NGF对坐骨神经损伤后腰髓与损伤神经MBP含量变化的影响

目的 探讨大鼠周围神经损伤后相应神经与脊髓组织髓鞘碱性蛋白 (Myelinbasicprotein ,MBP)含量变化及神经生长因子 (NGF)的影响。方法 Wistar大鼠行单侧坐骨神经切断 ,断端采用硅胶管桥接 ,管内注入NGF ,应用酶联免疫吸附法测定腰段脊髓和损伤坐骨神经组织MBP含量的变化 ,实验分为Ⅰ组 :生理盐水对照 ;Ⅱ组 :硅胶管内给NGF ;Ⅲ组 :硅胶管内给NGF +每日肌肉注射NGF(5 0 0ng/kg连续 2周 )。结果 治疗组之间比较无统计学意义 ;治疗组与对照组相比较有非常显著性差异 (P <0 0 1) ;治疗组2 4h、2周时MBP含量较伤前显著升高 (P <0 0 1) ,4周恢复到伤前水平。结论 NGF治疗能减少MBP含量 。

S-100B,NSE和MBP评估重型颅脑损伤预后的研究

目的研究重型颅脑损伤后血清S-100B蛋白、神经特异性烯醇化酶(NSE)和碱性髓鞘蛋白(MBP)浓度在预后评估中的价值。方法对2002年1月至2002年12月40例重型颅脑损伤住院病人在伤后12h内进行血清S-100B、NSE和MBP浓度检测,并结合GOS评分进行比较分析。结果本组40例重型颅脑损伤病人伤后血清S-100B、NSE和MBP浓度均显著高于正常对照组,不同预后组之间S-100B、NSE和MBP浓度存在显著差异。分别以伤后12h血清S-100B浓度2.0μg/L、NSE浓度30ng/ml和MBP浓度10ng/ml为分界标准评估预后,S-100B评估预后的特异度为91%,敏感度72%;NSE特异度为77%,敏感度67%;MBP特异度为63%,敏感度61%。结论伤后血清S-100B蛋白、NSE和MBP浓度对评估重型颅脑损伤预后具有较高的特异性和敏感性。而S-100B浓度在预后评估中的作用较NSE和MBP更为敏感,特异,因此可作为评估重型颅脑损伤预后的一种可靠的临床指标。

氟中毒大鼠脑组织MBP、NSE、氟含量及CHE活性分析

目的 探讨氟中毒对脑髓鞘、神经元、神经递质的损伤 ,研究氟中毒对脑功能的损伤机理。方法 采用动物实验 ,用含氟 (F- ) 15 0 mg/ L 的水饲养 Wistar大鼠 7个月 ,断头取脑 ,用 4℃生理盐水迅速制成 1∶ 5匀浆液 ,离心取上清液。用酶联免疫吸附测定法 (EL ISA)检测髓鞘碱性蛋白 (MBP)和神经元特异性烯醇化酶 (NSE)含量 ;用自动生化分析仪检测胆碱脂酶 (CHE)活性 ,用氟离子选择电极法检测 F-含量。结果 氟中毒大鼠脑组织匀浆上清液 MBP、NSE含量显著低于对照组 ,CHE活性和 F- 含量显著高于对照组。结论 氟可直接损伤脑神经髓鞘、神经元和中枢神经递质。这一系列变化均可能影响脑功能。

