MASPIN基因在妊娠滋养细胞肿瘤中的表达及意义

目的:探讨MASPIN基因在妊娠滋养细胞肿瘤中的表达,了解MASPIN基因在妊娠滋养细胞肿瘤发生、发展中的作用。方法:采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接(SP)法检测10例妊娠滋养细胞肿瘤、30例葡萄胎、20例正常妊娠早期绒毛(对照组)各标本中MASPIN的表达。结果:妊娠滋养细胞肿瘤中MASPIN阳性表达率(10%,1/10)明显低于对照组(95%,19/20)(P<0.05)。葡萄胎组中MASPIN阳性表达率(60%,18/30)明显低于对照组(95%,19/20)(P<0.05)。妊娠滋养细胞肿瘤中MASPIN阳性表达率明显低于葡萄胎组(P<0.05)。结论:MASPIN的表达下调与妊娠滋养细胞疾病的发生、发展有关,可能是妊娠滋养细胞疾病发病的重要机制之一。

胃肠道间质瘤中maspin基因表达及其启动子甲基化的临床意义

目的探讨胃肠道间质瘤(GIST)中maspin基因表达及启动子甲基化在预测肿瘤生物学行为、评估预后中的作用。方法采用免疫组织化学法及甲基化特异性PCR分别检测52例GIST中maspin基因蛋白表达及其启动子甲基化情况,并对患者进行随访;分析maspin基因蛋白表达及启动子甲基化与GIST生物学行为及预后的关系。结果 maspin基因蛋白表达率及启动子甲基化率分别为67.3%(35/52)和26.9%(14/52),两者表达均与GIST侵袭危险性、复发转移显著相关,且两者间存在显著负相关。38例获访的GIST患者中,maspin蛋白表达与患者生存期显著相关(P<0.05),但maspin基因启动子甲基化与患者生存期无显著相关(P>0.05)。结论启动子甲基化可能是maspin表达减少或缺失的重要原因,且在GIST发生发展过程中起着重要作用,两者检测可用来评价GIST生物学行为,能否预测患者预后尚需进一步研究。

过表达maspin基因对肝癌细胞株MHCC-97中VEGF,uPA表达的影响

目的:探讨过表达maspin基因对肝癌细胞株MHCC-97中VEGF和uPA表达的影响及意义.方法:构建maspin/pEFIRES-N表达质粒,重组质粒转染后,采用RT-PCR及Western Blot方法分别从mRNA和蛋白水平检测肝癌细胞株MHCC-97中maspin,VEGF和uPA转染前后的表达.结果:成功构建maspin/pEFIRES-N重组质粒,并稳定转染到肝癌细胞株MHCC-97中.比较maspin/pEFIRES-N组和pEFIRES-N组的肝癌细胞株MHCC-97中maspin,VEGF和uPA的表达,结果显示转染maspin基因后在肝癌细胞株MHCC-97中maspin的mRNA和蛋白表达明显增强,而VEGF,uPA的mRNA和蛋白表达明显减弱(P<0.05).结论:在肝癌细胞株MHCC-97中,maspin基因的过表达会降低VEGF和uPA的mRNA及蛋白表达,从而可能抑制新生血管形成、阻断纤溶酶原激活物调节uPA的活性,减少ECM的降解,阻止肿瘤细胞的转移.

甲基化荧光PCR检测母血中游离胎儿maspin基因的研究

目的:探讨Taqman探针与甲基化特异性PCR(MSP)技术结合测定孕妇血浆中甲基化maspin(M-maspin)基因和非甲基化maspin(U-maspin)基因的可行性,并分析微量U-maspin的临床意义。方法:选择正常早、中、晚期妊娠妇女各30例为研究对象,健康未妊娠女性30例为对照,提取其血浆游离DNA。通过含目的基因质粒标准品绘制标准曲线,并应用甲基化荧光PCR方法检测各组血浆标本亚硫酸氢盐修饰后M-maspin基因和U-maspin基因的含量,分别代表母源性游离DNA和胎源性游离DNA水平。结果:除3例早期妊娠孕妇外,其余孕妇血浆中均检出了U-maspin基因,平均浓度在早期妊娠组为57拷贝/ml,中期妊娠组为121拷贝/ml,晚期妊娠组为561拷贝/ml;占母源性M-maspin基因的比例分别为1.88%、3.21%、9.58%。结论:母血中U-maspin基因具有游离胎儿DNA的动力学特点,可能成为一种通用胎儿标记物,应用甲基化荧光PCR技术检测孕妇血浆中微量U-maspin基因方法准确、可行。

maspin基因的抑癌作用机制及其在肝癌中作用的研究进展

maspin是一种肿瘤抑制基因,该基因具有诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞运动、侵袭、转移和肿瘤新生血管生成等作用。maspin基因表达受体内多条途径的精确调控,但其在肝癌中作用的研究较少。该文就maspin基因的抑癌作用机制及其在肝癌中作用的研究进展作一综述。

