改良凝集试验(MAT)检测动物弓形虫血清抗体

改良凝集试验(Modified agglutination test,MAT)由Dubey J P等于1978年建立,可应用于弓形虫IgG抗体滴度测定,目前在欧洲和美国该方法仍被广泛用于弓形虫病的诊断。本文在Dubey所建方法的基础上,用福尔马林固定抗原,用2-巯基乙醇处理待检血清,用该方法对临床193份犬血清、56份猫血清、80份猪血清进行弓形虫IgG抗体的检测,并将结果与ELISA、IHA检测结果比较,发现符合率较高。与156份其他病原的阳性血清无交叉反应,重复性好,适合于对初筛样本以及临床上疑似弓形虫感染个体的筛查,但该法费时、费力,不宜在基层推广使用。

钩端螺旋体EMJH培养基实验室应用

目的探索柯氏培养基和EMJH培养基在培养钩端螺旋体菌的差异及在钩体病防治上应用价值。方法观察2种培养基在15群15型钩体培养菌培养过程形态、数量、自凝现象等差异,并对健康人临床疑似钩体病人和暴发流行钩体病人血清进行MAT试验抗体检测。结果EMJH培养基接种钩体后第2 d就大量生长繁殖,而柯氏培养基1周后才达繁殖高峰,钩体MAT试验也显示EMJH培养基培养的钩体菌敏感性较柯氏培养基培养菌高。结论EMJH培养基可用于快速分离钩体,有利于早期确定钩体病的流行和实验室研究。

江西宜春 猪钩端螺旋体病的血清学调查

对江西省宜春?的猪钩端螺旋体病的流行情况进行了血清学调查。结果表明:宜春?的猪钩端螺旋体的感染率达27.1%,主要感染菌群为明尼、拜伦、秋季、澳洲、波摩那群。

改良凝集试验(MAT)检测鸡弓形虫血清抗体

本研究是在Dubey J P所建改良凝集试验基础上,采用小鼠肉瘤S180细胞培养弓形虫速殖子,甲醛固定抗原后悬浮于碱性缓冲液,用2-巯基乙醇处理待测血清,用该法对610份鸡血清进行弓形虫抗体检测,并用间接血凝试验(IHA)作对照。结果显示,MAT、IHA对鸡血清的弓形虫抗体检测阳性率分别为9.02%(55/610)、1.64%(10/610),二者差异极显著(P<0.01)。MAT对鸡的弓形虫抗体检测结果,鸡血清阳性率为9.02%(55/610),其中散养鸡阳性率为18.75%(30/160),笼养鸡阳性率为5.56%(25/450),二者差异极显著(P<0.01);蛋鸡和种鸡阳性率分别为7.89%(15/190)和8.00%(8/100)、肉鸡阳性率1.25%(2/160),与肉鸡相比差异显著(P<0.05)。

改良凝集试验(MAT)与间接血凝试验(IHA)对动物血清中弓形虫抗体检测效果的比较

为了比较改良凝集试验(MAT)与间接血凝试验(IHA)两种检测方法检测动物血清中弓形虫抗体的效果,对采自辽宁省不同地区不同动物的3 789份血清进行检测,经MAT法初筛后选取每种动物阴、阳性血清各10份,共计120份,再进行IHA法检测,并对MAT法和IHA法的检测效果进行比较分析。结果表明:MAT法作为血清中弓形虫抗体检测的金标准,其操作简单、所需试剂廉价,且判定标准明确,敏感性、特异性和准确性都优于IHA法。说明MAT法更适用于大规模流行病学调查和临床诊断。

改良凝集试验(MAT)对犬弓形虫的流行病学调查

为调查湖北省、山东省、江苏省、湖南省犬弓形虫感染情况,利用改良凝集试验检测犬血清弓形虫抗体,采用小鼠肉瘤S180细胞培养弓形虫速殖子,甲醛固定抗原后悬浮于碱性缓冲液中,用2-巯基乙醇处理待测血清。对采自湖北、山东、江苏、湖南四省的925份犬血清进行弓形虫抗体检测。结果表明:犬血清弓形虫抗体平均阳性率为8.2%(76/925),湖北省、山东省、江苏省、湖南省犬弓形虫抗体阳性率分别为20.0%(40/200)、13.5%(27/200)、2.0%(4/200)、1.5%(5/325)。湖北省最高,与山东省相比差异显著(P<0.05),与其他两省相比差异极显著(P<0.01);公犬阳性率为8.0%(36/451),母犬阳性率为8.4%(40/474),二者差异不显著(P>0.05)。

评价基于致密颗粒蛋白GRA1为抗原检测猫弓形虫感染的血清学诊断方法

为了研究以弓形虫致密颗粒蛋白GRA1为抗原检测猫弓形虫感染的血清学诊断及评价,试验采用标准弓形虫抗体阳性、阴性猫血清建立ELISA方法,最终确定重组GRA1最佳蛋白包被浓度为5μg/m L、血清最佳稀释度为1∶64,用此方法对已通过MAT/IFA法共同确定的185份猫弓形虫抗体血清进行检测并评价。结果表明:应用MAT/IFA法检出阳性血清39份、阴性血清146份,而通过重组GRA1-ELISA法检出阳性血清37份、阴性血清148份,二者共同检出阳性血清33份、阴性血清142份,GRA1假阳性率为10.8%,假阴性率为4.1%。比较重组GRA1-ELISA与MAT/IFA的结果,二者不一致部分无显著性差异(P>0.05);一致性部分经Kappa检验(K=0.83),一致率为94.6%。说明以重组GRA1作为包被抗原建立的ELISA方法检测效果没有弓形虫体裂解蛋白TLA好。因此,重组GRA1不是用于检测猫弓形虫感染的流行病学调查的最佳诊断抗原。

一起钩端螺旋体病暴发的流行病学调查

[目的]了解驻闽某部一起钩端螺旋体病(钩体病)暴发流行概况。[方法]用现场流行病学调查方法和血清学检测,对下田作业的47名战士进行检查及检验;用显微镜凝集试验(MAT)检测抗体。[结果]47名战士中先后患病29例(61.7%),患者秋季热群抗体阳性率86.3%(23/29)。该部还有353名官兵虽与患病战士同食堂就餐,但未下田故均无发病。[结论]这是一起驻闽部队钩体病暴发流行,今后应加强监测和防治。