TO901317经LXRα/NF-κB抑制MCF-7乳腺癌细胞迁移

目的探究肝X受体(LXR)激动剂TO901317对MCF-7人乳腺癌细胞迁移能力的作用及机制。方法体外培养MCF-7细胞。先运用不同浓度的TO901317处理MCF-7细胞24 h,然后通过LXRαsiRNA转染或核因子κB(NF-κB)抑制剂PDTC处理细胞,划痕愈合实验检测MCF-7细胞迁移能力的改变,同时运用蛋白免疫印迹法检测LXRα、NF-κB p65与IκBα的表达。结果随着TO901317处理浓度的增加,MCF-7细胞的迁移能力明显得到抑制,差异具有统计学意义(P<0.05);同时LXRα与IκBα的表达逐渐增强,而NF-κB p65的表达则显著降低。LXRαsiRNA可显著延缓TO901317的上述作用,PDTC处理则进一步增强TO901317对乳腺癌细胞迁移的抑制作用。结论TO901317可激活LXRα,下调NF-κB p65、上调IκBα的表达,抑制乳腺癌细胞迁移。

右美托咪定对MCF-7乳腺癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响

目的探讨右美托咪定对MCF-7乳腺癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法将MCF-7乳腺癌细胞分为六组,右美托咪定组(D1组、D2组、D3组、D4组、D5组)和对照组(C组)。D1、D2、D3、D4、D5组加入右美托咪定,终浓度分别为1 000、100、10、1、0.1 ng/ml,C组加入等容积的生理盐水。通过噻唑蓝(MTT)法观察右美托咪定对MCF-7乳腺癌细胞增殖的影响,通过划痕实验观察右美托咪定对MCF-7乳腺癌细胞迁移的影响,应用凋亡试剂盒结合流式细胞仪检测右美托咪定对MCF-7乳腺癌细胞凋亡的影响。结果与C组比较,D1、D2、D3、D4、D5五组乳腺癌细胞增殖率、迁移距离和凋亡率差异均无统计学意义。结论右美托咪定对MCF-7乳腺癌细胞的增殖、迁移和凋亡无明显影响。

白藜芦醇抑制MCF-7乳腺癌细胞增殖的机制研究

目的:研究白藜芦醇对MCF-7乳腺癌细胞抑制效应及其作用机制。方法:以人MCF-7乳腺癌细胞株为研究对象,利用MTT方法研究白藜芦醇抑制MCF-7乳腺癌细胞的生物学效应;观察在ERK1/2抑制剂PD98059预处理情况下,白藜芦醇抑制MCF-7乳腺癌细胞增殖效应的改变;利用免疫印迹方法观察白藜芦醇对MCF-7乳腺癌细胞中ERK1/2与AKT信号分子的蛋白表达。结果:白藜芦醇能够明显降低MCF-7乳腺癌细胞增殖能力,该作用呈一定的浓度依赖性关系。在ERK1/2抑制剂PD98059预处理情况下,白藜芦醇对MCF-7乳腺癌细胞增殖抑制效应能明显抑制,PD98059可明显减轻该效应。同时,白藜芦醇明显增加p-ERK1/2蛋白表达,降低p-AKT表达水平,但对ERK1/2与AKT蛋白表达无改变。结论:白藜芦醇能够有效抑制MCF-7乳腺癌细胞增殖,该效应与白藜芦醇对ERK1/2及AKT信号途径的调节有关。

