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番鸭VIPR1和miR-317以及MAP3K7和miR-244靶向关系的研究
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作者 李丽 辛清武 +4 位作者 章琳俐 缪中纬 朱志明 梁阿政 郑嫩珠 《中国家禽》 北大核心 2024年第6期15-19,共5页
试验旨在验证番鸭就巢相关miRNA与靶基因靶向关系。试验利用miRanda、PITA和RNAhybrid三个软件的交集预测miR-317和miR-244靶基因,构建VIPR1-pmirGLO/MAP3K7-pmirGLO野生型和突变型双荧光素酶重组载体,将miR-317/VIPR1-Wt和miR-244/MAP3... 试验旨在验证番鸭就巢相关miRNA与靶基因靶向关系。试验利用miRanda、PITA和RNAhybrid三个软件的交集预测miR-317和miR-244靶基因,构建VIPR1-pmirGLO/MAP3K7-pmirGLO野生型和突变型双荧光素酶重组载体,将miR-317/VIPR1-Wt和miR-244/MAP3K7-Wt分别共转染至鸭胚成纤维细胞,检测双荧光素酶活性。结果显示:与miR-NC组相比,miR-317/VIPR1-Wt共转染组相对荧光值显著降低(P<0.05);VIPR1突变后,miR-NC组与miR-317组的相对荧光值不显著(P>0.05),说明突变后完全抑制miR-317对VIPR1的结合作用,VIPR1与miR-317之间存在相互结合作用。与miR-NC组相比,miR-244/MAP3K7-Wt共转染组相对荧光值无显著性差异(P>0.05);MAP3K7突变后,miR-NC组与miR-244组的相对荧光值差异不显著(P>0.05),表明MAP3K7与miR-244之间不存在相互结合作用。研究提示,miR-317与VIPR1存在确切靶向结合位点,即VIPR1是miRNA miR-317的靶基因,而miR-244与MAP3K7不存在靶向关系。 展开更多
关键词 番鸭 就巢 miR-317 miR-244 map3k7 VIPR1
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大黄素通过调节miR-582-3p影响MAP3K1活性抑制乳腺癌细胞增殖并诱导凋亡
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作者 范敏慧 帅仁亚 李晴宇 《浙江中西医结合杂志》 2024年第5期407-414,共8页
目的 探讨大黄素(emodin,EMO)通过microRNA(miR)-582-3p/MAP3K1对乳腺癌细胞增殖、凋亡的作用及分子机制。方法 培养人乳腺癌细胞株MCF-7、MDA-MB-231以及人乳腺细胞系Hs578Bst,使用不同浓度的EMO处理细胞,细胞根据培养条件分为对照组、... 目的 探讨大黄素(emodin,EMO)通过microRNA(miR)-582-3p/MAP3K1对乳腺癌细胞增殖、凋亡的作用及分子机制。方法 培养人乳腺癌细胞株MCF-7、MDA-MB-231以及人乳腺细胞系Hs578Bst,使用不同浓度的EMO处理细胞,细胞根据培养条件分为对照组、EMO(10μM)组、NC mimics组、NC mimics+EMO组、miR-582-3p mimics组和miR-582-3p mimics+EMO组,检测EMO及miR-582-3p异常表达对乳腺癌细胞增殖及凋亡的影响。荧光定量(qRT-PCR)检测miR-582-3p及MAP3K1的表达。MTT和EdU实验检测乳腺癌细胞增殖,流式细胞术和TUNEL实验检测细胞凋亡及细胞周期。蛋白印迹(Western blot)检测增殖标志蛋白Ki-67及凋亡标志蛋白Bcl-2、Bax和Caspase-3在癌细胞中的表达水平。结果 EMO可以抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231及MCF-7的增殖能力[(17.65±0.96)%比(28.63±2.16)%,(15.02±1.71)%比(28.22±1.89)%,P<0.05]、调节细胞周期并促进细胞凋亡[(23.67±1.25)%比(5.73±0.84)%,(27.33±1.73)%比(5.17±0.85)%,P<0.05]。Western blot结果显示,EMO可抑制细胞中Ki-67及Bcl-2的表达并促进Caspase-3(cleaved)及Bax的表达(P<0.05)。EMO处理乳腺癌细胞后miR-582-3p的表达显著下调[(0.45±0.09)比(1.00±0.10),(0.37±0.05)比(1.00±0.11),P<0.01],而过表达miR-582-3p会逆转EMO对乳腺癌细胞生物学活性的影响(P<0.05)。EMO还会通过miR-583-3p调节癌细胞中MAP3K1的表达(P<0.05)。结论 EMO可能通过调节miR-582-3p影响MAP3K1活性抑制乳腺癌细胞增殖并诱导凋亡。 展开更多
关键词 大黄素 乳腺癌细胞 miR-582-3p map3k1
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转录因子SP1调控MAP3K1表达影响糖尿病视网膜病变细胞凋亡和炎症反应
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作者 黄丹 邓芳祝 +1 位作者 谢功泽 李巧莲 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期519-523,共5页
