研究进展

帕金森病(Parkinson′s disease,PD)是一种神经退行性病变,治疗药物主要有拟多巴胺药和抗胆碱药两大类,多巴胺类及其增效剂现有长足发展,包括单胺氧化酶-B(monoamine oxidase B,MAO-B)抑制剂、儿茶酚-氧位-甲基转移酶抑制剂、麦角类和非麦角类多巴胺(dopamine,DA)受体激动剂、DA前体药物,中药大麻类和吲哚醌等。吲哚醌作为内源特异抗老化酶MAO-B抑制剂,有多种药理活性,其机制还涉及多种蛋白调节的活性。

鹿茸提取物对老年小鼠衰老指标的影响

本文观察了鹿茸水提物(0.5～1.0g/kg)对老年小鼠(24月龄)及青年小鼠(1月龄)某些衰老指标的影响。结果表明鹿茸水提取物可明显降低血清中胆固醇、甘油三酯含量;增加脑和肝蛋白质含量;降低脑和肝MDA含量;增强脑和肝SOD活性;抑制脑和肝MAO-B活性;增加脑内5-HT、NE和DA含量。鹿茸水提物对老年小鼠上述指标的影响较青年小鼠更明显,提示鹿茸对老年小鼠具有抗衰老作用。

梅花鹿胎盘脂质的抗衰老作用

观察了梅花鹿胎盘脂质(0.25 g/kg)对青年小鼠(1 月龄)和老年小鼠(24 月龄)某些衰老生化指标的影响。结果表明,鹿胎盘脂质可显著抑制小鼠脑和肝脏中单氨氧化酶-B(MAO-B)的活性,提高脑和肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)的活性;降低小鼠心肌组织脂褐素的含量;明显提高小鼠皮肤和尾腱中羟脯氨酸(HYP)的含量。鹿胎盘脂质对老年小鼠上述生化指标的影响较青年小鼠更明显,提示鹿胎盘脂质对老年小鼠具有抗衰老作用。

雌激素类药物对去卵巢大鼠认知功能的影响

目的 :观察去卵巢 ( OVX)成年雌鼠的认知功能、脑内神经生化学改变及补充雌激素的影响。方法 :通过跳台法测试动物被动及主动回避反应 ,神经生化学手段测定相关酶及受体活性。结果 :OVX组大鼠的学习记忆能力明显下降 ;大脑皮层和海马部位的胆碱乙酰化转移酶 ( Ch AT)活性显著低下 ;大脑皮层胆碱能 M受体和 N-甲基 -D-天门冬氨酸 ( NMDA)受体结合活性明显降低而单胺氧化酶 B( MAO-B)活性增加。经补充苯甲酸雌二醇 ( EB)或植物雌激素 NH1 9966周后 ,其学习记忆明显改善 ,上述生化指标均接近正常。结论 :推测雌激素和 NH1 996可通过影响中枢胆碱能 。

β-淀粉样肽损伤后小鼠脑单胺氧化酶B、白细胞介素6的变化及中药的干预作用

目的观察β-淀粉样肽(Aβ)25-35致痴呆小鼠模型脑单胺氧化酶B(MAO-B)、白细胞介素-6(IL-6)的改变及中药脑复聪的干预作用.方法脑室内注射Aβ25-35造成痴呆模型小鼠,用Morris水迷宫测空间学习记忆功能;用比色法测MAO-B活性;免疫组化检测IL-6.结果模型小鼠的Morris水迷宫潜伏期(81.3±13.4)s,比对照组(34.2±10.9)s延长(P<0.05);大脑皮层和海马的MAO-B活性(120.12±10.15)、(83.60±5.29)均较对照组(93.09±10.54)、(50.39±9.16)升高(P<0.05～0.01),海马齿状回有大量IL-6免疫荧光阳性细胞.经脑复聪治疗后,水迷宫潜伏期(43.7±12.7)s缩短(P<0.05);海马的MAO-B活性(47.11±6.57)回降(P<0.01);IL-6免疫阳性神经细胞减少.结论抑制海马MAO-B的过度激活,减少自由基的产生,减少氧化应激反应,抑制小胶质细胞产生炎性因子IL-6,缓解Aβ的损伤作用,阻断AD发病的重要环节,是中药脑复聪治疗AD的重要机理之一.

脑康冲剂治疗阿尔茨海默病的临床与实验研究

目的探讨益脑补肾中药复方脑康冲剂对阿尔茨海默病(AD)的临床疗效。方法临床研究选择120例AD患者随机分为脑康冲剂组90例和脑复康组30例,分别予脑康冲剂和脑复康;实验研究选择56只小鼠每日每只颈部皮下注射10%D-半乳糖0.1 m/10 g,连续60 d,制备AD小鼠模型,并随机分为模型组(灌胃自来水)、脑康冲剂Ⅰ组(6 g.kg-1.d-1)和Ⅱ组(12 g.kg-1.d-1)(给药量按所含生药量计算)、脑复康组(0.6 g.kg-1.d-1),以上每组14例,并设正常对照组(n=14,灌胃自来水),以上各组雌雄各半。。结果3个月后观察到,脑康冲剂对AD有明显改善作用,临床症状改善率达97.8%,其疗效优于脑复康,记忆商提高也明显优于脑复康。实验研究证实脑康冲剂不仅可以改善衰老造成的学习记忆功能衰退,而且可以降低脑组织中过氧化脂质(LPO)含量和B型单胺氧化酶(MAO-B)活性,从而减少超氧阴离子自由基对脑组织的损伤及拮抗衰老引起的脑组织内单胺类递质的减少,防止脑功能衰退。结论脑康冲剂对AD有很好的疗效。

慢性铝过负荷致大鼠认知功能损伤及尼莫地平保护作用观察

目的观察铝过负荷对大鼠的神经毒性及尼莫地平的保护作用。方法大鼠灌胃给予葡萄糖酸铝(Al3+400mg/kg),1次/d,1周5d,持续12周,建立慢性铝负荷致大鼠脑损伤、神经元退变模型。观察指标包括行为学(跳台法测定被动回避性学习记忆能力、水迷宫测定空间定向能力)、组织病理学、生化酶学(MAO-B、ChAT、AchE和SOD活性,MDA含量)等,尼莫地平(80mg/kg)或者生理盐水在给予铝盐后4h灌胃给予。结果与对照组相比,慢性铝过负荷明显导致大鼠被动回避性学习记忆能力和空间定向能力障碍、大鼠海马神经元明显核固缩和数目减少;海马ChAT、SOD活性明显降低,AchE、MAO-B活性、MDA含量明显升高;尼莫地平给予能明显改善铝负荷大鼠的学习记忆能力损害和海马神经元损伤。结论铝过负荷致大鼠脑损伤、学习记忆能力障碍可能涉及细胞内钙超载、氧化应激损伤以及MAO-B活性改变;尼莫地平对慢性铝负荷的神经毒性有明显的保护作用。

祁州漏芦对大鼠B型单胺氧化酶活性的抑制作用

体外实验证明,祁州漏芦乙醇提取物能显著抑制大鼠大脑线粒体B型单胺氧化酶(MAO—B)的活性,而对肝MAO—B活性的抑制作用仅为对脑抑制作用的50％左右。酶促动力学研究表明,祁州漏芦对MAO—B活性的抑制作用属竞争性抑制。