乳岩宁诱导MCF-7乳腺癌裸鼠肿瘤细胞凋亡的形态学研究

目的观察乳岩宁对MCF-7乳腺癌裸鼠肿瘤细胞凋亡及免疫功能的影响。方法 MCF-7细胞株接种于35只BALB/C裸鼠右侧胸壁第2乳垫部皮下,15 d后选取荷瘤成功裸鼠随机分为对照组、乳岩宁组、平消胶囊组,每组10只。记录裸鼠肿瘤生长情况;实验结束处死裸鼠取脾、肿瘤,称重,计算脾指数;进行电镜下病理形态学观察。结果乳岩宁及平消胶囊组的瘤重均明显低于对照组(P﹤0.01);乳岩宁组的脾指数高于平消胶囊组(P﹤0.05);电镜观察显示乳岩宁方能够诱导MCF-7乳腺癌细胞凋亡。结论乳岩宁方具有一定的抑瘤作用,可能通过诱导肿瘤细胞凋亡来实现的,乳岩宁还能提高裸鼠的脾指数。

中药复方联合TAM对MCF-7乳腺癌的抑制作用及形态学影响

目的:观察中药复方联合三苯氧胺(TAM)对MCF-7乳腺癌的抑制作用及形态学的影响。方法:将造模成功小鼠随机分为对照组、TAM组、乳结合组(乳岩宁+TAM)和益结合组(益气消积方+TAM)。日一次灌胃,连续21 d,实验前后测量裸鼠体重变化情况;用药21天后剥离肿瘤称重,计算抑瘤率;HE染色后光镜下观察瘤组织病理形态学变化;并透射电镜(TEM)下观察超微结构变化。结果:体重:TAM组裸鼠体重下降最明显(3.18±0.061),结合组次之(2.5±0.042),二者比较显著意义(P<0.01);瘤重:TAM组、乳结合组、益结合组的的肿瘤重量均低于对照组,与对照组比较有统计学差异(P<0.01);HE染色提示乳腺癌为浸润性导管癌,透射电镜下观察提示中药复方联合TAM具有诱导肿瘤细胞凋亡的作用。结论:中药复方联合TAM能抑制肿瘤生长,增加TAM抑瘤率,其作用机制可能通过诱导肿瘤细胞凋亡来实现的。

中药复方乳岩宁联合TAM对MCF-7乳腺癌荷瘤裸鼠一般状态及雌激素水平的影响

目的:观察中药复方对荷瘤裸鼠一般状态及血清雌激素水平的影响。方法:将造模成功小鼠随机分为对照组、三苯氧胺(TAM)组、乳结合组(乳岩宁方+TAM)和益结合组(益气养阴方+TAM)。每日灌胃一次,连续给药21天,隔日测量裸鼠体重,绘制体重变化曲线;分别于用药前、实验第10天、21天用小鼠自主活动测试仪检测小鼠5分钟内自主活动次数。处死裸鼠前摘眼球取血,ELISA法检测小鼠血清中雌二醇(E2)和孕酮(Progesitn,简称P)水平。结果:体重:TAM组裸鼠体重下降最明显,为(3.18±0.048)g,乳结合组次之,为(2.5±0.034)g,益结合组(1.3±0.019)g,各组间比较有统计学意义(P<0.01)。自主活动次数:实验第10、21天检测裸鼠活动次数,各实验组明显低于其余各组(P<0.01)。雌激素水平:含TAM组血清中雌二醇(E2)和孕酮(P)的水平明显低于对照组(P<0.01),乳结合组的E2水平明显低于TAM组(P<0.01),益结合组的E2水平与TAM组对比无统计学意义(P>0.05),而两个中药结合组的孕酮水平明显低于对照组(P<0.01)。结论:中药复方能改善荷瘤裸鼠一般状态,减轻TAM带来的裸鼠体重下降,改善活动能力,与TAM合用可明显降低体内雌激素水平。

干扰素对MCF-7乳腺癌细胞的增殖抑制作用

目的:研究干扰素对MCF-7乳腺癌细胞的增殖抑制作用。方法:MTT法检测干扰素-γ(IFN-γ)、干扰素-α2b(IFN-α2b)单独及联合应用,作用不同时间对MCF-7乳腺癌细胞的增殖抑制作用。结果:IFN-γ、IFN-α2b及二者联合应用均对MCF-7乳腺癌细胞的增殖具有抑制作用:单独用药时,作用48h的抑制作用较为明显(P<0.05);联合用药时,作用72h效果显著(P<0.05)。结论:IFN-γ、IFN-α2b及二者联合应用对MCF-7乳腺癌细胞增殖均有不同程度的抑制作用,二者联合应用药效作用时间延长、作用效果更佳。

