姜黄素衍生物T63提高MCF-7/DOX细胞株对多柔比星敏感性的研究

目的:以人乳腺癌细胞MCF-7和耐多柔比星(doxorubicin,DOX)的人乳腺癌细胞MCF-7/DOX为研究对象,观察新型多芳烯姜黄素衍生物T63对这两株细胞系的影响,探讨T63能否逆转MCF-7/DOX细胞对多柔比星(DOX)的耐药性。方法:用MTT法检测T63的细胞毒性,同时检测T63对细胞株MCF-7/DOX药物敏感性的影响。用流式细胞术PI单染法分析T63或T63联合DOX对细胞周期的影响,观察细胞凋亡情况。用Western blot检测细胞凋亡相关蛋白表达。用Real-time PCR法检测相关基因的转录情况。结果:T63能够有效抑制MCF-7和MCF-7/DOX的增殖,且药效强于姜黄素,而T63对MCF-7和MCF-7/DOX的抑制增殖的效应差异不大。使用非细胞毒性剂量(0.75μmol/L)的T63能有效提高MCF-7/DOX对多柔比星的敏感性。PI单染法显示单独使用T63或者非细胞毒性剂量T63与多柔比星联合使用均能促进细胞凋亡。Western blot结果显示T63能够上调p53、p21、p27、Bim、Bax的表达,下调Bcl-2的表达。Real-time PCR结果表明T63对p53无显著影响。结论:T63可通过促进细胞凋亡的方式逆转MCF-7/DOX对多柔比星的耐药性,从而提示其可能具有临床应用价值,其具体分子机制有待进一步研究。

姜黄素对乳腺癌MCF-7与MCF-7/DOX细胞中P-糖蛋白表达的影响及其机制研究

目的:研究姜黄素对人乳腺癌MCF-7与MCF-7/DOX细胞中P-糖蛋白表达的影响及其作用机制。方法:MTS比色法检测姜黄素对MCF-7与MCF-7/DOX细胞多柔比星敏感性的影响;实时定量PCR与Western Blot方法检测姜黄素处理后,MCF-7与MCF-7/DOX细胞中P-糖蛋白在mRNA与蛋白质水平的表达变化;流式荧光法检测姜黄素对MCF-7与MCF-7/DOX细胞中多柔比星药物浓度的影响;亚硫酸氢盐处理后测序(bisulfite sequencing PCR,BSP)法检测姜黄素处理前后MCF-7与MCF-7/DOX细胞中P-糖蛋白编码基因多药耐药基因1(multidrug resistance protein1,MDR1)启动子区甲基化状态的改变。结果:与对照组相比,姜黄素处理后,MCF-7和MCF-7/DOX细胞多柔比星IC50值显著下降(P<0.05);姜黄素处理后,MCF-7和MCF-7/DOX细胞中的P-糖蛋白在mRNA及蛋白质水平的表达均有显著上调(P<0.05),而细胞内多柔比星的药物浓度下降;MCF-7和MCF-7/DOX细胞中MDR1基因启动子区域的甲基化程度在姜黄素处理后明显降低(P<0.05)。结论:姜黄素可增强乳腺癌MCF-7与MCF-7/DOX细胞多柔比星敏感性,但同时可显著诱导P-糖蛋白表达水平增高,从而降低细胞内多柔比星药物浓度,此作用与其对MDR1基因去甲基化功能密切相关。

β-榄香烯乳剂逆转多药耐药细胞株MCF-7/ADM对阿霉素耐药性研究

目的 :测定中药 β-榄香烯乳剂对 MCF- 7/ ADM细胞的无毒剂量 ,并检测此无毒剂量是否有逆转 MCF- 7/ ADM细胞对化疗药物阿霉素 (ADM)的多药耐药 (multidrug resistance,MDR)性。方法 :采用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)法测定药物的细胞毒性及耐药细胞逆转倍数 ;荧光分光光度法测定细胞内药物浓度。结果 :无毒剂量的 β-榄香烯乳剂 (6 μg/ m l)能显著降低化疗药物 ADM对乳腺癌耐药细胞株 MCF- 7/ ADM细胞的 IC50 ,明显增加耐药细胞内药物浓度。结论 :初步研究表明β-榄香烯乳剂具有逆转 MCF- 7/ ADM细胞 MDR的作用。