目的:探究转录因子SP1对糖尿病视网膜病变(DR)细胞凋亡和炎症反应的影响及分子机制。方法:构建人视网膜微血管内皮细胞(hRMECs)的DR模型,通过转染将细胞分为Control组、HG组、HG+si-NC组、HG+si-SP1组、HG+si-SP1+oe-NC组和HG+si-SP1+oe... 目的:探究转录因子SP1对糖尿病视网膜病变(DR)细胞凋亡和炎症反应的影响及分子机制。方法:构建人视网膜微血管内皮细胞(hRMECs)的DR模型,通过转染将细胞分为Control组、HG组、HG+si-NC组、HG+si-SP1组、HG+si-SP1+oe-NC组和HG+si-SP1+oe-MAP3K1组。RT-qPCR检测SP1和MAP3K1表达;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA检测细胞中炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6含量。通过生物信息学寻找SP1与MAP3K1启动子间的结合位点,ChIP-qPCR验证SP1与MAP3K1启动子的结合情况。结果:与Control组相比,HG处理的hRMECs中SP1和MAP3K1表达均升高(P<0.05)。抑制SP1表达后细胞凋亡率明显降低(P<0.05),炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6含量明显减少(P<0.05)。抑制SP1可降低MAP3K1表达。进一步过表达MAP3K1逆转了si-SP1对HG诱导的hRMECs凋亡和炎症反应的抑制作用。结论:转录因子SP1通过促进MAP3K1表达促进DR细胞凋亡及炎症反应。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 SP1 map3k1 凋亡 炎症反应
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MAP3K9通过上调Notch-1促进胰腺癌细胞的增殖与迁移
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作者 陈宇佛 黄桦 曹通 《医学理论与实践》 2024年第20期3431-3436,共6页
目的:探讨MAP3K9通过调控Notch-1促进胰腺癌细胞增殖、迁移的机制。方法:在胰腺癌细胞中分别转染MAP3K9过表达质粒和siRNA,RT-qPCR检测MAP3K9 mRNA表达水平,MTT实验检测转染后细胞增殖能力的改变,流式细胞术检测细胞凋亡能力的变化,划... 目的:探讨MAP3K9通过调控Notch-1促进胰腺癌细胞增殖、迁移的机制。方法:在胰腺癌细胞中分别转染MAP3K9过表达质粒和siRNA,RT-qPCR检测MAP3K9 mRNA表达水平,MTT实验检测转染后细胞增殖能力的改变,流式细胞术检测细胞凋亡能力的变化,划痕试验检测细胞迁移能力的变化,Transwell实验检测细胞的迁移与侵袭能力,Western Blot检测MAP3K9、Notch-1及EMT相关蛋白的表达情况。结果:RT-qPCR和Western Blot显示,PaTu-8988和PANC-1细胞的MAP3K9表达水平低于BXPC-3细胞;RT-qPCR结果表明,转染MAP3K9过表达质粒可以显著提高PaTu-8988和PANC-1细胞MAP3K9 mRNA表达水平,而转染siRNA MAP3K9可明显下调BXPC-3细胞MAP3K9 mRNA表达水平;上调胰腺癌细胞MAP3K9表达,可提高胰腺癌细胞增殖、迁移与侵袭能力,并抑制细胞凋亡;在胰腺癌细胞中过表达MAP3K9,可上调Notch-1、Vimentin、N-cadherin以及slug蛋白表达水平,并降低E-cadherin表达水平。结论:MAP3K9能够激活Notch-1,进而促进胰腺癌细胞的上皮—间充质转化(EMT)过程,增强胰腺癌细胞增殖及迁移能力。 展开更多
关键词 map3k9 NOTCH-1 上皮—间充质转化 胰腺癌
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Involvement of CD40 (rs1883832) and MAP3K14 (rs2074292) Genes Polymorphisms in Hepatitis B Virus Infection in Burkina Faso, West Africa
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作者 Lassina Traore Nouhoun Nignan +12 位作者 Sanata Kiemde Abdoul Rasmané Koumbem Sidnooma Véronique Zongo Minane Nafissa Triande Abdoul Karim Ouattara Marie Simone Traore Tegwindé Rébéca Compaore Tani Sagna Ina Marie Traore Albert Théophane Yonli Bolni Marius Nagalo Florencia Wendkuuni Djigma Jacques Simpore 《Journal of Biosciences and Medicines》 2023年第12期343-361,共14页
Introduction: Hepatic diseases comprise inflammations of the liver, which can originate from drug-induced, toxic, autoimmune sources and particularly hepatitis B and C virus infection. The outcome of the disease is li... Introduction: Hepatic diseases comprise inflammations of the liver, which can originate from drug-induced, toxic, autoimmune sources and particularly hepatitis B and C virus infection. The outcome of the disease is linked to interactions between the immune system and the virus, and also depends on the age and immune status of the patient. The aim of this study was to evaluate the association of a MAP3K14 (rs2074292), CD40 (rs1883832) polymorphism and chronic hepatitis B virus carriage in a