内源性途径调控芬太尼与5-氟尿嘧啶联合诱导的MCF-7乳腺癌细胞凋亡

目的探讨芬太尼与5-氟尿嘧啶(FU)联合应用对MCF-7乳腺癌细胞凋亡的影响及内源性途径的调控机制。方法作用48 h后通过流式细胞技术检测亚二倍体峰细胞凋亡情况,通过Western印迹检测Bcl-2、Bax表达情况。结果 1μmol/L及10μmol/L浓度的芬太尼单独应用均引起凋亡率增加(P<0.01),Bcl-2表达减弱(P<0.01),Bax表达增强(P<0.05,P<0.01);5-FU单独应用后凋亡率亦明显增加(P<0.01),Bcl-2表达减弱(P<0.01),Bax表达增强(P<0.01);三种浓度芬太尼与5-FU联合应用均具有协同作用(P<0.05,P<0.01)。结论一定浓度的芬太尼、5-FU及联合应用48h对MCF-7乳腺癌细胞有促进凋亡作用,并显著下调Bcl-2表达、上调Bax表达,两药联合应用启动内源性凋亡途径具有协同作用。

环境类雌激素双酚A通过上调Snail蛋白表达促进MCF-7乳腺癌细胞迁移

目的:探讨外源性双酚A(BPA)调控MCF-7乳腺癌细胞迁移的分子机制。方法:通过划痕实验和Transwell实验检测MCF-7乳腺癌细胞迁移能力,并以黏附实验反向辅助验证;通过质粒转染干扰Snail蛋白表达水平,进一步研究外源性BPA调控MCF-7乳腺癌细胞迁移的分子机制。结果:外源性BPA能上调细胞中Snail的表达水平,从而下调E-cadherin的表达并促进MCF-7乳腺癌细胞迁移;siRNA干扰Snail表达后MCF-7乳腺癌细胞迁移减慢。此外,BPA刺激能降低MCF-7乳腺癌细胞黏附能力。结论:外源性BPA可通过上调Snail表达水平,促进MCF-7乳腺癌细胞的迁移,为进一步阐明乳腺癌细胞侵袭与转移的分子调控机制提供了新线索。

芬太尼对MCF-7乳腺癌细胞增殖及迁移和凋亡的影响

目的:探讨芬太尼对MCF-7乳腺癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法:将MCF-7乳腺癌细胞分为6组,正常对照组(C组),芬太尼组(F1组、F2组、F3组、F4组、F5组),芬太尼的终浓度分别为1、0.1、0.01、0.001、0.0001μmol/L,在含去激素新生小牛血清的无酚红培养基培养条件下,分别采用MTT法、划痕实验、Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒结合流式细胞仪观察芬太尼对MCF-7乳腺癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响。结果:芬太尼组各组OD值、迁移距离和凋亡率与C组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在含去激素新生小牛血清的无酚红培养基培养条件下,芬太尼对MCF-7乳腺癌细胞增殖、迁移和凋亡无明显影响。

pEGFP—C3／Smad3真核表达质粒的构建及在MCF-7乳腺癌细胞中的转染

目的构建pEGFP—C3／Smad3真核表达质粒，并进行鉴定。为进一步研究Smad3在抑制乳腺癌生长机制中起到的作用提供实验基础。方法利用RT—PCR方法从MCF-7乳腺癌细胞中获得cDNA，应用PCR方法扩增、提取Smad3的基因片段，酶切后与pEGFP—C3真核表达载体连接，构建pEG—FP—C3／Smad3真核表达质粒，进行测序、酶切鉴定，表明质粒构建成功。将构建的质粒瞬时转染至MCF-7乳腺癌细胞中，通过荧光倒置显微镜观察、RT—PCR技术及Westenblot技术鉴定转染是否成功。结果本实验成功构建了pEGFP—C3／Smad3真核表达质粒。结论pEGFP—C3／Smad3真核表达质粒瞬时转染到MCF-7细胞中，可使Smad3在基因与蛋白水平的表达显著上调。

