MCM5在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的探讨MCM5在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及与其临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学SP法,检测78例原发性非小细胞肺癌组织、40例正常肺组织中MCM5的表达水平。结果非小细胞肺癌组MCM5阳性率高于正常肺组织组(P=0.000)。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期非小细胞肺癌组织中MCM5阳性率比较,差异有统计学意义(P=0.031);淋巴结转移者MCM5表达率与无淋巴结转移者比较也有统计学差异(P=0.015)。结论 MCM5可能参与了非小细胞肺癌的发生和发展过程;可能成为判断非小细胞肺癌发生发展和评价预后的有效参考指标之一,对于非小细胞肺癌的早期预测可能具有重要的临床意义。

乳癌新辅助化疗后MCM5、Ki-67和C-erbB-2表达变化及意义

目的观察人乳癌新辅助化疗前后MCM5、Ki-67和C-erbB-2蛋白的表达情况,探讨其与化疗效果的关系。方法采用免疫组化法检测新辅助化疗前后40例乳癌标本中MCM5、Ki-67和C-erbB-2的表达。结果新辅助化疗有效率为77.5%。化疗前MCM5和Ki-67蛋白阳性表达显著高于化疗后(Z=-3.94、-3.04,P<0.01),而化疗前后C-erbB-2蛋白阳性表达差异无显著性(Z=-1.60,P>0.05);化疗前MCM5蛋白阳性表达显著高于Ki-67(Z=-4.02,P<0.01)。化疗有效组(31例)MCM5蛋白阳性表达显著高于化疗无效组(9例)(Z=-3.57,P<0.01),而C-erbB-2蛋白阳性表达显著低于化疗无效组(Z=-3.92,P<0.01)。结论ET方案新辅助化疗有较好的疗效,可能通过抑制MCM5、Ki-67蛋白的表达来阻止乳癌细胞的增殖。MCM5高表达、C-erbB-2阴性者化疗更为敏感,二者可作为临床指导乳癌化疗的分子生物学指标。

MCM5和P16(INK4A)在宫颈鳞癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨微小染色体维持蛋白-5(MCM5)与P16INK4A在宫颈癌组织、宫颈上皮内瘤变和正常宫颈组织中的表达及其意义。方法采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和免疫组化法,分别检测MCM5和P16INK4AmRNA及蛋白在40例宫颈癌组织、11例低度宫颈上皮内瘤变(CINⅠ)、15例高度宫颈上皮内瘤变(CINⅡ~Ⅲ)和15例正常宫颈组织中的表达。结果 1各不同宫颈组织中MCM5和P16INK4AmRNA及蛋白的表达趋势一致。宫颈癌组织中MCM5和P16INK4AmRNA的表达量和蛋白表达率均高于CINⅠ、CINⅡ~Ⅲ和正常宫颈组织。MCM5基因和蛋白在宫颈癌组织中的表达均比正常宫颈组织、CINⅠ、CINⅡ~Ⅲ高,差异均具有统计学意义(P<0.05);P16INK4A基因和蛋白在宫颈癌中的表达比正常宫颈组织、CINⅠ高,差异均有统计学意义(P<0.01),而与CINⅡ~Ⅲ间差异无统计学意义(P>0.05)。2MCM5mRNA表达量和蛋白表达率与临床期别、分化程度相关,差异有统计学意义(P<0.01),与年龄无关(P>0.05);P16INK4AmRNA和蛋白表达与临床期别、年龄无关(P>0.05),而与分化程度相关,差异有统计学意义(P<0.01)。3在宫颈癌组织中MCM5和P16INK4A表达呈正相关(r=0.538,P<0.01)。结论MCM5和P16INK4A的高表达可能与宫颈癌的发生发展有关。MCM5可能成为宫颈癌肿瘤增生的新标志物;其与P16INK4A联合检测有助于进行CIN的分级和转归判断,有望提高宫颈癌的筛查率。

长链非编码RNA CRNDE通过下调miR-136-5p表达并上调MCM5表达促进U937细胞增殖并抑制其凋亡

目的 探究长链非编码RNA结直肠肿瘤差异表达基因(CRNDE)对U937细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响及其作用机制。方法 首先通过基因表达谱交互分析(GEPIA)数据库分析CRNDE在急性髓系白血病(AML)患者骨髓细胞中的表达水平;实时荧光定量PCR检测AML细胞系miR-136-5p、 CRNDE及微小染色体维持蛋白5(MCM5)的mRNA表达水平。构建敲低CRNDE的慢病毒载体并转染U937细胞,设为敲低CRNDE组(sh-CRNDE组)和阴性对照组(sh-NC组);分别转染miR-136-5p模拟物(miR-136-5p mimic)和miR-136-5p抑制物(miR-136-5p inhibitor)对U937细胞中的miR-136-5p进行过表达和敲低,设为miR-136-5p过表达组(miR-136-5p-mimic)、过表达阴性对照组(NC-mimic)、 miR-136-5p敲低组(miR-136-5p-inhibitor)和敲低阴性对照组(NC-inhibitor)。CCK-8法和细胞计数试验检测CRNDE和miR-136-5p对细胞增殖的影响,流式细胞术检测CRNDE和miR-136-5p对细胞周期和凋亡的影响。实时荧光定量PCR检测miR-136-5p、 CRNDE及MCM5的mRNA表达,Western blot法检测MCM5、 P53、 B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)和细胞周期蛋白A2(cyclin A2)的蛋白表达水平。结果 CRNDE在AML患者骨髓和细胞系中高表达。敲低CRNDE可以上调miR-136-5p,抑制MCM5 mRNA和蛋白表达,抑制细胞增殖,促进凋亡并使细胞周期阻滞在G1期。过表达miR-136-5p也可抑制MCM5核酸和蛋白水平表达。而敲低miR-136-5p则可以逆转以上作用。结论 CRNDE通过下调miR-136-5p和上调MCM5表达,进而促进U937细胞增殖并抑制其凋亡。

微小染色体维持蛋白5在骨肉瘤中的表达和意义

目的探讨微小染色体维持蛋白5（MCM5）在骨肉瘤中的表达特征和预后价值。方法用免疫组织化学二步法检测MCM5和细胞核相关抗原（Ki-67）在76例骨肉瘤和32例骨软骨瘤、24例正常骨组织中的表达，探讨其表达水平与临床病理特征的相关性，分析MCM5蛋白表达在骨肉瘤中的预后价值。结果MCM5和Ki-67在76例骨肉瘤组织中均有表达，在骨软骨瘤和正常骨组织中不表达，差异有统计学意义（P〈0．01）；MCM5阳性率与骨肉瘤等级相关（r=0．756，P〈0．01），与有丝分裂计数相关（r=0．643，P〈0．01），与其他临床病理参数无明显相关；MCM5与Ki-67阳性率正相关（r=0．725，P〈0．01），但显著高于后者（P〈0．01）；MCM5高表达组（〉62％）与低表达组（≤62％）生存时间差异有统计学意义（P〈0．05），MCM5阳性率与骨肉瘤预后相关。结论MCM5能反映骨肉瘤的恶性程度，MCM5阳性率越高，骨肉瘤的恶性程度越高；MCM5比Ki-67能检测出更多的骨肉瘤增殖细胞。

宫颈鳞状细胞癌预测指标的模型建立与分析

目的:通过检测HR-HPV感染、hTERC、c-myc基因扩增和MCM5蛋白在宫颈鳞状细胞癌及不同级别宫颈上皮内瘤变中的水平,筛选宫颈癌相关指标,建立回归模型用以预测宫颈鳞状细胞癌,并评估模型效果。方法:筛选初诊病理确诊宫颈鳞状细胞癌和CIN I、II、III级患者共200例作为研究对象,分别检测HR-HPV感染、hTERC、c-myc基因扩增及MCM5蛋白表达,用Logistic向后逐步回归的方法,筛选宫颈癌相关指标,建立回归模型预测宫颈鳞状细胞癌,并评估模型效果。结果:将HR-HPV负荷量及感染状况、hTERC、c-myc基因扩增和MCM5蛋白表达的检测数据绘制直方图,并进行Logistic向后逐步回归分析,得出hTERC、HR-HPV负荷量、MCM5回归系数分别为0.042、0.061和0.052,P值分别是0.024、0.005、0.005(P<0.05),HR-HPV感染状态和c-myc基因P值是0.856和0.682(P>0.05),被回归方程排除,提示hTERC(X_1)、HR-HPV负荷量(X_2)、MCM5(X_5)与回归方程存在线性关系,即与宫颈鳞状细胞癌发生有关,由此建立回归模型Logit(P)=-66.283+0.042X_1+0.061X_2+0.052X_5。评估模型拟合优度和预测准确度,H-L检验P值=1(P>0.05),模型拟合效果好,Cox-Snell R^2=0.643,Nagelkerke R^2=0.958,模型预测准确度98.5%,模型预测准确性高。结论:由hTERC、HR-HPV负荷量和MCM5蛋白建立的回归模型拟合效果较好,对宫颈鳞状细胞癌的预测准确度较高,hTERC、HR-HPV负荷量和MCM5蛋白联合检测能够用于宫颈鳞状细胞癌的预测评估,对CIN患者的分流管理和预后评估、宫颈鳞癌患者的早期诊断均有较高临床价值。