血管内皮生长因子C在人乳腺癌细胞株MCF-7及MCF-7/Adr中的表达

背景与目的:血管内皮生长因子C(vascularendothelialgrowthfactorC,VEGF-C)是近期发现的血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)家族的新成员。研究发现VEGF-C可特异性作用于淋巴管内皮细胞,并在多种人类肿瘤中表达。为探索VEGF-C在肿瘤发生、发展中的作用,我们分别检测了VEGF-CmRNA和蛋白在人乳腺癌细胞株MCF-7及其耐药株MCF-7/Adr中的表达。方法:根据VEGF-C基因序列,设计合成地高辛标记的特异性寡核苷酸探针,运用原位杂交方法检测培养的细胞株MCF-7和MCF-7/Adr中VEGF-CmRNA的表达,并运用免疫组织化学方法检测两种细胞中VEGF-C蛋白的表达,实验中用缓冲液分别代替杂交液和一抗作阴性对照。结果:原位杂交法检测到MCF-7和MCF-7/Adr细胞的胞浆中有阳性蓝色颗粒,免疫组化检测发现两种细胞的胞浆中均有阳性棕黄色颗粒,而阴性对照细胞的胞浆中则均无阳性颗粒。结论:人乳腺癌细胞株MCF-7及其耐药株MCF-7/Adr细胞能够转录VEGF-CmRNA,并在其细胞浆中翻译合成相应的蛋白。

鱼藤素对乳腺癌细胞株MCF-7增殖和凋亡及PI3K/Akt信号通路的影响

目的:观察鱼藤素对MCF-7细胞株细胞增殖和凋亡及磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt)信号通路的影响,旨在研究其抗肿瘤机制。方法:细胞计数试剂盒8(cell counting kit-8,CCK8)检测0、1、5、10、15和20μmol/L鱼藤素作用6、24、48和72h后对MCF-7细胞增殖的影响,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶双染法检测细胞凋亡率,透射电子显微镜观察细胞凋亡形态,蛋白质印迹法检测细胞内PI3K/Akt通路相关分子的蛋白表达。结果:5、10、15和20μmol/L鱼藤素作用6、24、48和72h后能明显抑制MCF-7细胞增殖(P<0.01),抑制率随着浓度升高和时间延长而增加,各组间两两比较差异有统计学意义(P<0.05);而1μmol/L鱼藤素作用6、24、48和72h后对MCF-7细胞的增殖无明显影响(P>0.05)。5、10、15和20μmol/L鱼藤素作用6h后能诱导MCF-7细胞凋亡,透射电子显微镜下可观察到典型的凋亡细胞形态,而相同条件下1μmol/L鱼藤素对MCF-7细胞的凋亡诱导作用不明显。5μmol/L鱼藤素作用6h后,MCF-7细胞内磷酸化Akt(p-Akt)(Thr308)、磷酸化糖原合成酶激酶-3β(phosphorylated glycogen synthase kinase-3β,p-GSK-3β)(Ser9)、磷酸化磷酸肌醇依赖性激酶1(phosphorylated 3-phosphoinositide-dependent protein kinase1,p-PDK1)(Ser241)和磷酸化人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因编码的蛋白(phosphorylated phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome10,p-PTEN)(Ser380)的表达量明显减少,而总Akt蛋白的表达量则无明显变化;1μmol/L鱼藤素作用6h后,细胞内上述所有蛋白的表达量均无明显变化。结论:鱼藤素可能通过抑制PTEN(Ser380)和PDK1(Ser241)蛋白的磷酸化,进而抑制Akt(Thr308)的磷酸化,间接抑制其下游GSK-3β(Ser9)的磷酸化,最终诱导MCF-7细胞凋亡和抑制其增殖。

受强力霉素调节的自杀基因表达载体系统的构建和在乳腺癌细胞株(MCF-7)的表达

自杀基因治疗是恶性肿瘤基因治疗中最常用的途径之一 .以逆转录病毒载体———pRevTRE为基础进行载体构建 ,首先使用PCR技术对单纯疱疹病毒胸苷激酶基因 (HSVtk)进行扩增 ,将HSVtk基因插入到pRe vTRE ,形成重组载体pRevTRE/HSVtk ,用磷酸钙共沉淀法 ,经过两轮转染 ,分别将pRevTRE/HSVtk和pRevTet On质粒导入乳腺癌细胞株 (MCF 7) .经过潮霉素B(HygromycinB)和G418筛选 ,建立了一株稳定的受四环素衍生物———强力霉素 (Doxycycline ,Dox)调控、表达HSVtk基因产物的人乳腺癌细胞株MCF/TRE/tk/Tet On .HSVtk基因表达产物可以将无毒性的药物前体Ganciclovir (GCV)转变成一种有毒的代谢产物 ,从而杀死乳腺癌细胞株(MCF 7) ,达到基因治疗的目的 .