低温等离子体对MCF-7乳腺癌细胞的化疗增敏作用

为了改善肿瘤细胞对化疗药物的耐药性,该文提供了一种通过促进细胞对药物的摄取来增敏化疗的方法。低温等离子体作用肿瘤细胞后,培养基内的活性氧显著升高,进一步改变了细胞膜通透性,使得外源活性氧及钙离子进入细胞内而诱发细胞凋亡。与此同时,细胞膜通透性的改变还可以增加细胞对化疗药物的摄取,进一步提高了肿瘤细胞杀伤效率。结果显示,细胞经过等离子体处理以后,显示出20%的细胞杀伤效率。阿霉素作为常见的抗肿瘤药物,在4μg/m L的浓度下可以杀伤46%的细胞;而联合等离子体治疗后,细胞杀伤效率增加至88%,显著增敏了阿霉素的化疗效果。另外,等离子体联合金纳米棒治疗后,显示出90%的细胞杀伤效率,相对于单独使用金纳米棒(64%)的效果更为显著。因此,等离子体在引发细胞凋亡的同时,可以通过细胞膜通透性的改变,增加细胞对化疗药物的摄取,进而增敏化疗效果。

软骨多糖诱导MCF-7乳腺癌细胞凋亡的实验研究

研究软骨多糖诱导MCF-7乳腺癌细胞凋亡及其作用机理。方法:选用MCF-7人类乳腺癌细胞系体外培养,应用MTT法检测细胞生长抑制率,TUNEL法检测细胞凋亡率,HE染色法观察细胞形态学改变,流式细胞仪检测细胞周期的变化,免疫荧光方法检测BCL-2BAD及波形蛋白Vimentin的表达率。结果:软骨多糖对MCF-7细胞体外生长具有明显的抑制作用,且呈时间和浓度依赖性;软骨多糖可诱导MCF-7细胞发生凋亡并伴随有凋亡小体出现等形态学变化;软骨多糖促进BCL-2蛋白的表达水平下降,BAD表达水平上升,及Vimentin的降解。结论:软骨多糖能够在体外诱导MCF-7细胞凋亡,是一种新型的抗乳腺癌活性物质。

MCF-7乳腺癌细胞摄取188Re-DTPA-DG的实验研究

目的:研究乳腺癌细胞(MCF-7)对188Re标记二乙三胺五乙酸葡糖胺(DTPA-DG)的摄取。方法:采用γ计数法在不同时间段评价乳腺癌细胞(MCF-7)对188Re-DTPA-DG(3.7kBq/10μl)的摄取。结果:乳腺癌肿瘤细胞(MCF-7)对188Re-DTPA-DG的摄取率明显高于对照组188ReO4-(P<0.05);实验组30min与4h细胞摄取率差异存在显著性意义(P<0.05),而对照组不同时间点细胞摄取率差异无显著性意义(P>0.05)。结论:188Re-DTPA-DG容易被乳腺癌细胞(MCF-7)摄取,使188Re在肿瘤细胞内发挥辐射效应成为可能,从而为临床肿瘤治疗提供理论依据。

