黄柏碱调节MCP-1/CCR2信号通路对特应性皮炎大鼠炎症反应的影响

目的:探讨黄柏碱对特应性皮炎(Atopic dermatitis,AD)大鼠炎症反应的影响及其作用机制。方法:构建AD大鼠模型,大鼠分为正常组、模型组、黄柏碱低剂量组、黄柏碱高剂量组、黄柏碱+巨噬细胞趋化蛋白-1(Monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)组;给药结束后,各组大鼠做皮损评分,记录搔抓次数,HE染色观察皮肤组织病理变化,甲苯胺蓝染色测定肥大细胞数,ELISA试剂盒测定皮肤组织活性氧(Reactiveoxygenspecies,ROS)和血清免疫球蛋白(Immunoglobulins,IgE)、白介素-17(Interleukin,IL-17)、IL-6的含量,Western blot检测皮肤组织MCP-1、CC类趋化因子受体2(CC chemokinereceptor 2,CCR2)蛋白表达。结果:与正常组相比,模型组大鼠脱毛处皮肤发生溃疡、红斑,表皮和棘层增厚且有大量炎性细胞浸润,搔抓次数、肥大细胞数、ROS、IgE、IL-17、IL-6及MCP-1、CCR2蛋白表达水平增加(P<0.05);与模型组相比,黄柏碱低、高剂量组皮肤组织红斑、溃疡情况、炎性细胞浸润减少,未见脱屑,搔抓次数、肥大细胞数、ROS、IgE、IL-17、IL-6及MCP-1、CCR2蛋白表达水平依次降低(P<0.05);与黄柏碱高剂量组相比,黄柏碱+MCP-1组皮肤红斑、溃疡和炎性细胞浸润加重,搔抓次数、肥大细胞数、ROS、IgE、IL-17、IL-6及MCP-1、CCR2蛋白表达水平增加(P<0.05)。结论:黄柏碱可能通过抑制MCP-1/CCR2信号通路降低AD大鼠炎症反应。

MCP-1/CCR2信号轴在甲状腺乳头状癌合并桥本氏甲状腺炎患者中的表达及意义

目的分析单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)及CC趋化因子受体2(CC chemokine receptor 2,CCR2)在人甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)合并桥本氏甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis,HT)的表达,以探讨MCP-1/CCR2信号轴在HT-PTC发展过程中与PTC发生、发展相关的生物学作用。方法收集2013年6月至2014年6月在云南省第一人民医院乳腺及甲状腺肿瘤外科手术切除的人甲状腺新鲜组织(包括PTC组的癌组织、PTC-HT组的癌组织及病理证实的HT组的新鲜组织标本)及患者的外周血血清。运用实时荧光定量PCR、流式细胞微球芯片捕获技术(cytometric bead array,CBA)分析MCP-1/CCR2在人PTC、PTC-HT及HT组织和外周血血清的表达,表达谱基因芯片检测3组基因表达情况并进行多组差异基因筛选,构建共表达网络及显著性差异基因功能分析。结果①实时荧光定量PCR结果显示,CCR2 mRNA在HT甲状腺组织的表达水平(10.98±14.49)×10^(-3)明显高于PTC癌组织(2.63±4.97)×10^(-3)及PTC-HT癌组织[(3.77±4.65)×10^(-3),χ~2=3.78,P=0.03];PTC患者的CCR2 mRNA的表达水平与肿瘤直径呈负相关(P=0.01),与甲状腺球蛋白抗体(TGAb)及抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)呈正相关(P=0.03,P=0.01);②CBA结果显示PTC-HT组患者外周血血清MCP-1的表达水平为(64.76±96.08)pg/m L,高于其他两组,但差异无统计学意义(F=1.04,P=0.36);③表达谱基因芯片结果显示,MCP-1 mRNA的表达水平在3组中差异无统计学意义(P>0.05),CCR2 mRNA的表达在HT组较其他两组明显升高(P=0.014,FDR=0.082),共表达网络分析表明与CCR2表达相关的差异基因共有8个,显著相关性功能主要集中在与免疫相关的19项功能通路中。结论 MCP-1/CCR2信号轴在HT-PTC发展过程中与PTC的发生无协同互作相关性,CCR2可能通过与TGAb和TPOAb的正相关关系发挥作用。

MCP-1/CCR2信号轴在消化系统肿瘤发生发展中的研究进展

单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)/CC趋化因子受体2(CCR2)信号轴是指由趋化因子MCP-1与其特异性受体CCR2相互作用构成的一个与细胞间信息传递和细胞迁移有密切关系的耦联分子对,在肿瘤细胞以及肿瘤微环境中的多种细胞中表达,对肿瘤的发生发展起重要作用。在消化系统肿瘤发生发展过程中,MCP-1/CCR2信号轴的作用越来越受到国内外的关注,相关分子机制研究涉及肿瘤相关巨噬细胞的募集和极化,新生血管生成及异常免疫反应等,可为消化系统肿瘤防治提供新的思路。本文就近年来对MCP-1/CCR2信号轴与消化系统肿瘤发生发展的研究进展进行综述。