环境雌激素对乳腺癌细胞株MCF-7凋亡作用的影响

[目的 ]通过观察对 壬基酚 (nonylphenol ,NP)、双酚A(bisphenolA ,BisA)和邻苯二甲酸二丁酯 (dibutylphthalate ,DBP)对乳腺癌细胞株MCF 7凋亡的影响 ,探讨环境雌激素促进MCF 7细胞增殖的生物学机制。 [方法 ]将在DMEM培养液 (含 10 %小牛血清 )中的MCF 7细胞采用开放式单层贴壁培养 ,加受试物前 5d将培养细胞用PBS洗涤后改为在无酚红DMEM(含 5 %经活性碳 葡聚糖苷处理的胎牛血清 ,CDT FBS)中培养连续 5d ,其目的是耗尽细胞内储存的雌激素。实验设溶剂对照组、雌激素对照组、抗雌激素 (它莫西芬 )对照组及三个实验组 ,采用流式细胞术、DNA片段凝胶电泳和细胞苏木素染色 (HE) ,观察环境雌激素对雌激素耗尽所诱导的细胞凋亡作用的影响。 [结果 ] 3 2× 10 -6mol/LNP和 3 2×10 -5mol/LBisA对MCF 7细胞处理 72h ,与对照组相比 ,流式细胞仪分析结果表明 ,二倍体细胞 (G1期细胞 )明显增加 ,亚二倍体细胞峰 (即细胞凋亡率 )消失 ,DNA凋亡片段凝胶电泳不显示典型的凋亡DNA片段梯带 ,细胞苏木素染色结果也显示凋亡细胞明显减少。 [结论 ]与溶剂对照组相比 ,NP和BisA均能够抑制MCF 7细胞的凋亡作用 ,而 3 2× 10 -4mol/LDBP对细胞凋亡的影响作用不明显。这一结果提示 ,该类物质有可能是通过抑制细胞凋亡而?

华蟾素诱导人乳腺癌细胞株MCF-7细胞凋亡与Bax/Bcl-2的关系

目的:观察华蟾素在诱导人乳腺癌MCF-7细胞株凋亡的过程中Bax和Bcl-2蛋白表达的变化及意义。方法:在人乳腺癌细胞株MCF-7中分别加入不同终浓度的华蟾素,24h、48h及72h后检测指标。应用MTT比色法检测细胞增殖活力,倒置显微镜观察细胞形态学变化,TUNEL法检测细胞凋亡指数,Western blot法检测Bax/Bcl-2蛋白表达,共聚焦显微镜观察Bax蛋白分布。结果:华蟾素能显著抑制MCF-7细胞增殖;倒置显微镜下发现凋亡的MCF-7细胞固缩、核染色质凝聚;western blot发现华蟾素能上调MCF-7细胞Bax蛋白表达,但对Bcl-2蛋白表达无影响,正常MCF-7细胞内的Bax均匀分布于细胞质中,华蟾素处理后,Bax明显地聚集于线粒体,呈现线粒体的转位。结论:华蟾素诱导MCF-7细胞凋亡,并在该过程中导致的Bax蛋白表达上调并且向线粒体转位。

外源性p27^(Kip1)基因转染对人乳腺癌MCF-7细胞株细胞周期和增殖的影响

目的:探讨外源性p27Kip1基因对人乳腺癌MCF-7细胞株细胞周期和增殖的影响。方法:应用脂质体转染法将含人野生型p27Kip1基因质粒DNA转染乳腺癌MCF-7细胞,免疫细胞荧光化学方法验证p27Kip1基因转染MCF-7细胞后蛋白表达情况;流式细胞仪检测细胞周期的变化;细胞计数法绘制细胞生长曲线,观察外源性p27Kip1对乳腺癌细胞MCF-7生长的影响。结果:免疫细胞荧光化学方法证实p27Kip1基因转染MCF-7细胞后存在蛋白表达;流式细胞仪检测结果提示,细胞周期出现G0/G1期阻滞;细胞计数法绘制细胞生长曲线显示细胞增殖明显抑制。结论:外源性p27Kip1基因对乳腺癌MCF-7细胞生长和细胞周期有明显抑制作用。