Maspin基因在乳腺癌骨髓和外周血微小转移检测中的应用价值

目的:研究Maspin基因在乳腺癌患者骨髓和外周血微小转移检测中的应用价值以及骨髓和外周血Maspin mRNA表达与乳腺癌临床病理因素之间的相关性。方法:采用巢式逆转录-聚合酶链反应检测10例良性乳腺疾病患者和41例乳腺癌患者骨髓及外周血中Maspin mRNA的表达。结果:在10例对照组骨髓和外周血中均未检测出Maspin mRNA,而在乳腺癌患者骨髓和外周血中分别有15例(36.6%)和16例(39%)检测到Maspin mRNA。骨髓和外周血中Maspin mRNA检测结果的符合率为87.8%,检测结果有相关性(χ2=22.563,P=0.000,R=0.742)。乳腺癌患者骨髓和外周血中Maspin mRNA表达率随病理分期升高、淋巴结转移、临床分期进展而升高,但均无显著性差异。如将患者按复发风险分组,高危组患者骨髓和外周血中Maspin mRNA表达率明显升高,但仅在骨髓中显示有显著性差异(χ2=6.621,P=0.037),而在外周血中无显著性差异(χ2=5.904,P=0.052)。结论:Maspin基因用于乳腺癌患者骨髓和外周血微小转移的检测具有很高的特异性,乳腺癌患者骨髓和外周血中Maspin mRNA表达可能与高危复发风险相关。

Maspin基因在乳腺癌骨髓微小转移检测中的应用

目的研究maspin基因在乳腺癌患者骨髓微小转移检测中的应用价值以及其与临床病理因素之间的相关性。方法采用巢式逆转录-聚合酶链反应检测20例良性乳腺疾病和67例乳腺癌患者骨髓中maspin mRNA的表达。结果对照组骨髓中均未检测出maspin mRNA,而在乳腺癌患者骨髓中有30例(44.8%)检测到maspin mRNA。乳腺癌患者骨髓中maspin mRNA表达率随肿块直径增大、临床分期进展而升高,但均无显著性差异;阳性淋巴结个数0～3个组和4个以上组maspin mRNA表达率分别为36.5%和73.3%,差异有显著性(χ2=6.374,P=0.012);0～1期组和2～4期组maspin mRNA表达率分别为22.2%和53.1%,差异有显著性(χ2=5.063,P=0.024);ER阴性组(61.5%)maspin mRNA表达率高于ER阳性组(34.1%)(χ2=4.828,P=0.028);如将患者按复发风险分组,maspinm RNA表达随复发风险性增高而升高,分别为低危组16.7%、中危组40.5%和高危组72.2%(χ2=9.587,P=0.008)。结论Maspin基因用于乳腺癌患者骨髓微小转移检测具有很高的特异性,乳腺癌患者骨髓中maspin mRNA表达与淋巴结转移程度、疾病进展有相关性并可能预示高复发风险。

maspin基因在肿瘤淋巴管生成中的调控作用机制研究进展

肿瘤淋巴管生成是非常复杂的过程,VEGF-C、VEGF-D、Ang、COX-2及肿瘤慢性炎症微环境在肿瘤淋巴管生成中起重要作用。maspin基因是一种抑癌基因,近期研究表明maspin可调控肿瘤微淋巴管生成过程,可能是通过调控VEGF-C及VEGF-D表达、调控Ang表达、调控COX-2表达、调节肿瘤慢性炎症微环境实现的。

Maspin基因在不同转移习性的人鼻咽癌细胞株中表达水平的研究

目的:在mRNA和蛋白水平检测5种不同转移习性的人鼻咽癌细胞株中Maspin基因表达的差异,探讨Maspin基因与已知转移习性人鼻咽癌细胞株之间的相关性,为鼻咽癌发生转移的可能机制及临床预测转移风险提供理论基础。方法:体外培养SUNE-1-5-8F、SUNE-1、CNE-2Z、CNE-1、SUNE-1-6-10B 5株不同转移习性的人鼻咽癌细胞株。用RT-PCR及Western blot 2种方法在mRNA和蛋白水平检测5种人鼻咽癌细胞株中Maspin基因表达情况。结果:Maspin基因在SUNE-1-5-8F、SUNE-1、CNE-1及SUNE-1-6-10B细胞株均有不同程度表达,差异无统计学意义(P>0.05),在CNE-2Z细胞株中不表达,且在mRNA和蛋白水平Maspin基因表达具有一致性;Maspin基因在不同转移习性人鼻咽癌细胞株中mRNA和蛋白表达量总体存在差异(P<0.05),但表达量不随鼻咽癌细胞株转移习性增高而降低(P>0.05)。结论:Maspin基因在不同转移习性的人鼻咽癌细胞株中mRNA和蛋白表达量不同;Maspin基因可能与人鼻咽癌细胞株的转移潜能无相关性。

