LncRNA MCM3AP-AS1/miR-335对骨肉瘤细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨长链非编码RNA MCM3AP反义RNA 1(LncRNA MCM3AP-AS1)对骨肉瘤细胞增殖、凋亡的影响及其对miR-335的调控作用。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测骨肉瘤组织、瘤旁组织中MCM3AP-AS1、miR-335的表达量;体外培养人骨肉瘤细胞U2OS,分别将si-NC、si-MCM3AP-AS1、si-MCM3AP-AS1与NC-inhibitor、si-MCM3AP-AS1与miR-335 inhibitor转染至U2OS细胞;采用qRT-PCR法检测U2OS细胞中MCM3AP-AS1、miR-335的表达量;采用MTT实验与平板克隆形成实验检测细胞增殖能力;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验检测MCM3AP-AS1、miR-335的靶向关系;蛋白质印迹法检测B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达量。结果:与瘤旁组织比较,骨肉瘤组织中MCM3AP-AS1的表达水平升高(P<0.05),miR-335的表达水平降低(P<0.05);转染si-MCM3AP-AS1可明显降低光密度值及Bcl-2蛋白水平、减少克隆形成数、提高凋亡率及Bax蛋白水平(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实MCM3AP-AS1可靶向结合miR-335;转染miR-335 inhibitor可明显逆转干扰MCM3AP-AS1对U2OS细胞增殖及凋亡的作用。结论:MCM3AP-AS1可通过负向调控miR-335的表达调节骨肉瘤细胞增殖及凋亡。