姜黄素通过调控组蛋白乙酰化修饰上调乳腺癌MCF-7和MCF-7/DOX细胞中MDR1表达

目的:从组蛋白乙酰化修饰角度探讨姜黄素上调乳腺癌MCF-7和MCF-7/DOX细胞中多药耐药基因1(multidrug resistance protein 1,MDR1)表达水平的作用机制。方法:CCK-8(Cell Counting Kit-8)法观察姜黄素对MCF-7和MCF-7/DOX细胞生长增殖以及多柔比星敏感性的影响;Realtime PCR和Western blot方法检测姜黄素处理前后两种细胞中MDR1 mRNA和蛋白质表达水平的变化;染色质免疫共沉淀技术(chromatin immunoprecipitation assay,CHIP)检测姜黄素对两种细胞中MDR1启动子区相关组蛋白H3、H4乙酰化水平的影响。结果:不同浓度姜黄素处理72 h对MCF-7和MCF-7/DOX细胞的生长增殖有显著抑制作用,其IC50值分别为22.03μmol/L和27.46μmol/L;10μmol/L姜黄素处理72 h可显著提高两种细胞多柔比星敏感性,多柔比星IC50值分别下降了57.14%和54.52%(P<0.05);姜黄素处理MCF-7和MCF-7/DOX细胞后,MDR1在mRNA水平分别上调(32.90±0.96)和(5.70±0.55)倍(P<0.05),在蛋白质水平分别上调(2.26±0.18)与(2.90±0.21)倍(P<0.05);CHIP结果显示姜黄素对两种细胞中MDR1启动子区相关组蛋白H3、H4的乙酰化水平均有显著上调作用。结论:姜黄素在增强MCF-7和MCF-7/DOX细胞多柔比星敏感性的同时,可通过调控MDR1启动子区相关组蛋白H3、H4的乙酰化水平而上调MDR1的表达。

RhoA小干扰RNA抑制乳腺癌细胞株MCF-7及其裸鼠皮下移植瘤的实验研究

目的观察RhoA小干扰RNA(siRhoA)对乳腺癌细胞株MCF-7增殖、迁移、周期和凋亡的影响以及对裸鼠移植瘤生长的影响。方法 siRhoA Lipofectamine2000介导下转染乳腺癌细胞MCF-7,转染48h后,采用Western blot技术检测RhoA蛋白的表达,MTT实验检测siRhoA转染细胞的增殖变化,损伤刮擦实验检测siRhoA转染细胞的迁移能力,流式细胞仪检测siRhoA转染细胞的周期和凋亡,裸鼠移植瘤实验检测siRhoA对肿瘤生长的影响。结果成功转染siRhoA的肿瘤细胞,Western blot显示RhoA蛋白表达在MCF-7细胞中明显下降;siRhoA对MCF-7细胞的增殖、迁移均有显著的抑制作用并能促进肿瘤细胞凋亡及细胞周期中S期细胞减少,G1/G0期细胞增加;裸鼠移植瘤内重复注射siRhoA后肿瘤生长明显减缓。结论 siRhoA能够明显抑制RhoA基因在乳腺癌细胞MCF-7中的表达,部分逆转MCF-7的恶性生物学行为并抑制裸鼠移植瘤的生长。

葡萄籽多酚对人乳腺癌细胞株MCF-7/ADR的体内外耐药逆转作用

目的:研究葡萄籽多酚(grapeseedpolyphenol熏GSP)对人乳腺癌耐阿霉素细胞株MCF鄄7/ADR的体内外耐药逆转作用。方法:采用MTT法检测1.2mg/L和2.4mg/LGSP对MCF鄄7/ADR的体外耐药逆转倍数。建立人乳腺癌裸鼠移植瘤模型,实验分为4组:对照组,GSP组,阿霉素穴adriamycin熏ADR雪组和ADR+GSP组,观察GSP对肿瘤细胞的体内耐药逆转作用;采用流式细胞术测定不同用药组P鄄糖蛋白穴Pgp雪表达变化。结果:体外1.2mg/LGSP即可有效逆转耐药,2.4mg/LGSP的逆转倍数为9.44;体内裸鼠抑瘤实验显示,GSP有一定抑瘤作用,联用ADR可显著抑制肿瘤生长,20mg/kgGSP可有效逆转CF鄄7/ADR细胞的耐药性,抑瘤率为54.64%。流式细胞术结果显示,联用GSP与ADR组肿瘤细胞Pgp表达明显低于单独使用ADR组。结论:GSP能在体内外逆转MCF鄄7/ADR细胞的耐药性,此作用可能是通过抑制Pgp表达实现的。