芒果苷对自发性高血压大鼠交感神经形态学及MCP-1/CCR2信号通路的影响

目的 :通过观察芒果苷对自发性高血压大鼠交感神经形态学及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及其受体CCR2表达量的影响,探讨自发性高血压大鼠是否存在交感神经炎症损伤以及芒果苷可能的抗炎药效及机制。方法 :以8只10周龄正常血压对照大鼠(WKY)作为空白组,以40只同龄SHR大鼠作为研究对象,随机分为模型组、苯那普利组、芒果苷高剂量组、芒果苷中剂量组和芒果苷低剂量组。各组动物按每天给药10 m L/(kg·d)连续灌胃,灌胃给药2个月后停药,杀鼠前禁食12 h。结果 :各组大鼠交感神经均未见明显病理形态学改变;免疫组化检测结果显示:与空白对照组比较,模型组交感神经MCP-1、CCR2水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,各组给药大鼠交感神经组织中MCP-1、CCR2含量均有不同程度下降(P<0.05,P<0.01)。结论 :自发性高血压大鼠存在交感神经炎症损伤。芒果苷对自发性高血压大鼠交感神经组织病理形态学无显著影响,但可下调大鼠交感神经组织异常升高的炎症因子MCP-1、CCR2水平,对交感神经炎症损伤具有一定的保护作用。

电针对颈椎病大鼠椎间盘软骨细胞及MCP-1/CCR2信号通路的影响

目的:观察电针对颈椎病大鼠椎间盘软骨细胞及MCP-1/CCR2信号通路的影响。方法:将45只雄性SD大鼠,按照随机数字表法分为3组,假手术组、模型组和电针组,每组15只。除假手术组外均建立动静力失衡性颈椎病模型,并于造模后3个月开始电针干预双侧颈夹脊穴,30 min/次,1次/d,14 d为1个疗程。研究中通过电子透射电镜观察颈椎间盘软骨细胞的形态判定颈椎病造模是否成功;而后采用免疫组化检测颈椎间盘软骨细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的表达情况;接着采用实时聚合酶链式反应(Real time PCR)检测MCP-1/CCR2信号通路,观察电针对MCP-1/CCR2信号通路的影响。结果:1)假手术组的颈椎间盘软骨细胞表面较光滑,可见微绒毛样凸起,细胞整体形态上类似椭圆形,细胞核形态类似一个肾脏,且细胞核完整无破损,染色质均匀;而细胞外的基质中含有丰富且排列有序的胶原纤维;模型组中的颈椎间盘软骨细胞出现退行性改变,其细胞表面的微绒毛样凸起明显减少,细胞核破损,染色质明显固缩,细胞外基质中的胶原纤维明显减少,排列无序。提示颈椎病造模成功。2)与假手术组比较,模型组和电针组大鼠TNF-α和IL-6表达均较密集,阳性表达增多( P <0.05),其中是电针组TNF-α和IL-6表达明显较模型组降低( P <0.05),提示电针能够抑制颈椎病大鼠椎间盘软骨细胞的TNF-α和IL-6表达。3)与假手术组比较,模型组和电针组颈椎间盘中MCP-1/GAPDH和CCR2/GAPDH均增高,差异有统计学意义( P <0.05);电针组与模型组比较,颈椎间盘中MCP-1/GAPDH和CCR2/GAPDH低于模型组,差异有统计学意义( P <0.05)。结论:电针可以抑制颈椎病大鼠椎间盘软骨细胞中TNF-α和IL-6表达,可能与抑制MCP-1/CCR2信号通路的激活有关。