population from Burkina Faso. Methods: In this case-control analysis, 223 and 173 samples, consisting of 90 and 53 controls and 133 and 120 cases, were examined for MAP3K14 and CD40 respectively. The cases included patients with Chronic Hepatitis B (CHB), cirrhosis or hepatocellular carcinoma (HCC). Genomic DNA extraction was executed using INVITROGEN and FAVORGEN kits. Genotyping of MAP3K14 (rs2074292) and CD40 (rs1883832) gene polymorphisms was accomplished via real-time PCR on the QuantStudioTM 5 Real-Time instrument, followed by allelic discrimination using TaqMan Genotyper Software. Data was interpreted using SPSS version 20 and Epi info version 7.5.2.0. Odds ratios (OR), confidence intervals (CI), and p-values were derived for risk and significance evaluation. Results: This study showed that the heterozygous CT genotype and the mutated T allele of the CD40 (rs1883832) gene are involved in the progression of chronic hepatitis to cirrhosis and hepatocellular carcinoma in HBV-infected patients. However, no association was found between polymorphisms in the MAP3K14 gene (rs2074292) and the progression of HBV infection. By combining the two polymorphisms, we observed either high risk or protection, depending on the genotypes of the MAP3K14 and CD40 genes simultaneously carried by the patient. Conclusion: Polymorphisms of the MAP3K14 and CD40 genes are associated with the evolution of HBV infection. 展开更多
关键词 POLYMORPHISMS map3k14 CD40 HBV and Burkina Faso
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香猪MAP3K4基因结构变异多态性和基因表达研究
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作者 徐婷婷 齐芬芳 +5 位作者 黄世会 牛熙 李升 冉雪琴 王嘉福 谢健 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期5046-5055,共10页
基于前期比较基因组学分析,在香猪的丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶4(mitogen-activated protein kinase kinase kinase 4,MAP 3K4)基因第15内含子中发现一个189 bp的结构变异(MAP3K4-I15-sv189)。为探究该结构变异(structural variation,... 基于前期比较基因组学分析,在香猪的丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶4(mitogen-activated protein kinase kinase kinase 4,MAP 3K4)基因第15内含子中发现一个189 bp的结构变异(MAP3K4-I15-sv189)。为探究该结构变异(structural variation,SV)在香猪群体中的多态性分布及其对基因表达的影响,本研究设计一对特异性引物,建立MAP 3K4基因SV的PCR检测技术,分析香猪群体中该结构变异的基因类型;采用RT-qPCR研究结构变异不同基因型之间基因的差异表达。结果显示,香猪群体中MAP3K4-I15-sv189位点存在两种基因型,DD型和ID型(D为缺失基因,I与参考基因一致),其中D等位基因的频率为97.35%;大白猪群体中检测到3种基因型,DD型、ID型和II型,D等位基因频率为80%。相比之下,香猪的D等位基因频率显著高于大白猪的相应值(P<0.05)。采用生物信息学方法分析结构变异区域得到多种剪接元件和重复元件,可能影响MAP 3K4基因的表达。比较香猪各组织中MAP 3K4基因的表达量,发现该基因在肺组织的表达量最高。进一步检测肺组织中3种结构变异类型的相对表达量,显示:DD型>ID型>II型,表明SV的缺失可能促进MAP 3K4基因的表达。本研究表明,香猪MAP 3K4的结构变异MAP3K4-I15-sv189以缺失型为主,缺失型可促进肺组织MAP 3K4基因的表达。研究结果有助于解析香猪易感肺部疾病的分子机制。 展开更多
关键词 香猪 结构变异 MAP 3K4基因 多态性
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鼻咽癌中MAP3K5和Epstein-Barr病毒编码的miR-BART22表达的关系及意义 被引量:6
