Amyotrophic lateral sclerosis(ALS)is a rare neurological disease,featuring gradual loss of muscle controls due to degeneration of motor neurons.Unfortunately,there is currently no cure for ALS.The available therapies ...Amyotrophic lateral sclerosis(ALS)is a rare neurological disease,featuring gradual loss of muscle controls due to degeneration of motor neurons.Unfortunately,there is currently no cure for ALS.The available therapies only offer a limited extension of survival by several months,begging for more options of therapeutics.展开更多
本实验室前期研究表明,小菜蛾通过有丝分裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号途径上游转录激活的关键基因MAP4K4反式调控多个中肠受体基因的表达,从而介导其对苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis(Bt)产生...本实验室前期研究表明,小菜蛾通过有丝分裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号途径上游转录激活的关键基因MAP4K4反式调控多个中肠受体基因的表达,从而介导其对苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis(Bt)产生的Cry1Ac杀虫蛋白的高抗性。为进一步明确MAP4K4基因转录激活而过量表达的顺式调控机制,本文利用小菜蛾基因组数据库中MAP4K4基因序列信息,首先克隆了Bt Cry1Ac敏感小菜蛾种群MAP4K4基因上游5′-侧翼序列,得到了两种不同形式的5′-侧翼序列:MAP4K4-1和MAP4K4-2。随后,预测分析了其中的潜在功能顺式作用元件,同时发现其中核苷酸的转换会导致顺式作用元件的改变。本研究初步揭示了小菜蛾MAP4K4基因的5′-侧翼序列的遗传多样性,为后续明确MAP4K4的顺式调控机制奠定了基础。展开更多
目的探讨MAP4K1在黑色素瘤(cutaneous melanoma,CM)细胞和组织中表达及对恶性CM细胞A375迁移、侵袭的影响和机制。方法收集自2010年1月至2015年12月重庆市中医院皮肤科诊治的CM患者54例,采用GEPIA在线分析CM组织中MAP4K1的表达,实时定...目的探讨MAP4K1在黑色素瘤(cutaneous melanoma,CM)细胞和组织中表达及对恶性CM细胞A375迁移、侵袭的影响和机制。方法收集自2010年1月至2015年12月重庆市中医院皮肤科诊治的CM患者54例,采用GEPIA在线分析CM组织中MAP4K1的表达,实时定量聚合酶链法和免疫组织化学法检测CM组织中MAP4K1 m RNA和蛋白的表达水平;以MAP4K1基因表达最高的A375细胞为研究对象,采用脂质体转染法将MAP4K1抑制质粒和对照质粒转染至A375细胞;免疫蛋白印迹实验和实时定量聚合酶链法分别检测MAP4K1的基因敲除;分别通过Transwell实验检测MAP4K1敲除后对细胞侵袭的影响;荧光素酶报告实验检测MAP4K1对YAP/TAZ的调控;GEPIA验证MAP4K1与Hippo-YAP通路下游靶点的表达相关性;免疫蛋白印迹实验验证MAP4K1敲除后对Hippo-YAP信号通路的影响。结果与癌旁组织相比,MAP4K1 m RNA和蛋白在皮肤恶性CM细胞和组织中的表达上调(P<0.001);MAP4K1基因敲除A375细胞迁移和侵袭的能力明显受到抑制(P<0.001);MAP4K1敲除后YAP/TAZ的转录活性及下游的靶分子下调;MAP4K1基因敲除能抑制Hippo-YAP通路传导。结论MAP4K1在CM中表达上调,可能作为潜在的癌基因调控Hippo-YAP通路促进CM的发生发展。展开更多
基金supported by the TARCC,Welch Foundation Award(1-1724)the Decherd Foundation,the Pope Adarms FoundationNIH grants NS092616,NS127375,NS117065,and NS111776(to CLZ)。
文摘Amyotrophic lateral sclerosis(ALS)is a rare neurological disease,featuring gradual loss of muscle controls due to degeneration of motor neurons.Unfortunately,there is currently no cure for ALS.The available therapies only offer a limited extension of survival by several months,begging for more options of therapeutics.
文摘本实验室前期研究表明,小菜蛾通过有丝分裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号途径上游转录激活的关键基因MAP4K4反式调控多个中肠受体基因的表达,从而介导其对苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis(Bt)产生的Cry1Ac杀虫蛋白的高抗性。为进一步明确MAP4K4基因转录激活而过量表达的顺式调控机制,本文利用小菜蛾基因组数据库中MAP4K4基因序列信息,首先克隆了Bt Cry1Ac敏感小菜蛾种群MAP4K4基因上游5′-侧翼序列,得到了两种不同形式的5′-侧翼序列:MAP4K4-1和MAP4K4-2。随后,预测分析了其中的潜在功能顺式作用元件,同时发现其中核苷酸的转换会导致顺式作用元件的改变。本研究初步揭示了小菜蛾MAP4K4基因的5′-侧翼序列的遗传多样性,为后续明确MAP4K4的顺式调控机制奠定了基础。
文摘目的探讨MAP4K1在黑色素瘤(cutaneous melanoma,CM)细胞和组织中表达及对恶性CM细胞A375迁移、侵袭的影响和机制。方法收集自2010年1月至2015年12月重庆市中医院皮肤科诊治的CM患者54例,采用GEPIA在线分析CM组织中MAP4K1的表达,实时定量聚合酶链法和免疫组织化学法检测CM组织中MAP4K1 m RNA和蛋白的表达水平;以MAP4K1基因表达最高的A375细胞为研究对象,采用脂质体转染法将MAP4K1抑制质粒和对照质粒转染至A375细胞;免疫蛋白印迹实验和实时定量聚合酶链法分别检测MAP4K1的基因敲除;分别通过Transwell实验检测MAP4K1敲除后对细胞侵袭的影响;荧光素酶报告实验检测MAP4K1对YAP/TAZ的调控;GEPIA验证MAP4K1与Hippo-YAP通路下游靶点的表达相关性;免疫蛋白印迹实验验证MAP4K1敲除后对Hippo-YAP信号通路的影响。结果与癌旁组织相比,MAP4K1 m RNA和蛋白在皮肤恶性CM细胞和组织中的表达上调(P<0.001);MAP4K1基因敲除A375细胞迁移和侵袭的能力明显受到抑制(P<0.001);MAP4K1敲除后YAP/TAZ的转录活性及下游的靶分子下调;MAP4K1基因敲除能抑制Hippo-YAP通路传导。结论MAP4K1在CM中表达上调,可能作为潜在的癌基因调控Hippo-YAP通路促进CM的发生发展。