乳腺癌组织中Maspin蛋白表达与maspin基因启动子甲基化关系的研究

背景与目的:探讨乳腺癌与maspin基因失活之间的关系。材料与方法:采用免疫组织化学方法检测30例乳腺癌患者癌组织、癌近旁组织和癌远旁组织中Maspin蛋白的表达情况,用亚硫酸氢钠测序法检测乳腺癌组织maspin启动子CpG岛的甲基化情况。结果:乳腺癌组织中的Maspin蛋白表达明显低于癌近旁组织(P<0.05)和癌远旁组织(P<0.01),乳腺癌组织maspin基因启动子CpG岛甲基化率为98.72%。结论:乳腺癌的发生与maspin基因失活关系密切,启动子异常甲基化可能是maspin基因在乳腺癌中失活的重要途径。

maspin基因在涎腺肿瘤中的表达

目的探讨maspin基因在不同的涎腺肿瘤中的表达差异及其在鉴别诊断中的应用价值。方法应用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(SP)显色技术检测maspin基因在多形性腺瘤(PA)、腺样囊性癌(ACC)、黏液表皮样癌(MEC)和腺泡细胞癌(ACCa)中的表达。结果 maspin基因在4种涎腺肿瘤中均有表达,其中在PA中阳性表达率为92%,ACC中阳性表达率为36%,MEC中阳性表达率为45%,ACCa中阳性表达率为50%。maspin基因在PA中的阳性表达率显著高于ACC、MEC和ACCa,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 maspin基因表达与涎腺肿瘤的发生和发展有一定相关性,对涎腺肿瘤之间的鉴别诊断有一定参考意义。

Maspin基因甲基化对口腔黏膜鳞癌细胞的调控作用

目的:分析口腔黏膜鳞癌细胞增殖过程中Maspin基因甲基化的调控作用机制,为相关研究及临床治疗提供借鉴。方法:鳞状细胞癌HIOEC-B(a)P细胞系随机分为4组:5-氮-2-脱氧胞苷+曲古抑菌素A(ADC+TSA)阴性组、低(0.1μmol/L+0.05μmol/L)、中(1μmol/L+0.5μmol/L)和高剂量组(10μmol/L+5μmol/L)。以正常口腔黏膜上皮细胞作为对照组。实时定量PCR检测各组细胞Maspin基因的甲基化程度,MTT法检测各组细胞的增殖情况,4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色检测细胞凋亡。采用SPSS20.0软件包对数据进行单因素方差分析。结果:与对照组相比,癌细胞的Maspin基因甲基化程度显著增强(P<0.01),与阴性组相比,中剂量和高剂量组Maspin基因甲基化程度显著减弱(P<0.05,P<0.01),低、中、高剂量组的细胞增殖抑制率显著高于阴性组(P<0.05,P<0.01)。随着药物剂量的提高,细胞凋亡程度逐渐增加(P<0.05)。结论:Maspin基因甲基化可能参与口腔黏膜鳞癌细胞的增殖过程。

姜黄素上调前列腺癌细胞LNCaP中maspin基因的表达

目的研究姜黄素对前列腺癌细胞LNCaP凋亡的影响和对maspin基因表达的调控作用。方法利用不同浓度的姜黄素处理前列腺癌细胞LNCaP,MTT法和DNA电泳检测不同时相LNCaP细胞的活性和凋亡情况,RT-PCR和W estern b lotting检测转录水平和翻译水平maspin基因的表达情况。将包含maspin5′侧启动子区847 bp(-764^+83)DNA的荧光素酶表达载体pGL3-maspin瞬时转染LNCaP,姜黄素作用细胞48 h后,应用荧光素酶测定系统检测maspin启动子的表达活性作用。结果姜黄素抑制LNCaP细胞的生长活性,诱导LNCaP细胞的凋亡,增强LNCaP细胞中maspin基因的表达。结论姜黄素增强LNCaP细胞中maspin基因的表达是通过促进启动子的转录活性起作用的。