体外培养条件下钾离子对少突胶质细胞表达MBP的影响

应用体外培养、免疫细胞化学和计算机辅助图象分析方法研究了少突胶质细胞表达髓鞘碱性蛋白及高钾离子（３０ｍｍｏｌ／Ｌ）对少突胶质细胞表达髓鞘碱性蛋白的影响。结果表明，体外培养条件下，少突胶质细胞最早表达髓鞘碱性蛋白是在培养第７天。髓鞘碱性蛋白阳性的少突胶质细胞可分为大、中、小和双核四种类型，它们的构成比随培养时间延长呈动态变化。高Ｋ＋不影响少突胶质细胞表达髓鞘碱性蛋白。实验结果提示，体外培养条件下，少突胶质细胞仍能正常表达髓鞘碱性蛋白，且表达时程并不依赖神经元的存在；细胞外Ｋ＋浓度升高对髓鞘碱性蛋白在少突胶质细胞内的正常合成及表达过程无明显影响。本文对少突胶质细胞表达髓鞘碱性蛋白后的体积变化与其与中枢神经系统髓鞘形成的关系进行了讨论。

21.5kD MBP RNAi有效靶点的筛选及验证

目的:构建21.5 kD MBP基因干扰序列21.5 kD MBP-shRNA(21.5 kD MBP short hairpin RNA interference),筛选最佳沉默效果的21.5 kD MBP-shRNA真核表达载体,为21.5 kD MBP基因功能研究提供实验材料。方法:将21.5 kD MBP-shRNA阳性真核表达载体和阴性真核表达载体经脂质体介导分别转入人神经胶质瘤细胞株U251中,观察转染24 h后的转染效率;提取各组细胞总RNA,用实时荧光定量PCR技术检测各组21.5 kD MBP基因在mRNA水平的表达差异性。结果:21.5kD MBP-shRNA真核表达重组载体被成功转染入U251细胞,与阴性对照质粒(pGenesil-1-MBP-neg)转染组相比,沉默质粒转染组(pGenesil-1-MBP-1、pGenesil-1-MBP-2、pGenesil-1-MBP-3质粒分别转染)细胞中21.5 kD MBP mRNA表过水平均显著下降(P<0.05),其中pGenesil-1-MBP-3转染组细胞中21.5 kD MBP mRNA表达水平最低。结论:成功筛选出最佳沉默效果的21.5 kD MBP-shRNA真核表达载体,为21.5 kD MBP基因功能研究及基因治疗研究奠定了实验基础。

缺氧缺血性脑病新生儿脐血及其出生后NSE、MBP的检测意义

目的探讨血清神经元特异性烯醇化酶(Neuron specific enolase,NSE)与髓鞘碱蛋白(Myelin base protein,MBP)的水平变化在新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)中的意义。方法选择足月HIE患儿60例为实验组,20例健康新生儿作为正常对照组,测定脐血及生后1d、3d患儿的血清NSE、MBP浓度。结果①轻度HIE组脐血血清NSE与对照组比较差异无统计学意义(t=0.67,P>0.05);中度组和重度组脐血血清NSE与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。轻、中、重度HIE组生后1d、3d内血清NSE与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。轻、中、重度HIE组之间,脐血及1d、3d内血清NSE比较差异无统计学意义(P<0.01)。②轻度HIE组脐血及生后1d、3d血清MBP与对照组比较,差异无统计学意义(t=0.51,P>0.05);中度HIE组脐血血清MBP与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);中度HIE组生后1d、3d血清MBP与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);重度HIE组脐血及1d、3d内血清MBP与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);轻、中、重度HIE组之间,脐血及1d、3d内血清MBP比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论检测新生儿脐血及生后血清中NSE、MBP水平来反映早期新生儿脑损伤的情况。NSE敏感性较MBP高。对宫内窘迫、新生儿窒息新生儿测定脐血血清NSE浓度,结合临床可早期诊断HIE。

高压氧治疗新生儿缺氧缺血性脑病血清NSE、MBP的变化

目的探讨高压氧治疗对HIE患儿NSE、MBP水平变化的影响。方法HIE患儿86例,随机分为高压氧组43例和常规治疗(对照组)43例,同时又选同期出生的正常新生儿30例为正常对照组(正常组)。在治疗前后分别用酶联免疫分析法检测血清NSE、MBP水平。结果高压氧组及对照组患儿NSE、MBP水平明显高于正常组;治疗后高压氧组NSE、MBP水平显著低于对照组。结论SE及MBP水平是反映脑组织损伤的较好的生化指标,临床上早期用高压氧治疗中、重度HIE有较好的疗效。