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作者 江庆萍 刘少颜 +4 位作者 何秀芳 彭娟 熊汉真 熊中堂 杨嶽鑫 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1146-1149,共4页
目的研究鼻咽癌中MAP3K5和Epstein-Barr病毒编码的miR-BART22的表达及其相关性。方法收集53例鼻咽癌石蜡档案标本和30例鼻咽黏膜慢性炎标本,分别行EBER和miR-BART22原位杂交及MAP3K5免疫组化检测;另分别选取10例鼻咽癌和鼻咽黏膜新鲜标... 目的研究鼻咽癌中MAP3K5和Epstein-Barr病毒编码的miR-BART22的表达及其相关性。方法收集53例鼻咽癌石蜡档案标本和30例鼻咽黏膜慢性炎标本,分别行EBER和miR-BART22原位杂交及MAP3K5免疫组化检测;另分别选取10例鼻咽癌和鼻咽黏膜新鲜标本提取蛋白行MAP3K5的Western blot检测。结果 53例鼻咽癌EBER均阳性,49例miR-BART22阳性;30例鼻咽黏膜慢性炎EBER和miR-BART22均阴性。MAP3K5在53例鼻咽癌组织中50例为阴性,癌巢周围粘膜组织呈阳性表达,3例弱阳性(+)表达。30例鼻咽粘膜慢性炎中,25例强阳性表达(++~+++),3例弱阳性(+)表达,2例阴性;鼻咽癌和鼻咽黏膜慢性炎MAP3K5差异具有统计学意义(P<0.001);Westernblot检测结果黏膜慢性炎MAP3K5蛋白表达值高于鼻咽癌(P=0.029)。MAP3K5和miR-BART22表达呈负相关(P<0.001)。结论 MAP3K5在鼻咽癌组织中表达水平低于黏膜上皮组织。MiR-BART22与之相反,在鼻咽癌中高表达,而黏膜慢性炎中缺乏。MAP3K5和miR-BART22在鼻咽癌中表达呈负相关。根据以上实验和相关文献,我们推测MAP3K5可能是EB病毒miR-BART22靶标基因,EB病毒miR-BART22通过抑制MAP3K5的表达,使相应磷酸化MAP3K5蛋白减少,进而下调MAPK通路下游基因蛋白的磷酸化,并行使对NPC细胞抑制凋亡、阻止分化并促进免疫逃逸等作用。 展开更多
关键词 鼻咽癌 map3k5 EPSTEIN-BARR病毒 miR-BART22 MIRNA
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人卵巢癌组织中MAP3K3 mRNA的表达及预后分析 被引量:8
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作者 尹灿 张莹 +6 位作者 董玉玲 陶林 邹泓 梁伟华 赵瑾 李锋 贾薇 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期248-252,共5页
目的探讨有丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶3(mitogen-activated protein kinase kinase kinase 3,MAP3K3)的mRNA表达与卵巢癌临床病理特征及预后的相关性。方法采用qRT-PCR法检测MAP3K3 mRNA在卵巢癌和输卵管组织中的表达,并分析其差异... 目的探讨有丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶3(mitogen-activated protein kinase kinase kinase 3,MAP3K3)的mRNA表达与卵巢癌临床病理特征及预后的相关性。方法采用qRT-PCR法检测MAP3K3 mRNA在卵巢癌和输卵管组织中的表达,并分析其差异表达与临床病理特征的关系,评价MAP3K3 mRNA表达在卵巢癌患者预后中的价值。结果 MAP3K3 mRNA在卵巢癌组织中的表达显著高于输卵管组织(P<0.05),其高表达与卵巢癌FIGO分期及发病模式分型相关(P<0.05);KaplanMeier生存分析显示,MAP3K3 mRNA高表达患者的无瘤生存时间和总体生存时间均显著短于低表达患者(中位生存时间:34个月vs 52.2个月,P<0.05;38.6个月vs 52.5个月,P<0.05);单因素分析显示,MAP3K3 mRNA高表达与卵巢癌患者预后差相关(HR=4.198,95%CI:1.711~10.302,P<0.05)。结论 MAP3K3 mRNA在卵巢癌组织中高表达,其高表达与卵巢癌FIGO分期、发病模式及预后差呈正相关,可能参与了卵巢癌的恶性转化。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 map3k3 MRNA 预后
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miRNA-199a-3p调控MAP3K4在胃癌中的表达 被引量:8
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作者 闵小春 伍婷婷 +4 位作者 曾吉 张晓雪 刘晓明 景小鹏 金策 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第17期2817-2820,共4页
目的探讨胃癌中MIRNA-199A-3P调控候选基因MAP3K4的表达。方法收集35例胃癌及癌旁组织标本,采用茎环逆转录-聚合酶链式反应法检测胃癌组织及癌旁组织中MIR-199A-3P的表达水平,WESTERN BLOT法检测MAP3K4表达;细胞转染法检测MIR-199A-3P调... 目的探讨胃癌中MIRNA-199A-3P调控候选基因MAP3K4的表达。方法收集35例胃癌及癌旁组织标本,采用茎环逆转录-聚合酶链式反应法检测胃癌组织及癌旁组织中MIR-199A-3P的表达水平,WESTERN BLOT法检测MAP3K4表达;细胞转染法检测MIR-199A-3P调控MAP3K4表达,双荧光素酶报告基因检测系统验证MIR-199A-3P结合MAP3K4的3’UTR的靶位点。结果与癌旁组织相比,胃癌组织MIR-199A-3P高表达,且其候选基因MAP3K4低表达;MIR-199A-3P MIMICS转染抑制MAP3K4表达;MAP3K4是MIR-199A-3P作用的靶基因。结论 MIR-199A-3P是胃癌的一个癌基因,MAP3K4是受其调控的靶基因。 展开更多