MCF-7乳腺癌细胞的国内研究进展

通过综合近五年国内对MCF-7乳腺癌细胞研究的情况,总结近期研究成果,从而为未来乳腺癌的研究和治疗的提供参考。

纳米雄黄对MCF-7乳腺癌干细胞的体外抑制作用

目的研究纳米雄黄对乳腺癌干细胞的体外抑制作用。方法以人乳腺癌MCF-7亲本细胞为对象,采用无血清培养法培养获得乳腺癌干细胞。以阿霉素(1 mg/L)为阳性对照,以相同质量浓度的水飞雄黄为参照,采用CCK-8法检测纳米雄黄对MCF-7亲本细胞及干细胞增殖的影响;借助悬浮球形成及分化实验、划痕实验、Transwell侵袭实验及流式细胞仪检测纳米雄黄对乳腺癌干细胞悬浮球形成及分化能力、迁移及侵袭能力、CD44^(+)/CD24^(-)细胞亚群比例的影响;采用Western blot法检测乳腺癌干细胞上皮间质转化通路相关蛋白(上皮钙黏着蛋白、波形蛋白)的表达水平。结果水飞雄黄、纳米雄黄1、5、10、40、60、80 mg/L组MCF-7亲本细胞及其干细胞(两者1 mg/mL组乳腺癌干细胞除外)的存活率均显著低于空白对照组(P<0.01);水飞雄黄、纳米雄黄1、2.5、5、10 mg/L组的多细胞悬浮球(>20个细胞)数量均显著少于空白对照组(P<0.01),且悬浮球体积有所缩小,分化的贴壁细胞有所减少,其划痕愈合率、相对侵袭率(水飞雄黄1 mg/L组除外)、CD44^(+)/CD24^(-)细胞亚群比例均显著低于空白对照组(P<0.01);水飞雄黄、纳米雄黄2.5、10 mg/L组细胞中上皮钙黏着蛋白的表达水平均显著高于空白对照组,波形蛋白的表达水平均显著低于空白对照组(P<0.01)。纳米雄黄的上述作用普遍优于相同质量浓度的水飞雄黄(P<0.01)。结论与相同质量浓度的水飞雄黄比较,纳米雄黄可更明显地抑制乳腺癌干细胞的增殖、悬浮球的形成及分化能力,并可降低CD44^(+)/CD24^(-)细胞亚群比例。这种作用可能与纳米雄黄通过抑制上皮间质转化通路相关蛋白的表达而抑制乳腺癌干细胞的迁移和侵袭有关。

重组腺病毒介导的ING-4用于人MCF-7乳腺癌细胞的体外基因治疗

目的研究重组腺病毒介导的ING-4感染人MCF-7乳腺癌细胞后对其的生长抑制作用。方法将搭载有ING-4基因的重组腺病毒载体Ad-ING-4感染人MCF-7乳腺癌细胞,用荧光显微镜、RTPCR和Western-Blot法检测ING-4在MCF-7细胞中的转录和表达;CCK法与流式细胞技术检测ING-4基因对MCF-7细胞的生长抑制和促凋亡作用;半定量RT-PCR法检测ING-4基因表达对MCF-7细胞中相关凋亡基因表达的影响。结果在MCF-7细胞中ING-4基因的表达对其细胞增殖有明显抑制作用,并显著促进其凋亡,ING-4表达使MCF-7细胞中Bax表达上调,Bcl-2、Survivin表达下调。结论 MCF-7细胞在转染ING-4基因后其增殖受到了明显抑制,且更易凋亡,可能是通过改变Bax,Bcl-2及Survivin表达水平来实现。

TNF-ɑ调控LRG1促进乳腺癌MCF-7细胞增殖、侵袭和迁移

目的:研究TNF-α对乳腺癌MCF-7细胞中LRG1蛋白表达的调控及其对乳腺癌MCF-7细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响及相关分子机制。方法:MTT实验检测不同浓度TNF-α处理后MCF-7细胞活力;EdU实验、Transwell实验和划痕实验分别检测抑制LRG1表达后细胞增殖、侵袭以及迁移能力;Western blot检测细胞内MAPK信号通路中p-p38蛋白表达。结果:低浓度TNF-α处理乳腺癌MCF-7细胞,细胞活力增强;抑制LRG1表达后细胞增殖能力下降,侵袭细胞数、细胞迁移率以及p-p38蛋白表达均下降。结论:TNF-ɑ通过调控LRG1的表达促进乳腺癌MCF-7细胞增殖、侵袭和迁移,这一过程可能通过激活p38MAPK信号通路来实现。