吉兰-巴雷综合征患者脑脊液中S-100b、MBP的检测及意义

目的研究吉兰-巴雷综合征(green-barre syndrome,GBS)患者脑脊液中S-100b和髓鞘碱性蛋白(MBP)的含量变化,探讨S-100b及MBP在GBS发病过程中的作用以及与病情严重程度的关系。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定32例不同临床分级的GBS患者(GBS组),30例其他神经系统疾病(OND组)和29例正常健康者对照(NC组)脑脊液中S-100b和MBP的含量,并进行比较。结果 GBS组患者脑脊液中S-100b和MBP的含量与病情程度呈正比关系(P<0.05),GBS组脑脊液中S-100b和MBP的含量均高于OND组、NC组(P<0.05),OND组与NC组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 S-100b,MBP含量在GBS患者脑脊液中明显升高,病情越重,含量越高。S-100b在GBS病程中促进炎症发展,MBP反应髓鞘损伤程度,二者在其发病机制中起重要作用。

β淀粉样肽引起的大鼠脑神经髓鞘结构与MBP变化及金思维的影响

目的观察β淀粉样肽(Aβ)引起的大鼠脑有髓神经髓鞘结构与髓鞘碱性蛋白(MBP)改变,及金思维对其的影响。方法采用Aβ1-42海马注射复制痴呆模型。电镜观察有髓神经髓鞘的结构;免疫组化方法显示MBP在海马区的分布和含量。结果电镜显示模型组大鼠海马区神经髓鞘结构松解紊乱和均质化,可见缺失;金思维组结构完整,板层连续,与正常组相似。MBP免疫组化显示模型组大鼠海马区髓鞘着色明显低于正常组,分支短少而不连续;金思维组髓鞘着色较浅,但数目较多而长。模型组大鼠的MBP阳性突起数、平均面积和平均光密度与正常组和金思维组均有非常显著性差异(P<0.01)。结论Aβ海马注射可造成大鼠脑有髓神经髓鞘损伤,MBP缺失,髓鞘结构破坏;金思维对上述变化有一定改善作用。

高压氧治疗急性脑梗死患者血清NSE，S-100B蛋白，MBP浓度变化及意义

目的探讨急性脑梗死患者（ACI）在常规临床治疗的同时，结合高压氧治疗，血清神经元特异性烯醇化酶（NSE），S-100B蛋白及血清髓鞘碱性蛋白（MBP）的变化及临床意义。方法72例确诊为急性脑梗死患者（ACI组）随机分为高压氧治疗组（HBO组）、常规治疗组（对照组）各36例，两组患者均在发病入院24h，3，5，7，14d时采集静脉血，40例健康对照均选用体检中心健康人群（健康对照组）。测定血清NSE，S-100B蛋白及MBP浓度。结果ACI组患者血清NSE，S-100B蛋白及MBP浓度显著高于健康对照组，经高压氧治疗后其浓度逐渐下降，比单纯常规临床用药治疗组有明显改善。结论S-100B蛋白，NSE及MBP联合检测为判断中枢神经系统受损程度提供了定量信息．临床上早期结合高压氧治疗对ACI患者的康复与愈后有较好的疗效。