抗纤益心方调节MCP-1/CCR2信号通路对扩张型心肌病大鼠心功能的影响

目的:探讨抗纤益心方调节单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)/趋化因子C-C-基元受体2(C-C-subunit receptor 2,CCR2)信号通路对扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy,DCM)大鼠心功能的影响。方法:取SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组、抗纤益心方(18.8 g·kg^(-1))组、抗纤益心方(18.8 g·kg^(-1))+空载(空载质粒)组、抗纤益心方(18.8 g·kg^(-1))+MCP-1过表达(MCP-1过表达质粒)组,模型组和给药干预组大鼠以腹腔注射阿霉素法诱导建立DCM模型,对照组大鼠于腹腔内注射等剂量生理盐水,以抗纤益心方(每天1次)和质粒(每周2次)分组干预3周后检测各组大鼠心功能指标左室舒张末期内径(left ventricular end diastolic diameter,LVEDD)、左室收缩末期内径(left ventricular end systolic diam⁃eter,LVESD)、左心射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、左室短轴缩短率(left ventricular short axis shortening rate,FS)、心脏指数、心肌组织病理形态及纤维化、血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子β1(TGF-β1)及MCP-1水平、心肌组织胶原[Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(Col-Ⅲ)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)]生成及MCP-1/CCR2通路相关蛋白表达。结果:与对照组相比,模型组大鼠心肌组织发生严重损伤,心脏指数、LVEDD、LVESD、胶原容积分数(CVF)、血清TNF-α、TGF-β1及MCP-1水平,心肌组织Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、α-SMA、MCP-1、CCR2蛋白表达显著升高(P<0.05),LVEF、FS显著降低(P<0.05)。与模型组比较,抗纤益心方组大鼠心肌组织损伤减轻,心脏指数、LVEDD、LVESD、CVF、血清TNF-α、TGF-β1及MCP-1水平,心肌组织Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、α-SMA、MCP-1、CCR2蛋白表达降低(P<0.05),LVEF、FS升高(P<0.05);抗纤益心方+空载组大鼠各指标无明显变化(P>0.05)。过表达MCP-1可减弱抗纤益心方对DCM大鼠各指标的影响。结论:抗纤益心方可通过降低MCP-1/CCR2信号通路活性而抑制DCM大鼠炎症,进而减轻大鼠心肌损伤及纤维化,改善其心功能。

MCP-1/CCR2轴介导NF-κB信号途径对致炎因素刺激的牙髓干细胞迁移的影响

目的:研究MCP-1/CCR2轴在介导NF-κB信号途径影响致炎因素刺激的牙髓干细胞(DPSCs)迁移的分子机制。方法:取SD大鼠进行DPSCs原代培养,流式细胞仪鉴定后建立DPSCs细胞LPS炎症模型,Western blot和Q-PCR检测各组DPSCs中MCP-1、CCR2表达,NF-κB通路激活剂TNF-α和NF-κB通路抑制剂BMS-345541作用炎症DPSCs,免疫荧光检测炎症DPSCs中P65的活化水平,划痕实验检测DPSCs迁移能力。结果:LPS诱导处理的DPSCs组显示MCP-1、CCR2基因积分光密度高于正常组,TNF-α处理DPSCs组显示MCP-1、CCR2基因积分光密度高于LPS诱导处理组和NF-κB通路抑制剂BMS-345541处理组,TNF-α处理DPSCs能促进划痕面积的愈合,且比NF-κB通路抑制剂BMS-345541处理组效果更明显。结论:在炎症状态下DPSCs表达MCP-1、CCR2基因较高,NF-κB信号途径的激活可以加强这一表达,促进DPSCs的横向迁移能力。

瑞香素调节MCP-1/CCR2通路对骨关节炎大鼠软骨细胞焦亡的影响

目的 探讨瑞香素(DAPH)调节MCP-1/CCR2信号轴对骨关节炎(OA)大鼠软骨细胞焦亡的影响。方法 通过切除前交叉韧带、内侧半月板建立OA大鼠模型,并随机分为OA组、DAPH低剂量(DAPH-L,30 mg/kg)组、DAPH高剂量(DAPH-H,90 mg/k)组、DAPH-H+CCL2(5 ng CCL2)组以及塞来昔布(20 mg/kg)组,并以仅打开关节腔的10只大鼠为假手术组,影像学分析骨密度值(BMD)、骨小梁数(Tb-N)以及骨体积分数(BV/TV);ELISA检测各组血清中白细胞介素(IL)-1β和IL-18水平;HE、番红检测软骨组织形态学变化;qRT-PCR检测软骨组织焦亡相关(ASC、NLRP3、Caspase-1)的基因表达;Western blot检测软骨组织MCP-1、CCR2蛋白表达。结果 与假手术组相比,OA组BMD、Tb-N、BV/TV降低,血清中IL-1β和IL-18水平、软骨组织ASC、NLRP3、Caspase-1 mRNA、MCP-1、CCR2蛋白表达增加(P<0.05);与OA组相比,DAPH-L组、DAPH-H组、塞来昔布组BMD、Tb-N、BV/TV增加,血清中IL-1β和IL-18水平、软骨组织ASC、NLRP3、Caspase-1 mRNA、MCP-1、CCR2蛋白表达降低,且DAPH-L组分别与DAPH-H组、塞来昔布组差异有统计学意义(P<0.05),但DAPH-H组、塞来昔布组间差异无统计学意义(P>0.05);与DAPH-H组相比,DAPH-H+CCL2组BMD、Tb-N、BV/TV降低,血清中IL-1β和IL-18水平、软骨组织ASC、NLRP3、Caspase-1 mRNA、MCP-1、CCR2蛋白表达增加(P<0.05)。结论 DAPH通过调节MCP-1/CCR2信号轴减少OA大鼠软骨细胞焦亡。