关键词 胃肿瘤 MIR-199A-3P map3k4
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角膜混浊小鼠突变候选基因Map3k1克隆与序列分析 被引量:4
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作者 吴刘成 刘春 +2 位作者 蒋荧梅 王生存 邵义祥 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第4期1-5,共5页
对具有角膜混浊表型的B6-Co突变系小鼠突变候选基因Map3k1进行克隆及测序分析,寻找该突变系小鼠Map3k1基因的突变位点。以小鼠Map3k1基因的mRNA、全长及上游5 kb序列设计引物,分别以基因组DNA和mRNA为模板,采用PCR和RT-PCR技术分段扩增... 对具有角膜混浊表型的B6-Co突变系小鼠突变候选基因Map3k1进行克隆及测序分析,寻找该突变系小鼠Map3k1基因的突变位点。以小鼠Map3k1基因的mRNA、全长及上游5 kb序列设计引物,分别以基因组DNA和mRNA为模板,采用PCR和RT-PCR技术分段扩增目的基因,将目的片段连接在T载体上,转化至感受态细胞,筛选阳性克隆,质粒DNA分子提取,电泳检测,EcoRⅠ酶切释放目的片段,送上海生工生物工程技术服务有限公司测序。成功扩增出Map3k1基因的20个外显子和上游调控序列,B6-Co小鼠测序结果与基因组数据库序列比对,该基因位于13号染色体第112 559 574的碱基由T突变为A,编码的蛋白质第314氨基酸由亮氨酸变为谷氨酸,但是该基因的表达调控及蛋白质剪切机制仍有待深入研究。 展开更多
关键词 B6-Co突变系小鼠 map3k1基因 PCR扩增 序列分析
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六味地黄丸对三阴性乳腺癌MAP3K1、SOX2表达的影响 被引量:5
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作者 郑里翔 权威 +2 位作者 周露 黄萍 黎红 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2022年第9期5-8,I0013,I0014,共6页
目的研究六味地黄丸(滋阴方)抑制三阴性乳腺癌生长的分子机制。方法SPF级雌性昆明种鼠200只,每3 d触诊乳腺部位,6个月仍未发瘤的小鼠为正常组,发瘤后的小鼠随机分成5组:模型组,紫杉醇组,六味地黄丸低、中、高剂量组(滋阴方各组),至濒死... 目的研究六味地黄丸(滋阴方)抑制三阴性乳腺癌生长的分子机制。方法SPF级雌性昆明种鼠200只,每3 d触诊乳腺部位,6个月仍未发瘤的小鼠为正常组,发瘤后的小鼠随机分成5组:模型组,紫杉醇组,六味地黄丸低、中、高剂量组(滋阴方各组),至濒死期剥离瘤组织;制备六味地黄丸含药血清低、中、高剂量组(滋阴方各含药血清组)干预MDA-MB-231细胞;蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)、免疫荧光法(immunofluorescence,IF)检测丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶1(mitogen-activated protein kinase kinase kinase 1,MAP3K1)、性别决定区Y框蛋白2(sex determining region Y-box 2,SOX2)的表达水平。结果动物实验表明,与模型组相比,滋阴方中、高剂量组及紫杉醇组MAP3K1蛋白表达升高,SOX2蛋白表达下降(P<0.05);体外实验表明:MAP3K1沉默后,阳性RNAi滋阴方含药血清高、中、低剂量组(阳性RNAi滋阴方各含药血清组)MAP3K1表达显著上升,SOX2表达显著下降(P<0.05)。结论滋阴方可通过上调MAP3K1的蛋白表达,下调SOX2的表达来调控MAPK信号通路从而发挥抑制乳腺癌生长的作用。 展开更多
关键词 三阴性乳腺癌 六味地黄丸 map3k1 SOX2
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miRNA-520a-3p调控MAP3K2表达对肺癌干细胞凋亡的影响 被引量:9
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作者 鄢俊 钟志宏 施华球 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2018年第13期2051-2056,共6页
背景:有研究证实,miRNA-520a-3p在肺癌干细胞中有一定调节作用,但具体功能和作用机制尚不明确。目的:探索miRNA-520a-3p对肺癌干细胞凋亡的影响,并对其作用机制进行初步研究。方法:采用免疫磁珠法从肺腺癌细胞株A549中分离出CD133^+肺... 背景:有研究证实,miRNA-520a-3p在肺癌干细胞中有一定调节作用,但具体功能和作用机制尚不明确。目的:探索miRNA-520a-3p对肺癌干细胞凋亡的影响,并对其作用机制进行初步研究。方法:采用免疫磁珠法从肺腺癌细胞株A549中分离出CD133^+肺癌干细胞。实时荧光定量PCR检测miRNA-520a-3p在CD133^+肺癌干细胞中的表达。采用脂质体转染法增加CD133^+肺癌干细胞中miRNA-520a-3p表达水平,流式细胞术检测过表达miRNA-520a-3p对CD133^+肺癌干细胞凋亡的影响。双荧光素酶报告基因实验检测miRNA-520a-3p对MAP3K2基因的调控作用。Western Blotting检测过表达miRNA-520a-3p对CD133^+肺癌干细胞中MAP3K2,Bcl-2和Caspase-3蛋白表达的影响。结果与结论:(1)在CD133^+肺癌干细胞中,miRNA-520a-3p表达水平显著低于CD133-肺癌细胞(P<0.05);(2)过表达miRNA-520a-3p后,显著增加了CD133^+肺癌干细胞凋亡百分比(P<0.05);(3)抑制miRNA-520a-3p表达能够显著增强含有MAP3K2基因3’-非翻译区(3’-UTR)报告质粒的荧光素酶活性(P<0.05),增加miRNA-520a-3p表达能够显著降低含有MAP3K2基因3’-UTR报告质粒的荧光素酶活性(P<0.05);(4)过表达miRNA-520a-3p后,CD133^+肺癌干细胞中MAP3K2,Bcl-2蛋白表达降低(P均<0.05),而Caspase-3蛋白表达增加(P<0.05);(5)结果表明,在CD133^+肺癌干细胞中,miRNA-520a-3p呈低表达状态。miRNA-520a-3p可能通过调控MAP3K2基因表达,诱导CD133^+肺癌干细胞凋亡。 展开更多