灵菌红素对耐阿霉素人乳腺癌细胞MCF-7/ADR的作用研究

目的探讨灵菌红素对耐阿霉素人乳腺癌细胞MCF-7/ADR的作用。方法采用平板发酵粘质沙雷氏菌WA12-1-18生产灵菌红素,CCK-8测定灵菌红素的体外活性及MCF-7/ADR的耐药指数。构建裸鼠皮下移植瘤模型,灵菌红素高、低剂量组分别腹腔注射5.0、2.5 mg/kg灵菌红素,生理盐水对照位腹腔注射等体积生理盐水,每4天1次,连续用药24 d,观察移植瘤的体积、质量及裸鼠体质量,HE染色观察移植瘤组织及裸鼠主要脏器的病理情况,免疫组织化学检测移植瘤Ki-67的表达。结果获得的灵菌红素质量分数为95.18%,对MCF-7和MCF-7/ADR的IC50分别为0.484μg/mL和0.264μg/mL。MCF-7/ADR耐药指数13,符合细胞耐药株的要求。灵菌红素处理组裸鼠移植瘤增长速度较生理盐水组慢,肿瘤细胞排列稀疏,核小且着色较浅,Ki-67染色后棕色明显减少。灵菌红素2.5 mg/kg组和灵菌红素5 mg/kg组,在荷MCF-7/ADR裸鼠中抑瘤率分别为37.23%和53.72%。另外,各组裸鼠体质量差异无统计学意义,主要脏器无明显病理变化。结论灵菌红素可抑制裸鼠体内耐阿霉素人乳腺癌细胞MCF-7/ADR的生长,对心、肝、脾、肺和肾等主要脏器无明显毒副作用,为灵菌红素在耐阿霉素乳腺癌的临床应用提供了实验依据。

毛酸浆内酯通过抑制STAT3诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡

[目的]旨在探讨信号转导和转录激活因子3(STAT3)在毛酸浆内酯(PPB)诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡中发挥的作用。[方法]采用荧光染色法分析PPB诱导MCF-7细胞凋亡;使用生物信息学方法预测PPB抗乳腺癌的潜在机制;采用噻唑蓝(MTT)法考察STAT3抑制剂S3I-201以及STAT3小干扰RNA(siRNA)对PPB抑制MCF-7细胞生长的作用;采用蛋白免疫印迹(Western Blot)法考察PPB单独处理或STAT3 siRNA预处理后对MCF-7细胞中STAT3、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶8(Caspase8)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(Caspase9)、细胞色素c(Cytochrome c)以及多聚ADP核糖聚合酶(PARP)蛋白表达的影响。[结果]MCF-7细胞经PPB作用后凋亡形态特征明显,凋亡比例上升;生物信息学结果显示PPB与乳腺癌疾病的共同靶点STAT3在乳腺癌组织中高表达,单基因GSEA结果提示STAT3高表达与凋亡信号通路呈负相关;Western Blot法检测结果显示PPB能够抑制STAT3的磷酸化;S3I-201抑制剂或siRNA敲降STAT3均能进一步促进PPB抑制MCF-7细胞生长;此外,敲降STAT3进一步增加PPB对促凋亡蛋白Bax、Cytochrome c、裂解的Caspase8(Cleaved-Caspase8)、裂解的Caspase9(Cleaved-Caspase9)以及裂解的PARP(Cleaved-PARP)的促进作用,并增加PPB对抗凋亡蛋白Bcl-2的抑制作用。[结论]PPB通过抑制STAT3诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡。