原癌基因在介导细胞因子影响卵母细胞成熟中的作用

目的:探讨原癌基因c-erbB_2、c-myb在介导表皮生长因子、肿瘤坏死因子α、内皮素-1及一氧化氮影响卵母细胞成熟中的作用。方法:建立小鼠卵母细胞体外培养模型,观察EGF、TNFα、ET-1及NO供体小剂量硝普钠(SNP)对卵细胞成熟的影响,用RT-PCR和Western blotting方法检测在上述细胞因子作用下卵母细胞c-erbB2和c-myb表达及丝裂原蛋白激酶(MAPK)和成熟促进因子(MPF)含量的变化。结果:EGF(10μg/L)能促进卵母细胞的成熟,使c-erbB_2 mRNA、c-myb mRNA表达上升,伴随MAPK磷酸化水平和cyclinB1含量升高;TNFα(10μg/L)和ET-1(10^(-7)mol/ L)均使卵母细胞中c-erb_2 mRNA和c-myb mRNA表达下降,伴随MAPK磷酸化水平和cyclinB1含量下降,抑制卵母细胞的成熟。小剂量SNP(10^(-5)mol/L)对卵母细胞成熟无明显影响,但能反转二丁酰环磷酸腺苷(dbcAMP)对卵母细胞成熟的抑制作用,使c-erbB_2mRNA和c-myb mRNA表达升高,MAPK磷酸化水平及cyclinB1含量升高,但仍低于对照组。结论:细胞因子对卵母细胞成熟的影响与原癌基因c-erbB_2和c-myb有关,c-erbB_2和c-myb可能是介导细胞因子和MAPK、MPF间调控卵母细胞成熟的上游激活物。