犬脊柱适形调强放疗后MBP的动态变化及意义

目的:研究犬脊柱三维适形调强放疗后脊髓损伤的程度以及血清髓鞘碱性蛋白(MBP)的动态变化和意义。方法:选用雄性比格犬10只随机分成3组,A组(4只,每只放射总剂量均为70 GR),B组(4只,每只放射总剂量均为50 GR),C组2只为正常对照组。对比格犬胸9、胸10椎体进行适型调强放疗,分别于放疗前、放疗结束后第3天、第7天、第14天、第21天、第28天、第3个月抽取静脉血4 m1,用酶联免疫吸附定量测定法(ELISA法)测定MBP浓度值。结果:本研究通过对比格犬胸9、胸10椎体适形调强放疗后用ELISA法测定MBP浓度值的动态变化,结果发现:实验各组在放疗前血清MBP浓度值非常低,可以看作为正常临界值,实验各组放疗前到放疗结束后3 d务血清MBP浓度值均有明显增高,从放疗结束后第3天到3个月血清MBP浓度值实验各组均有所下降,但仍明显高于放疗前血清MBP浓度值。放疗前A组与B组间血清MBP浓度值比较,无显著性差异(P>0.05)。放疗后各时间段A组血清MBP浓度值均高于B组,有显著性差异(P<0.01)。结论:本课题用血清髓鞘碱性蛋白(MBP)浓度来判定脊柱适形调强放疗后对脊髓损伤的程度,方法可靠,检测简单,能动态的、准确的反映放疗对脊髓损伤的程度。

高压氧联合川芎嗪对重度缺氧缺血性脑病NSE和MBP水平变化的调节

目的探讨高压氧联合川芎嗪对重度缺氧缺血性脑病(HIE)患儿神经元特异性烯醇化酶(NSE)和髓鞘碱性蛋白(MBP)水平变化的调节。方法HIE患儿90例,随机分为川芎嗪治疗组(30例)、高压氧和川芎嗪联合治疗组(30例)和常规治疗组(30例),同时以30名正常新生儿组作对照。在治疗前后分别用酶联免疫分析法检测血清NSE、MBP水平。结果3组重度缺氧缺血性脑病患儿NSE、MBP水平明显高于正常对照组(P<0.05);常规治疗组患儿NSE、MBP水平明显高于川芎嗪治疗组和联合治疗组(P<0.05);联合治疗组NSE、MBP水平显著低于川芎嗪治疗组(P<0.05)。结论NSE及MBP水平是反映脑组织损伤和修复的生化指标,临床上早期用高压氧联合川芎嗪治疗重度HIE有较好的疗效。

血清MBP、EPOR联合头颅超声在足月新生儿窒息后脑损伤中的诊断意义

目的:探讨血清髓鞘碱性蛋白(myelin base protein,MBP)、促红细胞生成素受体(erythropoietin receptor,EPOR)联合头颅超声在新生儿窒息后脑损伤早期诊断中的意义。方法:选择内蒙古自治区妇幼保健院新生儿科收治的足月窒息新生儿,按照Apgar评分分为轻度窒息组与重度窒息组,同期该院产科分娩的正常足月新生儿作为对照组。分别比较各组新生儿血清MBP、EPOR含量及脑室内出血率、脑水肿发生率的差异。结果:窒息组血清MBP、EPOR水平及脑室内出血率均高于对照组,重度窒息组的头颅超声脑水肿检出率均显著高于对照组和轻度窒息组,差异均有统计学意义,轻度窒息组与重度窒息组之间差异无统计学意义。头颅超声异常新生儿血清MBP、EPOR水平均高于头颅超声正常者。结论:血清MBP及EPOR检测联合头颅超声检查可以为新生儿窒息后脑损伤早期诊断提供依据。

心脑血管疾病血清MBP、sIL-2R及TNF检测的临床意义

应用国产髓鞘碱性蛋白（MyelinBasicProtein，MBP）ELISA检测药盒，测定了32例不同年龄组心、脑血管疾病患者血清中MBP水平，发现除脑梗塞、中风患者血清MBP水平较其他疾病患者升高外（P＜0．05），60岁以上的老人血清中亦有较高水平的MBP。通过同时检测血清TNF、sIL－2R水平还显示，血清MBP含量的增加多伴有不同程度TNF活性的增强而sIL－2R含量在心、脑血管两类疾病之间并无差异。比较同类疾病不同年龄组血泊中TNF和sIL－2R水平表明，TNF有随年龄的增长而下降的趋势，但SIL-2R则与之相反。实验结果提示，MBP作为神经纤维绝缘组织成分较多地进入血液，一方面表明血脑屏障的通透性发生了改变，同时也可作为机体的隐蔽抗原诱导自身免疫性炎症损伤。

