CircRNA-MBOAT2通过调控MAPK/ERK通路对肺腺癌增殖和凋亡的影响

目的探讨环状RNAMBOAT2(circ-MBOAT2)对肺腺癌增殖和凋亡的影响及其潜在的作用机制。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)实验检测circ-MBOAT2在不同肺腺癌细胞系中的表达,随后将NCsiRNA、MBOAT2-siRNA分别转染至肺腺癌细胞中,RT-qPCR检测转染效率;MTT实验检测肺腺癌细胞增殖能力;流式细胞术检测肺腺癌细胞凋亡率;Western blot检测肺腺癌细胞中凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2以及MAPK/ERK通路蛋白MEK和ERK的表达。结果与人正常肺上皮细胞系BEAS-2B组比较,circ-MBOAT2在肺腺癌细胞系中表达升高,且在A549和H125细胞中表达水平最高(P<0.05)。转染MBOAT2-siRNA后,A549和H125细胞中circ-MBOAT2的表达降低,A549和H125细胞增殖能力降低,细胞凋亡率升高,Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低,p-MEK和p-ERK蛋白表达降低(P<0.05)。结论敲低circ-MBOAT2可通过调控MAPK/ERK信号通路抑制肺腺癌细胞增殖,促进细胞凋亡。

缺血性脑卒中缺氧免疫关键基因的鉴别及诊断价值分析

目的:研究缺血性脑卒中(IS)缺氧免疫机制的相关差异表达基因和调控信号通路,以识别IS潜在诊断生物标志物。方法:从GEO数据库下载IS表达谱数据集GSE58294,采用单样本GSEA(ssGSEA)和t分布随机邻域嵌入算法(t-SNE)评估受试者的缺氧和免疫状态,使用“limma”软件包筛选差异基因(DEGs),通过DAVID在线数据库对DEGs进行基因本体(GO)富集分析及京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路分析,LASSO筛选与IS关键(hub)基因,然后运用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)验证hub基因的差异性表达。结果:筛选出60个IS缺氧免疫DEGs,KEGG结果显示IS缺氧免疫DEGs富集在PI3K-Akt通路,LASSO筛出6个关键基因:CHPF2、MBOAT2、IL18RAP、TIMM8A、ALDOAP2、LPAR4。CHPF2、MBOAT2和IL18RAP为上调基因(均P<0.001),而TIMM8A、ALDOAP2和LPAR4为下调基因(均P<0.001),ROC曲线显示该6个关键基因的AUC为0.8941~0.9943。RT-qPCR结果显示,短暂性大脑中动脉闭塞(tMCAO)小鼠中MBOAT2和IL18RAP的表达显著高于假手术小鼠(均P<0.001)。结论:IL18RAP和MBOAT2可能为IS缺氧免疫相关的DEGs,并可作为IS的潜在诊断生物标志物。