柴金解郁安神片调控CaMKII和Cofilin双信号通路改善抑郁症海马谷氨酸能神经元突触重塑

目的探讨柴金解郁安神片调控钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKII)和Cofilin双信号通路,改善抑郁症海马谷氨酸能神经元突触重塑的分子机制。方法皮质酮联合脂多糖建立抑郁症体外细胞模型,实验设正常组、模型组、GR阻断剂组、GR激动剂组、CX3CR1阻断剂组、CX3CR1激动剂组、柴金解郁安神片组、柴金解郁安神片联合GR激动剂组、柴金解郁安神片联合CX3CR1激动剂组,观察星形胶质细胞、小胶质细胞、前扣带皮层(anterior cingulate cortex,ACC)和海马神经元形态结构变化;检测ACC和海马谷氨酸能神经元激活及突触重塑情况;免疫荧光、Western blot分别检测海马谷氨酸能神经元内突触重塑相关谷氨酸受体2A(GRIN2A)、GRIN2B、CaMKII、MK2、Cofilin蛋白表达水平。结果柴金解郁安神片能明显改善胶质细胞、ACC和海马神经元损伤,并抑制ACC和海马谷氨酸能神经元异常激活,同时下调GRIN2A、GRIN2B、MK2蛋白,上调CaMKII、Cofilin蛋白,继而改善海马谷氨酸能神经元突触可塑性损伤和突触重塑。结论柴金解郁安神片能有效改善抑郁症海马谷氨酸能神经元突触重塑,其分子机制与调节突触重塑相关NR/CaMKII、MK2/Cofilin信号通路有关。

MAPKAPK2表达水平在非小细胞肺癌预后中的评估价值分析

目的:探讨致癌基因促分裂原活化蛋白激酶活化蛋白激酶2(MAPKAPK2)的表达水平在非小细胞肺癌(NSCLC)预后中的评估价值.方法:采用免疫组化方法检测200例NSCLC组织中MAPKAPK2基因的蛋白表达量,采用Log-rank检验和COX回归分析MAPKAPK2表达与NSCLC预后的关联,并用时间依赖的ROC曲线探讨其预测价值.结果:NSCLC患者中位生存期随MAPKAPK2表达分级而显著缩短(低∶中∶高:22个月∶15个月∶8个月;Log-rank检验P=2.51×10-6);MAPKAPK2高表达组患者较低表达患者死亡率增加(HR=3.02,95%CI=1.86-4.92).NSCLC五年生存率下,MAPKAPK2表达的ROC曲线下面积值可达0.711.结论:MAPKAPK2高表达可增加肺癌患者的死亡风险,对NSCLC患者的预后具有较好的预测价值.

槐定碱通过靶向MAPKAPK2抑制人结直肠癌的发展

目的研究槐定碱对人结直肠癌发生发展的影响及其分子机制。方法利用CCK8,流式细胞术和免疫荧光等实验方法,阐明槐定碱对结直肠癌细胞增殖,自噬,凋亡和周期的影响。通过PharmMapper和KEGG databXase等网络药理学方法,发现槐定碱的潜在靶标。并利用CETSA,DARTS分析和蛋白质免疫印迹实验研究槐定碱对其靶标的影响。结果槐定碱能显著抑制结直肠癌细胞增殖和形成集落的能力。槐定碱在浓度为0~160μmol·L^-1范围内,呈剂量依赖调节细胞自噬、凋亡和周期的相关蛋白。槐定碱80~160μmol·L^-1处理的细胞进行流式细胞术检测,结果显示,槐定碱引起细胞G2/M期阻滞并促进细胞凋亡;细胞内LC3的免疫荧光显示,LC3明显上调,表明槐定碱促进结直肠癌的自噬。过表达MAPKAPK2能显著恢复槐定碱引起的细胞阻滞及自噬、凋亡的促进作用;siRNA敲低MAPKAPK2显示与槐定碱相似的作用,且同时敲低MAP⁃KAPK2和槐定碱处理后作用更加显著。通过临床数据分析,MAPKAPK2的高表达伴随着病人的预后不良。结论槐定碱通过靶向MAPKAPK2促进细胞自噬、凋亡和周期阻滞,从而抑制结直肠癌的发生与发展。