黄芩素联合U0126诱导人乳腺癌细胞株MCF-7凋亡的分子机制研究

目的探讨黄芩素和U0126诱导人乳腺癌细胞株MCF-7凋亡的分子机制。方法单独及联合使用20μmol黄芩素、10μmol U0126处理MCF-7细胞24 h;光学显微镜观察细胞数量变化,流式细胞术检测MCF-7细胞周期变化,CCK8法检测细胞增殖变化,TUNEL法和流式细胞术检测细胞凋亡,实时聚合酶链反应(Real Time PCR)和Western blot检测凋亡相关因子m RNA和蛋白的表达水平。结果与黄芩素单独刺激MCF-7细胞相比,黄芩素联合U0126刺激MCF-7细胞时,S期细胞比例降低更明显;MCF-7细胞经不同浓度黄芩素或U0126处理后,增殖抑制,且具有浓度依赖性(P<0.05);与黄芩素单独处理MCF-7细胞相比,黄芩素与U0126联合处理时,细胞凋亡更加显著(P<0.05),早期凋亡和晚期凋亡均增多(P<0.05);与黄芩素或U0126单独处理MCF-7细胞相比,黄芩素和U0126联合处理MCF-7细胞时,凋亡抑制因子Bcl-2的m RNA水平降低(P<0.05),凋亡促进因子Bax的m RNA水平增高(P<0.05),ERK1/2、GSK-3β和P38的磷酸化水平降低(P<0.05),凋亡促进因子Bax表达量增高(P<0.05),凋亡抑制因子Bcl-2表达量降低(P<0.05)。结论黄芩素或U0126通过调控Bcl-2/Bax的表达水平以及ERK1/2、GSK-3β和P38的磷酸化水平抑制MCF-7细胞增殖,促进细胞凋亡,且具有协同效应。因此,黄芩素和U0126可联合用于临床治疗乳腺癌,具有重要临床意义。

化疗药物体外干预乳腺癌MCF-7细胞株的耐药基因表达

目的体外评价蒽环类及紫杉类化疗药物与乳腺癌耐药相关基因MDR1(多药耐药基因)和BCRP(乳腺癌相关耐药基因)表达的关系。方法利用RT-PCR技术和荧光定量PCR技术检测体外化疗药物干预后乳腺癌细胞株MCF-7的耐药相关基因表达情况。结果蒽环类药物与MDR1基因表达量间有密切关系,随蒽环类药物浓度的增加和作用时间的延长,MDR1基因表达量也随之增加。而蒽环类药物与BCRP基因间及紫杉类药物与MDR1、BCRP间都无明显的量效关系。结论蒽环类药物是MDR1基因编码的p-gp蛋白的特异性底物之一。临床可能通过检测MDR1的表达量较准确的预测蒽环类药物的疗效,并为个体化的选择敏感性药物提供一定的实验依据。

胡椒碱对乳腺癌阿霉素耐药细胞株MCF-7/ADM细胞的逆转作用

目的探讨胡椒碱对人乳腺癌阿霉素(ADM)耐药细胞株MCF-7/ADM的逆转作用及其机制。方法采用CCK-8法观察胡椒碱联合阿霉素(ADM)对乳腺癌耐药株MCF-7/ADM细胞生长增殖的影响;应用免疫印迹技术(Western-blot)测定胡椒碱联合ADM对MCF-7/ADM细胞表面P-糖蛋白(P-gp)表达的影响。结果 60,80,100μmol/L胡椒碱试验组细胞耐药逆转倍数分别为1.62,2.08,3.78倍,差异有统计学意义(P<0.05)。胡椒碱能显著抑制MCF-7/ADM细胞膜P-gp蛋白的表达,其作用随浓度的增加而增强。结论胡椒碱与ADM共同作用于MCF-7/ADM细胞,可使细胞对ADM的敏感性增强。胡椒碱具有部分逆转MCF-7/ADM细胞耐药的作用,其逆转作用机制可能与通过下调P-gp的表达有关。