关键词 miRNA-520a-3p 肺癌 肿瘤干细胞 CD133 map3k2 细胞凋亡 干细胞
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猪MAP3K5基因CDS序列克隆及生物信息学分析 被引量:2
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作者 蒲蕾 岳静伟 +10 位作者 张金山 刘欣 王立刚 颜华 侯欣华 高红梅 张恬 张跃博 武群清 张龙超 王立贤 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第10期2509-2517,共9页
试验克隆了猪MAP3K5基因cDNA序列,分析了猪MAP3K5基因与MAP3K家族及其他物种MAP3K5基因的序列同源性,并研究了其保守结合域。通过RACE-PCR扩增获得猪MAP3K5基因5 452bp的序列,并分析其可能的开放阅读框及预测蛋白序列,获得了MAP3K5基因3... 试验克隆了猪MAP3K5基因cDNA序列,分析了猪MAP3K5基因与MAP3K家族及其他物种MAP3K5基因的序列同源性,并研究了其保守结合域。通过RACE-PCR扩增获得猪MAP3K5基因5 452bp的序列,并分析其可能的开放阅读框及预测蛋白序列,获得了MAP3K5基因31个外显子结构。通过比对发现,猪MAP3K5基因与MAP3K家族其他成员的mRNA及蛋白质序列的同源性较低,均在50%以下,其中猪MAP3K5与MAP3 K6基因序列的同源性相对较高;猪MAP3K5基因与其他物种的MAP3K5基因的mRNA及蛋白质序列的同源性较高,均在78%以上,其中猪MAP3K5基因与牛、绵羊、犬和人的MAP3K5基因序列的同源性较高。对与猪MAP3K5序列同源性更高的蛋白质进行保守结构域分析,发现MAP3K6与MAP3K5的保守域和结合位点类似,其他MAP3K家族成员与MAP3K5的结构域差别较大;而其他物种的MAP3K5与猪MAP3K5相比保守结构域和结合位点相似。结果初步表明了猪MAP3K5序列和结构域特点,可为后续MAP3K5基因的功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 map3k5基因 序列比对 结构域
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MAP3K9对奶牛乳腺上皮细胞增殖及乳蛋白合成的影响 被引量:1
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作者 穆莹 王淼 +1 位作者 冯一兵 郑冰 《中国乳品工业》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期16-20,61,共6页
以奶牛乳腺上皮细胞为模型,研究丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶9(MAP3K9)对细胞增殖和β-酪蛋白(CSN2)合成的影响。对细胞进行蛋氨酸刺激,检测细胞增殖及细胞中CSN2和MAP3K9的表达。过表达或抑制MAP3K9,检测细胞增殖及细胞中CSN2,MAPK1,p-M... 以奶牛乳腺上皮细胞为模型,研究丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶9(MAP3K9)对细胞增殖和β-酪蛋白(CSN2)合成的影响。对细胞进行蛋氨酸刺激,检测细胞增殖及细胞中CSN2和MAP3K9的表达。过表达或抑制MAP3K9,检测细胞增殖及细胞中CSN2,MAPK1,p-MAPK1,m TOR和p-m TOR的表达。过表达MAP3K9且抑制MAPK1,检测细胞增殖与细胞中m TOR、p-m TOR和CSN2的表达。结果表明:蛋氨酸刺激使细胞增殖及细胞中CSN2和MAP3K9的表达显著增加(p<0.01);MAP3K9过表达或抑制时,细胞增殖及细胞中CSN2,MAPK1,p-MAPK1,m TOR和p-m TOR的表达均显著增加或降低(p<0.01),但抑制MAPK1时,过表达MAP3K9不能使细胞增殖及细胞中m TOR,p-m TOR和CSN2的表达增加。结果表明,作为一个调节因子,MAP3K9能通过激活细胞中的MAPK1来激活m TOR通路,正向调控奶牛乳腺上皮细胞增殖与乳蛋白合成。 展开更多
关键词 map3k9 奶牛乳腺上皮细胞 Β-酪蛋白 细胞增殖 蛋氨酸 MAPK1 MTOR
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人源MAP3K7克隆及其GST融合蛋白的表达和鉴定 被引量:1
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作者 冯艳玲 刘彩红 朱亚勤 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期688-690,共3页
目的构建MAP3K7蛋白GST的融合表达载体,高效表达和纯化GST-MAP3K7融合蛋白,为GST Pulldown实验做准备。方法通过PCR扩增MAP3K7全长编码基因,经双酶切定向克隆至表达载体pGEX-5X-1,构建原核重组表达载体pGEX-5X-1-MAP3K7,通过酶切和测序... 目的构建MAP3K7蛋白GST的融合表达载体,高效表达和纯化GST-MAP3K7融合蛋白,为GST Pulldown实验做准备。方法通过PCR扩增MAP3K7全长编码基因,经双酶切定向克隆至表达载体pGEX-5X-1,构建原核重组表达载体pGEX-5X-1-MAP3K7,通过酶切和测序鉴定后,导入E.coli BL21宿主菌中,IPTG诱导表达融合蛋白,经谷胱甘肽琼脂糖凝胶纯化表达产物,SDS-PAGE和Western blot分析鉴定。结果经测序鉴定成功构建了原核重组表达载体pGEX-5X-1-MAP3K7,诱导后的GST融合蛋白经SDS-PAGE和Western blot检测到分子量正确的特异性蛋白条带,经纯化后,得到了高纯度的融合蛋白。结论成功构建了MAP3K7全长的GST重组表达载体,确定了GST-MAP3K7融合蛋白表达的最佳条件,诱导成功并得到了高纯度的融合蛋白,为进一步研究MAP3K7蛋白的生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 map3k7基因 基因克隆 融合蛋白 原核表达