Maspin基因在乳腺癌中的研究进展

Maspin（Mammary serine protease inhibitor）基因是Zon等在1994年用消减杂交技术（Subtractive hybridization）对正常乳腺组织及乳腺癌组织进行比较时发现的。近年的研究发现，Maspin基因具有调节细胞浸润、增加细胞黏附力、降低细胞运动能力的功能，而且能够抑制肿瘤细胞生长，诱导其凋亡，抑制肿瘤新生血管生成等，是具有抑癌基因性质的丝氨酸蛋白酶抑制剂编码基因。

Maspin基因与肿瘤关系的研究进展

本文通过对Maspin基因在肿瘤方面的研究现状及其与相关基因关系的综述,为恶性肿瘤的诊断和治疗提供一种新的有效的途径。Maspin基因对肿瘤细胞的抑制作用表现在:(1)诱导细胞凋亡;(2)抑制肿瘤新生血管的生成;(3)抑制肿瘤细胞的侵袭与转移。但是肿瘤的发生与演变是多基因突变的结果,因此Maspin基因发挥抑制肿瘤的作用同样需要多个基因的协作。

RNA干扰maspin基因对胃癌细胞株MKN-28凋亡的影响

目的:探讨转染maspin特异性短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)重组质粒对胃癌细胞株MKN-28凋亡的影响。方法:设计并合成针对maspin基因的shRNA,并将其与真核表达载体pGenesil-1.1连接,构建重组质粒pGenesil-maspin。应用RT-PCR和Western印迹法检测转染重组质粒后MKN-28细胞中maspin、bcl-2和bax mRNA及蛋白的表达变化,应用FCM法检测转染重组质粒对MKN-28细胞的细胞周期和细胞凋亡的影响。结果:成功构建maspin特异性shRNA重组质粒pGenesil-maspin1、pGenesil-maspin2及pGenesil-HK(阴性对照);pGenesil-maspin成功转染后可明显下调胃癌细胞MKN-28中maspin和bax mRNA及蛋白的表达水平(P<0.01),并上调bcl-2 mRNA和蛋白的表达水平(P<0.01);重组质粒转染后,MKN-28细胞的细胞周期呈现G0/G1期细胞减少(P<0.01),细胞凋亡率下降(P<0.01)。结论:外源性maspin shRNA转染MKN-28细胞后能下调maspin的表达,抑制胃癌细胞的凋亡,且使细胞周期分布发生改变;其分子机制可能与上调bcl-2和下调bax的表达有关。

宫颈鳞状细胞癌中maspin基因的表达及其意义

目的探讨maspin在宫颈鳞状细胞癌中的表达及其意义。方法采用免疫组化染色技术检测10例正常宫颈、16例宫颈息肉、13例宫颈糜烂及58例宫颈癌标本中maspin蛋白表达。结果maspin蛋白在10例正常宫颈中表达,在宫颈息肉和宫颈糜烂中高表达(81.25%,84.61%),正常宫颈、宫颈息肉和宫颈糜烂三者无显著性差异(P>0.05),而在宫颈癌组织中maspin蛋白表达下调(36.21%,P<0.01)。在宫颈癌组中,FIGO分期Ⅰ、Ⅱ期组maspin蛋白表达率高于Ⅲ、Ⅳ期组(P<0.05),伴宫颈旁淋巴结转移组maspin蛋白表达率低于无淋巴结转移组(P<0.05)。结论maspin对宫颈癌的发生、发展可能有一定的抑制作用。

Maspin基因甲基化水平检测诊断爱德华兹综合征的价值分析

目的：探讨母体血浆中Maspin基因作为DNA遗传标记物，筛查胎儿爱德华兹综合症的临床价值。方法：收集孕早、中、晚期孕妇及非孕妇女血浆各15名，提取游离DNA，以甲基化特异性PCIK检测各组血浆游离DNA中Maspin基因的甲基化水平；收集引产术胎盘组织及孕妇外周血单核细胞各15例，检测Maspin基因甲基化水平；收集确诊爱德华兹综合症胎儿的孕妇血浆34例及正常孕妇外周血浆45例，检测并对比Maspin甲基化水平。结果：与未孕组相比，孕早期、孕中期、孕晚期组MASPIN基因甲基化水平显著增高，差异具有显著统计学意义（P〈0．01）。在正常产妇中，胎盘组织中MASPIN甲基化水平（15／15）显著高于血单核细胞中MASPIN甲基化水平（0／15）（P〈0．01）。与正常产妇相比，爱德华兹综合征胎儿母体血浆中的MASPIN基因甲基化率只有14．71％（5／34），而正常胎儿的孕妇血浆的甲基化率达到了88．9％，差异具有显著统计学意义（P〈0．01）。结论Maspin基因甲基化水平在爱德华兹综合征胎儿母体外周血中的差异，在非创伤性产前诊断爱德华兹综合征中有一定临床价值，能够为爱德华兹综合征的无创产前诊断提供新方向。