枳实通降颗粒通过干预MK2磷酸化抑制炎症反应防治术后炎性肠梗阻相关性肺损伤

目的研究枳实通降颗粒对P38通路中MK2磷酸化及术后炎性肠梗阻(POI)相关性肺损伤的影响,探讨其作用机制。方法先将84只大鼠随机分为空白组,假手术组,模型组,枳实通降颗粒低、中、高剂量组(4.2、8.3、16.6 g/kg)和普芦卡必利组(0.18 mg/kg)。造模术后6 h,所有大鼠均按5 mL/kg给药量一次性灌胃给药。药物干预组予相应药物,其余各组予同等量生理盐水。术后24 h取材,检测各组大鼠肺组织中炎症因子IL⁃6、IL⁃8、TNF⁃α水平的变化及髓过氧化酶(MPO)的活性改变,HE染色观察肺组织的病理形态学改变、Western⁃blot及PCR分别检测肺组织中MK2/p⁃MK2蛋白及mRNA的表达情况,并检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞的数量。结果与空白组和假手术组比较,模型组大鼠肺组织的病理评分及炎症因子IL⁃6、IL⁃8、TNF⁃α水平、支气管肺泡灌洗液(BALF)中肺泡中性粒细胞、巨噬细胞及淋巴细胞计数、p⁃MK2蛋白及mRNA的表达水平、MPO的活性均明显偏高(P<0.01)。与模型组比较,枳实通降颗粒中、高剂量组大鼠肺组织病理评分较低(P<0.01);而药物干预各组肺组织中炎症因子IL⁃6、IL⁃8、TNF⁃α水平、支气管肺泡灌洗液(BALF)中肺泡中性粒细胞、巨噬细胞及淋巴细胞计数、p⁃MK2蛋白及mRNA的表达水平、MPO的活性均明显低予模型组(P<0.01),以枳实通降颗粒中、高剂量组效果最明显。但各组大鼠肺组织中MK2蛋白及mRNA表达均无明显差异。结论枳实通降颗粒能有效的抑制炎症反应防治POI相关性肺损伤的发生,干预MK2的磷酰化进而抑制炎症发生是其主要的作用机制之一。

新生大鼠脑白质损害模型神经胶质细胞的凋亡及MK2、Nogo-B的表达研究

目的观察2日龄(P2)新生大鼠脑白质损害(WMD)后神经胶质细胞凋亡及丝裂原活化蛋白激酶活化蛋白激酶2(MK2)、Nogo-B的变化;探讨神经胶质细胞凋亡与MK2、Nogo-B变化的时相关系。方法制备新生鼠WMD模型,分别于WMD后30 min、1 h、4 h、12 h、1 d、3 d、7 d、14 d及21 d处死大鼠,TUNEL法检测脑白质神经细胞凋亡,免疫组化(SP)法检测Nogo-B蛋白的表达,原位杂交(POD法)检测MK2 mRNA表达。结果WMD组大鼠凋亡指数在缺氧缺血4 h、12 h、1 d、3 d、7 d组与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);WMD后1 h MK2mRNA在脑室周围白质及胼胝体区表达上调,并于损伤后3 d达到高峰。Nogo-B在WMD后12 h表达增加,3 d达高峰,在12 h、1 d、3 d、7 d的表达与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论MK2、Nogo-B在新生大鼠脑白质损害时表达增高,提示其参与了脑白质损害。