S-100B、NSE和MBP对急性脑出血预后的临床评估

目的:研究脑出血后血清S-100B蛋白、神经特异性烯醇化酶(NSE)和碱性髓鞘蛋白 (MBP)浓度在预后评估中的价值。方法:对40例急性脑出血住院病人在病后72 h内进行血清S- 100B、NSE和MBP浓度检测,并结合格拉斯哥昏迷量表(GOS)评分进行比较分析。结果:本组40例病人脑出血后血清S-100B、NSE和MBP浓度均显著高于正常对照组,而且病人中不同预后组之间S- 100B、NSE和MBP浓度存在显著差异。分别以脑出血后72 h血清S-100B浓度2．0μg／L,NSE浓度 30μg／ml和MBP浓度10 μg／ml为临界标准评估顶后,S-100B的特异度为91％,敏感度为72％;NSE 特异度为77％,敏感度为67％;MBP特异度为63％,敏感度为61％。结论:脑出血后血清S-100B蛋白、NSE和MBP浓度对评估脑出血病人预后具有较高的特异性和敏感性。

体外培养中少突胶质细胞在立体网架上的迁移

应用聚酯纤维在培养基上形成的立体网架,接种生后7天大鼠视神经,然后对少突胶质细胞在三维空间的迁移进行体外培养观察。以抗髓鞘碱性蛋白抗体标记少突胶质细胞,并用扫描电镜和透射电镜对在聚酯纤维上迁移的少突胶质细胞超微结构进行了研究。结果表明,聚酯纤维能引导少突胶质细胞迁移;在其表面,少突胶质细胞的突起相互交错并将其包绕;有些突起已在其表面融合,形成“类膜”结构,有些部位可见有2～3层这样的膜性结构。免疫细胞化学染色结果表明,少突胶质细胞突起在聚酯纤维表面形成的“类膜”结构为髓鞘碱性蛋白阳性。以上结果提示,在体外培养条件下,聚酯纤维能引导少突胶质细胞迁移,在无神经元存在时,少突胶质细胞仍可形成髓鞘碱性蛋白阳性的膜性结构。本文对中枢神经系统髓鞘形成模式进行了讨论。

重型颅脑损伤患者血清和脑脊液髓鞘碱性蛋白变化及意义

探讨颅脑损伤患者血清和脑脊液（CSF）中髓鞘碱性蛋白（MBP）含量变化。方法采用酶联免疫吸附法测定了60例重型颅脑损伤患者的血清和CSF中MBP含量。结果患者血清和CSF中MBP含量均增高，其上升水平与脑损伤类型及程度有关。结论同步检测血清和CSF中MBP含量变化，对判断颅脑损伤的程度及类型有一定实用价值。

老年大鼠脑白质损害在学习记忆降低中的意义

目的探讨老化时轴突及髓鞘结构和成分变化在学习记忆功能改变中的意义。方法使用穿梭箱、电镜和免疫组织化学技术,观察老年大鼠学习、记忆维持功能、髓鞘和轴突的超微结构改变,以及髓鞘碱性蛋白表达变化。结果在训练第1天至第6天,老年大鼠主动逃避反应率(AAR)、总逃避反应率(GAR)较青年组显著减慢(P<0.01),逃避潜伏时(LER)较青年组延长(P<0.01),训练第6天GAR青年组达到89.0%,老年组为40.5%,LER青年组为3.16 s,老年组为6.10 s。在记忆功能维持上,训练后第5天和第10天,老年组大鼠AAR、GAR很快降低,LER明显升高(P<0.01)。老年大鼠髓鞘异常为轴突周围间隙扩大,髓鞘致密层分离,部分板层结构破坏,髓鞘内形成大泡,轴突直径增加,轴突内含有吞噬小泡、致密颗粒和巨大线粒体,少突胶质细胞电子密度增加。老年大鼠髓鞘碱性蛋白(MBP)表达下降。结论老年大鼠学习及记忆维持能力降低,老化可以导致轴突及髓鞘的结构变化,MBP表达降低,髓鞘结构和成分改变可能参与老化时学习和记忆损害。

