HCMV感染对HEL细胞MCM装载因子Cdt1的影响

目的研究人类巨细胞病毒(HCMV)感染对人胚肺成纤维(HEL)细胞的MCM装载因子Cdt1表达的影响,从分子水平上探讨HCMV的发病机制。方法用血清饥饿法同步化HEL细胞于G0/G1期,用HCMV感染同步化的HEL细胞作为感染组,同时设模拟感染组为对照组。于感染后12、24、48、72和96h收获细胞,用免疫细胞化学法检测两组细胞核内HCMVCdt1蛋白。结果 12、24、和96h两组HEL细胞Cdt1蛋白水平均差异有显著性(P<0.05),而48、72h两组HEL细胞Cdt1蛋白水平无明显差异(P>0.05)。12和96h感染组较模拟感染组明显降低,24h感染组较模拟感染组明显升高。模拟感染组在感染后12h时Cdt1蛋白表达水平最高,然后逐渐下降,至24h时达最低水平,96h又稍有回升;感染组在感染后12hCdt1蛋白表达水平较低,24h达到最高峰,48h时急剧下降,一直维持较低的稳定水平。结论 HCMV诱导Cdt1蛋白表达延迟,从而影响了MCM复合物的装载和pre-RC的形成,使细胞停滞在G1期,阻止DNA的复制。