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干扰MAP3K1基因对山羊毛囊干细胞增殖和凋亡的影响 被引量:3
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作者 马金亮 王健 +3 位作者 冯云奎 王强 张柳明 李拥军 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期56-62,共7页
研究旨在探讨促分裂原活化蛋白激酶激酶激酶(Mitogen-activated protein kinase kinase kinase 1,MAP3K1)基因对体外培养长江三角洲白山羊毛囊干细胞(HFSCs)增殖和凋亡的影响。针对MAP3K1基因设计3个干扰靶点,构建pDNA316-ZsGreen-ShRN... 研究旨在探讨促分裂原活化蛋白激酶激酶激酶(Mitogen-activated protein kinase kinase kinase 1,MAP3K1)基因对体外培养长江三角洲白山羊毛囊干细胞(HFSCs)增殖和凋亡的影响。针对MAP3K1基因设计3个干扰靶点,构建pDNA316-ZsGreen-ShRNA腺病毒干扰载体。转染HFSCs,以空载体细胞为对照,RT-qPCR技术检测干扰MAP3K1效果及增殖相关基因(PCNA、CDK1、CCND2)、凋亡相关基因(Bax、Bcl-2)表达水平,CCK-8和EdU法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡。结果表明,shRNA(MAP3K1-sh)转染HFSCs后,MAP3K1基因相当表达量极显著下降(P<0.01);增殖相关基因mRNA表达水平显著下降,促凋亡基因Bax的mRNA表达水平显著提高,相反,抗凋亡基因Bcl-2的mRNA表达显著降低;CCK-8和EdU结果发现细胞增殖受抑制,S期细胞数量显著上升;细胞总凋亡量显著上升。综上,干扰MAP3K1基因表达显著抑制HFSCs增殖并促进其凋亡,研究为阐明调控长江三角洲白山羊优质笔料毛分子形成机制提供科学参考。 展开更多
关键词 map3k1基因 HFSCs 细胞增殖 细胞凋亡 长江三角洲白山羊
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miR-381靶向MAP3K2抑制前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭 被引量:7
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作者 王晖 徐雪莹 张徐 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2019年第3期208-215,共8页
目的:探讨微小RNA-381(miR-381)对前列腺癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响,并研究miR-381的靶基因及其功能。方法:采用qRT-PCR检测miR-381在人前列腺癌细胞系中的表达水平。采用基因转染方法过表达或敲减miR-381在前列腺癌细胞中的表达,采... 目的:探讨微小RNA-381(miR-381)对前列腺癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响,并研究miR-381的靶基因及其功能。方法:采用qRT-PCR检测miR-381在人前列腺癌细胞系中的表达水平。采用基因转染方法过表达或敲减miR-381在前列腺癌细胞中的表达,采用MTT法和克隆形成实验检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡;划痕损伤实验、Transwell迁移实验和基质胶侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力。采用生物信息学方法预测miR-381靶点,并采用荧光素酶报告基因分析进行验证。结果:miR-381在前列腺癌细胞中低表达。与空白对照组相比,miR-381 mimics组前列腺癌细胞增殖能力明显降低,克隆数显著减少,凋亡明显增加,迁移和侵袭的细胞数减少;miR-381 inhibitor组结果则相反。荧光素酶报告基因分析证实MAP3K2是miR-381中的靶基因。miR-381 mimics下调而miR-381 inhibitor上调前列腺癌细胞中MAP3K2基因和蛋白表达。结论:miR-381通过靶向MAP3K2抑制前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭,发挥抑癌基因作用。 展开更多
关键词 前列腺癌 miR-381 map3k2 增殖 迁移 侵袭
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MAP3K5基因在畜禽剩余采食量表型调控中的研究进展 被引量:2
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作者 丁燕玲 马应 +3 位作者 杨朝云 师丹丹 史远刚 康晓龙 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第1期218-225,共8页
随着分子遗传学的发展,已经鉴定出了影响剩余采食量(RFI)的大量数量性状位点和候选基因。有丝分裂原活化蛋白3激酶5(MAP3K5),也称凋亡信号调节激酶1(ASK1),属于MAPK超家族基因之一。目前,已有细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)、c-Jun N-末... 随着分子遗传学的发展,已经鉴定出了影响剩余采食量(RFI)的大量数量性状位点和候选基因。有丝分裂原活化蛋白3激酶5(MAP3K5),也称凋亡信号调节激酶1(ASK1),属于MAPK超家族基因之一。目前,已有细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)、c-Jun N-末端激酶(JNK)和p38丝裂原激活蛋白激酶(p38-MAPK)这3个MAPK家族成员在哺乳动物细胞中被克隆和鉴定,其主要作用机制是介导3条MAPKs信号通路,从而影响家畜的生长、体型及产奶性状等。课题组在前期对RFI的研究中筛选出与牛剩余采食量相关的MAP3K5基因,但其功能作用尚不明确,笔者在此基础上回顾了该基因的结构、生物学功能,概述了该基因在主要畜禽采食量变异及人类肥胖表型中的功能及作用,并从遗传学的角度重点分析了MAP3K5基因在畜禽RFI表型调控中的可能机制。通过对MAP3K5基因在畜禽RFI表型调控中的研究进展进行综述,期望为后期深入开展MAP3K5基因在畜禽采食量性状调控中的分子机制研究提供思路;对于其他可能通过MAP3K5基因影响畜禽表型的因素(如肠道菌群)有待进一步探讨。 展开更多
关键词 map3k5基因 剩余采食量(RFI) 采食量(FI) 饲料利用效率 肥胖
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MAP3K1及LSP1基因单核苷酸多态与中国北方汉族绝经前妇女乳腺癌风险相关性 被引量:1
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作者 吴昊 姜永冬 庞达 《现代肿瘤医学》 CAS 2015年第8期1083-1086,共4页
目的:探讨MAP3K1及LSP1基因单核苷酸多态与中国北方汉族绝经前妇女乳腺癌风险的关系。方法:采用多重单碱基延伸单核苷酸多态性分型技术(Snapshot)分析方法,检测280例绝经前乳腺癌患者和287例绝经前正常对照者MAP3K1基因rs889312和LSP1基... 目的:探讨MAP3K1及LSP1基因单核苷酸多态与中国北方汉族绝经前妇女乳腺癌风险的关系。方法:采用多重单碱基延伸单核苷酸多态性分型技术(Snapshot)分析方法,检测280例绝经前乳腺癌患者和287例绝经前正常对照者MAP3K1基因rs889312和LSP1基因rs3817198多态性位点基因型,并比较不同基因型与乳腺癌风险的关系。结果:MAP3K1基因rs889312和LSP1基因rs3817198多态性位点基因型频率在乳腺癌和对照样本之间未存在显著差异(P=0.937、P=0.323)。Logistic回归分析结果显示,对于MAP3K1的rs889312位点,与AA携带者相比,AC携带者、CC携带者和AC+CC基因型携带者与乳腺癌的患病危险无关(OR=0.814,95%CI=0.537-1.236,P=0.335;OR=0.999,95%CI=0.627-1.594,P=0.998;OR=0.876,95%CI=0.591-1.298,P=0.509);对于LSP1的rs3817198位点,与TT携带者相比,CT携带者、CC携带者和CT+CC基因型携带者与乳腺癌的患病危险无关(OR=0.832,95%CI=0.565-1.223,P=0.349;OR=0.651,95%CI=0.108-3.936,P=0.640;OR=0.839,95%CI=0.573-1.229,P=0.369)。结论:上述两个基因MAP3K1和LSP1位点多态性与中国北方汉族绝经前妇女乳腺癌易感性之间无明显相关性。 展开更多
关键词 乳腺癌 map3k1基因 LSP1基因 单核苷酸多态 遗传易感性
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MAP3K3基因过表达通过多条信号通路激活CREB促进人肺腺癌细胞增殖及上皮-间质转化 被引量:1
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作者 郭振辉 茆文莉 +4 位作者 陈文雅 梁娇 侯聪艳 张韧 何彦丽 《广东医学》 CAS 2022年第8期939-944,共6页
目的通过体外干预有丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶3(MAP3K3)基因表达研究其对人肺腺癌细胞增殖、侵袭以及上皮-间质转化(EMT)的影响,探讨MAP3K3在肺腺癌发生、发展中的作用及可能的机制。方法使用慢病毒转染构建稳定过表达MAP3K3的人肺... 目的通过体外干预有丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶3(MAP3K3)基因表达研究其对人肺腺癌细胞增殖、侵袭以及上皮-间质转化(EMT)的影响,探讨MAP3K3在肺腺癌发生、发展中的作用及可能的机制。方法使用慢病毒转染构建稳定过表达MAP3K3的人肺腺癌细胞株H1299、A549,通过克隆形成实验、划痕实验及Transwell实验,检测细胞增殖、迁移及侵袭行为的变化;Western blot实验检测EMT相关蛋白波形蛋白(Vimentin)、钙黏蛋白E(E-cadherin)和钙黏蛋白N(N-cadherin)表达水平,检测MAP3K3下游信号分子AKT、mTOR、ERK1/2、JNK1/2及其磷酸化蛋白表达水平,检测过表达和敲低MAP3K3的H1299细胞p-CREB蛋白表达水平变化。结果过表达MAP3K3基因后,H1299和A549细胞的增殖、迁移及侵袭能力明显增强,细胞的上皮表型分子E-cadherin下调,间质表型分子Vimentin和N-cadherin上调,p-AKT、p-mTOR、p-ERK1/2、p-JNK1/2以及p-CREB蛋白表达上调;使用shRNA稳定敲低MAP3K3后p-CREB蛋白表达明显下调。结论人肺腺癌细胞株H1299和A549体外过表达MAP3K3基因后,可增强细胞增殖、迁移及侵袭能力,促进细胞EMT,其机制可能与MAP3K3通过激活多个下游信号通路,磷酸化激活CREB(环磷腺苷效应元件结合蛋白)有关,此研究可为基于该信号通路的新型靶向药物开发提供一些实验依据。 展开更多
关键词 肺腺癌 map3k3 CREB 上皮-间质转化
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