新疆维吾尔族不同性别人群中MK2基因变异与低密度脂蛋白胆固醇水平及肿瘤坏死因子-α的相关性

目的探讨不同性别间MK2基因功能区多态位点与新疆和田地区维吾尔族人低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的相关性。方法采用整群随机抽样方法抽取945个维吾尔族人作为研究对象,检测其血脂及TNF-α水平,并在48例维吾尔族血脂异常人群中测序筛查MK2基因功能区的变异位点,选取代表性变异位点,应用TaqMan-PCR进行基因型鉴定及病例-对照关联研究。结果男性MK2基因44890c/t的TT、CT、CC基因型总胆固醇水平分别为(4.35±1.20)、(4.69±1.34)、(4.83±1.44)mmol/L,差异有统计学意义(P=0.033);TNF-α水平分别为(106.63±62.39)、(128.44±86.15)、(153.06±82.99)ng/dl,差异有统计学意义(P=0.001);LDL-C水平分别为(2.64±1.16)、(2.81±1.28)、(3.04±1.32)mmol/L,差异无统计学意义(P>0.05)。女性44890c/t的TT、CT、CC基因型的LDL-C水平分别为(2.42±1.11)、(2.36±0.99)、(2.43±1.05)mmol/L,差异均无统计学意义(P>0.05)。不同性别MK2基因的44890c/t、rs 45514798基因型及等位基因频率分布在高LDL-C组和对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。线性回归分析提示,在男性中,体重指数(BMI)及TNF-α可能对LDL-C水平有影响(P<0.05),而44890c/t可能对TNF-α水平有影响(P<0.05);在女性中,年龄、BMI及腰臀比可能对LDL-C有影响(P<0.05)。结论 MK2基因44890c/t、rs 45514798位点可能与新疆维吾尔族男性和女性LDL-C均不相关。

支气管平滑肌细胞中MK2和MK3过表达对细胞因子分泌的调节作用

目的:研究支气管平滑肌细胞中丝裂原活化蛋白激酶2/3(MK2/3)的过表达对细胞因子分泌的调节作用。方法:将野生型MK2和MK3腺病毒转染至人支气管平滑肌细胞中,Western blot实验检测MK2和MK3蛋白表达水平,确定转染腺病毒的最佳感染系数,检测热休克蛋白HSP27的磷酸化水平以及MK2和MK3过表达对MAPK和核因子(NF)-κB信号通路的影响。ELISA检测支气管平滑肌细胞分泌细胞因子的情况。结果:野生型MK2和MK3腺病毒转染至支气管平滑肌细胞的最佳感染系数为40,在支气管平滑肌细胞内有活性。MK2通过p38MAPK信号通路促进IL-6的分泌,抑制正常T细胞表达及趋化因子配体5(CCL5)的分泌,MK3通过NF-κB信号通路抑制RANTES/CCL5的分泌。结论:本研究揭示了MK2和MK3在支气管平滑肌细胞中通过不同的信号通路调节细胞因子的分泌,通过靶向MKs可调节支气管气道炎症反应。

MK2基因与新疆维吾尔族女性三酰甘油的关联

目的:探讨MK2基因多态性与新疆和田地区维吾尔族女性三酰甘油(TG)的相关性。方法:采用整群随机抽样方法抽取590个维吾尔族女性作为研究对象,检测其血脂水平以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α),并在48例维吾尔族血脂异常人群中测序筛查MK2基因功能区的变异位点,选取代表性变异位点,应用TaqMan-PCR在大样本人群中进行基因型鉴定及病例-对照研究。结果:MK2基因rs44890位点CC、CT、TT 3种基因型及C、T等位基因在TG正常组、TG边缘异常组、TG升高组分布频率差异具有统计学意义(P=0.023和0.004);rs44890的不同基因型间TG差异无统计学意义,但有逐渐减少的趋势(CC>CT>TT),同时还发现TNF-α在3种基因型间有逐渐减小的趋势(CC>CT>TT),但差异无统计学意义;显性模型中,rs44890位点CT+TT基因型与TT基因型TG差异具有统计学意义(CC>CT+TT,P=0.021)。维吾尔族女性人群中rs45514798不同基因型间TG水平差异均无统计学意义。结论:MK2基因rs45514798位点与新疆维吾尔族女性TG不相关,rs44890位点与维吾尔族女性TG的关系有待进一步研究。

枳实通降颗粒通过干预MK2磷酸化调控c-kit表达防治术后炎性肠梗阻的机制研究

目的研究枳实通降颗粒对术后炎性肠梗阻模型大鼠小肠组织中MAPK激活蛋白激酶2(MAPK-activated protein kinase 2,MK2)、磷酸化MAPK激活蛋白激酶2(p-MK2)、炎症因子IL-6、IL-8、TNF-α及原癌基因(c-kit)的影响,探讨其作用机制。方法先将大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、枳实通降颗粒4.2 g·kg^(-1)、8.3 g·kg^(-1)、16.6 g·kg^(-1)组和普芦卡必利0.18 mg·kg^(-1)组,药物干预组于造模术后6 h灌胃给药1次,其余各组以生理盐水代替,术后24 h取材。ELISA法测定各组大鼠小肠组织中炎症因子的含量;Western blot检测小肠组织中MK2、p-MK2和c-kit的蛋白表达情况;RT-PCR检测MK2和c-kit mRNA的表达情况;免疫组化观察c-kit阳性细胞情况。结果与假手术组及空白组比较,模型组大鼠肠道推进率及c-kit蛋白、阳性细胞、mRNA的表达水平均明显偏低,而胃内容物残留率及小肠组织中炎症因子含量、p-MK2蛋白的表达水平则明显偏高(P<0.01);与模型组比较,枳实通降颗粒各剂量组及普芦卡必利组肠道推进率、c-kit蛋白及mRNA、阳性细胞的表达水平均明显升高,而胃内容物残留率及小肠组织中炎症因子含量、p-MK2蛋白表达水平则明显偏低(P<0.01)。但各组MK2蛋白及mRNA的表达水平并无明显差异(P>0.05)。结论枳实通降颗粒能显著促进术后炎性肠梗阻模型大鼠的胃肠功能恢复,其作用机制是通过干预MK2磷酸化,抑制肠壁组织的炎症反应,增加c-kit表达水平来实现的。

SOCS3、STEAP4、MK2和ZFP36基因间及基因-环境交互作用与新疆维吾尔族人群高血压的关联研究

目的研究SOCS3、STEAP4、MK2和ZFP36基因间及基因一环境交互作用与新疆维吾尔族人群高血压的相关性。方法采取以流行病学调查为基础的病例对照研究，选取872例维吾尔族自然人群（高血压组399例，正常对照组473例）作为研究对象。首先对STEAP4、MK2及ZFP36进行测序筛查维吾尔族高血压患者的基因变异位点，然后选择出代表性变异位点，而SOCS3基因则是查阅文献后直接选择代表性的标签SNPs，之后应用TaqMan-PCR基因型鉴定和病例对照研究，并结合多因子降维法（multifactordimentionalityreduction，MDR）分析基因一基因、基因一环境的交互作用。结果4个基因的10个TagSNPs变异位点的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律（P〉0．05）。在高血压及对照组中SOCS3基因rs9914220位点及STEAP4基因rs8122位点基因型频率分布有差异（X2=7．07，P=0．029；矿=8．631，P=0．013）。单体型分析发现SOCS3基因H4G-C-A在对照组的频率高于高血压组（10．47％VS6．58％％），差异有统计学意义（P=0．006）。MDR结果显示，在所有模型中，SOCS3rs9914220基因和超重肥胖交互作用检验准确性最高，为61．58％，交叉验证一致性为10／10，P=0．001。应用Logistic回归分析校正性别、年龄、空腹血糖、TC、TG等影响因素后显示，SOCS3基因rs9914220（CC＋CT）合并BMI作用增加新疆维吾尔族人群高血压发生风险（OR=1．025，95％CI：1．002-1．049，P=0．033）。结论SOCS3基因rs9914220（CC＋CT）合并超重肥胖时可能进一步增加新疆维吾尔族人群高血压的风险。

FI1256 MK2在有线电视信号实时监测系统中的应用

介绍了有线电视信号实时监测系统中信号解调器的工作原理和结构框图,着重论述了电解调器FI1256MK2的特性以及编程控制.最后给出信号解调器的频道选择软件设计.

Wellwash 4 MK2型洗板机的一点改进

芬兰雷勃Wellwash4MK2型酶标洗板机是一台比较实用的酶联免疫仪器。该仪器操作简单,洗板效果好,但在工作过程中,经常会发现泵中积聚有废液,影响洗板的正常操作。

基于MK2教学型数控铣床设计

数控铣床是数字控制机床(Computer numerical which control of machine tools)的简称,是用程序来控制系统的自动化机床,该控制系统能够逻辑地处理具有控制编码或其他符号指令规定的程序,并将其译码,从而使铣床动作。正常的数控铣床并不适用于学生们的课堂学习实验,因为一般铣床价格昂贵、拥有巨大的体积、软件硬件也相对比较封闭,故专门为此设计了一套教学型数控铣床,不仅功能多样符合一般铣床教学要求,而且软硬件结构都十分开放、成本不高、结构简单且具有代表性。

用GAL配合ISA总线模拟I^2C总线时序实现对FI1256 MK2的编程

FI1256MK2是被广泛应用的电视信号前端处理器,可使用I2C总线对其进行编程控制。当用在计算机扩展板中时,可由计算机总线通过硬件电路模拟I2C总线的时序。文章给出了用可编程逻辑器件GAL配合ISA总线模拟I2C时序来对FI1256MK2进行编程控制的方法。

FI1256 MK2在有线电视信号实时监测系统中的应用

介绍了有线电视信号实时监测系统中信号解调器的工作原理和结构框图,着重论述了电解调器FI1256MK2的特性以及编程控制,给出信号解调器的频道选择软件设计。

芬兰雷勃WELLWASH 4MK2洗板机常见故障的排除方法

这里对多年维修WELLWASH洗板机的经验进行总结,对常见故障的排除作一介绍,作为使用及维修时的参考。

CONDOR MK2D雷达保养与维护技术探讨

根据CONDOR MK2D雷达的使用情况,结合笔者几年来从事雷达技术保障工作的实践经验,总结出了CONDOR MK2D雷达保养与维护中行之有效的技术方法和步骤,工作中收到明显的效果,可供从事雷达技术保障工作的人员借鉴。

基于MK2技术数控车床教学仪器开发

本文针对目前数控机床的课堂教学脱离实物,讲解困难、抽象,学生不易理解,教学效果差等问题,设计制作一台小型数控机床教学用具。该小型数控机床在保留了数控机床各部分结构的同时,还增加了串口通信部分,可与电脑直接连接,通过开发软件直接利用G代码控制机床的主轴旋转和走刀路径,机床的占地面积小适用于小教室教学,解决了普通机床占地面积大的问题,操作简单,演示直观,真正做到实践、教学一体化。

MK2基因在睡眠呼吸暂停综合征中的差异研究

探讨睡眠呼吸暂停综合征中MK2基因功能区多态位点及甲基化的差异;方法:选取新疆医科大六附院2018年1月至2020年12月门诊和住院OSAHS患者200例,对照健康人群200例。测序筛查MK2基因功能区的变异位点(选取代表性rs4844550位点),及MK2基因启动子区甲基化水平的测定,进行病例对照研究。结果:OSAHS患者中,MK2基因携带rs4844550位点A等位基因的患者比不携带A等位基因的AHI更高及最低SAO2更低;OSAHS组MK2基因甲基化率与健康对照组间更高;OSAHS组中MK2基因甲基化率相差不大。结论:MK2基因与OSAHS的发病有一定关系,在不同民族间相差不大。