不同穴位电针对大鼠脊髓损伤植入脐血干细胞后生长相关蛋白-43、髓磷脂碱性蛋白表达的影响

目的探讨不同电针对大鼠脊髓损伤植入脐血干细胞后生长相关蛋白(GAP)-43、髓磷脂碱性蛋白(MBP)表达的影响。方法将192只清洁级SD大鼠用NYU打击器采用Allen's法制成T10-11段脊髓损伤模型,造模成功后查随机表分为:①A组:运动区头皮表面投影区电刺激组,又分为A1组(电刺激+脐血干细胞移植)和A2组(只进行电刺激);②B组:损伤局部电刺激组,又分为B1组(电刺激+脐血干细胞移植)和B2组(只进行电刺激);③C组:运动区头皮表面投影区电刺激+局部电刺激组,又分为C1组(电刺激+脐血干细胞移植)和C2组(只进行电刺激);④D组:损伤模型组,以分为D1组(移植脐血干细胞不进行电刺激)和D2组(不移植不进行电刺激)。各组分别于1、2、3、4、8、12周时取材,采用生物素葡聚糖胺(BDA)皮质脊髓束顺行示踪,观察损伤区残存或再生的神经纤维的分布情况;通过免疫组织化学荧光染色检测GAP-43、MBP及MAB1281抗人核抗体的阳性表达。结果①NYU是一种用于Allen's法制备大鼠脊髓撞击损伤模型的撞击器,具有可使撞击势能量化的特点,获得的模型稳定、可重复性好、成功率高。②在本组研究各时间点上,电刺激对干细胞移植后微环境中GAP-43、MBP水平均有显著的正向干预作用,均较单纯电刺激有显著的正向协同干预作用,头针加体针的影响大于单纯头针或体针。③在本组研究各时间点上,电刺激对损伤后GAP-43、MBP水平均有显著的正向干预作用,不依赖于是否进行干细胞移植。结论①干细胞移植后,微环境的变化朝有利于神经功能恢复方向发展,说明干细胞移植能促进神经功能恢复以及本研究中干细胞移植成功。②电刺激对干细胞移植后微环境中GAP-43、MBP有显著的正向干预作用;头针加体针的影响优于单纯头针或体针;电刺激对损伤后微环境显著正向干预作用是独立的,不依赖于是否进行干细胞移植;电刺激与干细胞移植对微环境影响有显著的协同作用。

苯及其同系物接触者血清神经特异性烯化酶及碱性蛋白水平变化

目的探讨苯及其同系物职业接触者血清神经特异性烯化酶(NSE)及髓鞘碱性蛋白(MBP)水平变化。方法采用酶联免疫吸附分析方法,对33例苯及同系物职业危害接触者(其中男性24例,女性9例)和26例正常对照者(其中男9例,女17例)进行血清NSE和MBP的测定。结果接触组血清NSE和MBP水平分别是(13.62±8.76)μg/L、(2.11±0.96)μg/L,显著高于对照组[NSE(8.86±4.49)μg/L、MBP(1.82±0.82)μg/L,P<0.05];接触组和对照组血清NSE异常水平总体概率分布分别为81.8%、15.4%,差异有显著性(P<0.05)。结论苯及同系物接触者血清NSE水平明显升高。