硼替佐米和3-甲基腺嘌呤对人乳腺癌细胞株MCF-7的抑瘤效应

目的:研究蛋白酶体活性抑制剂硼替佐米(Bortezomib)对人乳腺癌细胞株MCF-7的自噬诱导和增殖抑制作用,以及自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)与Bortezomib联合应用对MCF-7细胞自噬及增殖的影响。方法:采用MTT法检测细胞增殖,蛋白质印迹法检测蛋白酶体活性及自噬相关蛋白LC3的表达。结果:Bortezomib能明显抑制MCF-7细胞增殖并诱导其自噬,3-MA与Bortezomib联合应用,可逆转Bortezomib诱导的细胞自噬,并增强Bortezomib对MCF-7细胞增殖的抑制(P<0.05)。结论:联合应用Bortezomib和3-MA可能对乳腺癌细胞自噬和增殖具有协同抑制作用。

RNA干扰对乳腺癌细胞株MCF-7/Adr多药耐药性的逆转

目的研究小分子干扰RNA对乳腺癌耐药细胞株MCF7/Adr多药耐药性的逆转作用。方法设计针对mdrl基因的SiRNA,转染进MCF-7/Adr细胞;用荧光定量PCR检测mdrlmRNA的表达,流式细胞仪分析Pgp表达,MTT法检测阿霉素对MCF-7/Adr细胞的半数抑制浓度(IC50)。结果该SiRNA能使耐药细胞株MCF-7/Adr的mdrlmRNA和Pgp表达水平分别显著下调(P<0.01),并使阿霉素对MCF7/Adr的IC50显著降低(P<0.01)。结论RNA干扰可逆转乳腺癌MCF7/Adr细胞株的多药耐药性。

奥曲肽对MCF-7人乳腺癌细胞株生长及凋亡的影响

目的：研究生长抑素类似物奥曲肽（ＯＣＴ）对乳腺癌细胞生长及凋亡的影响。方法：将ＯＣＴ作用于体外培养的雌激素受体（ＥＲ）阳性人乳腺癌细胞株ＭＣＦ－７，应用ＭＴＴ比色法分析细胞生长抑制作用，流式细胞术测定细胞周期分布和凋亡率，光镜、电镜观察细胞形态和超微结构。结果：ＯＣＴ可抑制ＭＣＦ－７细胞生长、抑制细胞周期，并可诱导细胞凋亡。结论：ＯＣＴ 对人乳腺癌细胞增殖具有抑制作用，其机制与诱导肿瘤细胞凋亡有关。

3,6-二羟黄酮对乳腺癌细胞株MCF-7细胞生长增殖的影响

目的观察3,6-二羟黄酮对乳腺癌细胞株MCF-7细胞的影响。方法分别用台盼蓝拒染观察药物对细胞的毒性作用,流式细胞术观察药物对细胞周期的影响。结果3,6-二羟黄酮对MCF-7细胞具有明显地细胞毒作用,呈一定的时效性;流式细胞术药物作用MCF-748h后能引起其细胞周期发生变化。结论3,6-二羟黄酮能明显地抑制MCF-7细胞的增殖,并能引起其细胞周期的变化。

Wnt1基因在乳腺癌细胞株MCF-7/ADR中的表达与多柔比星化疗抵抗关系的研究

目的探讨Wnt1在乳腺癌细胞中的表达及其在多柔比星化疗抵抗中的作用。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Wnt1基因在乳腺癌细胞中的表达;双链siRNA转染阻断Wnt1基因,RT-PCR和免疫印迹法(Western blotting)检测基因沉默效果;细胞毒实验(MTT)法检测乳腺癌细胞的生长抑制率。结果对照组、siRNA干扰组、多柔比星处理组,Wnt1沉默MCF-7/ADR+ADM组的细胞存活率分别为(100±5.2)%,(84.3±4.1)%,(68.7±4.7)%和(42.3±3.5)%,其他3组的细胞存活率与对照组比较,差异有统计学意义(F=5.381,P<0.05)。Wnt1沉默MCF-7/ADR+ADM组与其他3组比较细胞的存活率均降低,与对照组、siRNA干扰组和多柔比星处理组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);Wnt1在乳腺癌细胞呈高表达,siRNA沉默Wnt1基因,可以显著下调Wnt1mRNA和蛋白的表达。结论 Wnt1基因在乳腺癌细胞呈高表达,沉默Wnt1基因下调Wnt1基因的转录和翻译,能显著增强乳腺癌细胞对多柔比星的敏感性,部分逆转其对多柔比星的耐药性。