乌头汤对CIA大鼠MCP-1/CCR2/ERK1/2信号的作用

目的:研究乌头汤对胶原诱导关节炎大鼠体内MCP-1/CCR2/ERK1/2信号的影响。方法:50只SD大鼠,随机选10只为正常组,剩下40只造胶原诱导关节炎模型,造模成功后随机分成模型组、乌头汤低剂量组(3.75 g·kg^(-1)·d^(-1))、乌头汤高剂量组(7.5 g·kg^(-1)·d^(-1))和甲氨蝶呤组(1 mg·kg^(-1)·w^(-1)),灌胃给药28 d后取材。采用ELISA法检测大鼠血清中单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)的含量,免疫组织化学法检测大鼠踝关节中MCP-1的表达水平,利用Western Blotting检测大鼠踝关节中CC趋化因子受体2(CC chemokine receptor 2,CCR2)和细胞外信号调节激酶1/2(extracellular-signal-regulated kinases 1/2,ERK1/2)及其磷酸化形式的表达水平。结果:乌头汤能显著降低胶原诱导关节炎大鼠血清及踝关节中MCP-1的含量,同时能够显著降低模型大鼠踝关节中CCR2的含量及ERK1/2的磷酸化水平,但对总的ERK1/2没有明显影响。结论:乌头汤具有下调胶原诱导关节炎大鼠体内MCP-1/CCR2/ERK1/2信号的作用。

MCP-1及CCR2在初诊弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及临床意义

目的:分析MCP-1及CCR2在初治弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)组织中的表达,并评估其与临床病理特征和预后的相关性。方法:回顾性收集2017年1月至2022年5月期间蚌埠医学院第一附属医院血液科确诊及治疗的141例初治DLBCL患者的临床特征、病理学资料,通过免疫组化染色检测MCP-1及CCR2在初治DLBCL患者组织中的表达情况,分析其与患者的临床特征、预后及生存的关系。结果:MCP-1及CCR2的表达与DLBCL患者Ann Arbor分期晚、IPI评分高、乳酸脱氢酶(LDH)升高、Ki-67指数高及疗效差有关,与其他病理学参数(如性别、年龄、β2-微球蛋白、BCL-2、BCL-6、Hans分型、首发部位、有无B症状、骨髓是否受累)均无显著相关性。生存曲线分析显示,MCP-1或CCR2阳性组与阴性组OS及PFS具有统计学差异,且与预后不良有关。单因素Cox回归法分析结果显示,β2-微球蛋白、Ki-67指数、IPI评分、MCP-1、CCR2表达水平对患者的PFS和OS有影响,疗效不佳的患者的PFS和OS明显缩短(P<0.05),性别、年龄、LDH、BCL-2、BCL-6、Hans分型、肿瘤原发部位、有无B症状、骨髓是否受累、Ann Arbor分期对患者的PFS及OS无影响(P>0.05)。多因素分析结果表明,β2-微球蛋白高表达、Ki-67指数高、IPI评分高、MCP-1、CCR2高表达水平及疾病缓解的深度是患者预后不良的独立影响因素(P<0.05)。结论:MCP-1或CCR2在初治DLBCL中表达率高,且与DLBCL患者Ann Arbor分期、IPI评分、LDH及Ki-67指数相关预后差的临床指标有关,是影响PFS和OS的不良预后因素。

芒果苷通过抑制MCP-1/CCR2信号通路减轻自发性高血压大鼠心脏炎症损伤

高血压是一种低度炎症状态的疾病,通常伴有心脏炎症。芒果苷(MGF)是一种天然糖基蒽酮,具有很强的抗炎活性。然而,MGF对高血压患者心脏炎症损伤的作用尚不清楚。本文研究MGF对自发性高血压大鼠(SHRs)心脏炎症损伤的保护作用及其机制。采用10周龄雄性SHRs和10周龄正常雄性Wistar-Kyoto(WKY)大鼠,对SHRs使用10、20、40 mg/kg剂量的MGF,连续8周。测量其收缩压(SBP)水平,采集心脏组织进行形态学、免疫组化、ELISA、western blot和实时反转录PCR分析。结果表明模型组大鼠收缩压水平均较对照组显著升高,SHRs自发升高收缩压水平,各剂量MGF对收缩压水平无显著影响。模型组大鼠心脏组织形态学结果显示有明显的炎症性损伤,MGF对这种损伤有显著的抑制作用。同时,MGF显著抑制了SHRs IL-6和TNF-α含量的升高。此外,MGF还显著抑制了SHRs MCP-1、CCR2蛋白以及其mRNA表达的增加。研究表明MGF并不会降低SHRs大鼠的SBP水平,但MGF对SHRs大鼠的心脏炎症损伤具有保护作用,这可能是因为MGF部分抑制了MCP-1/CCR2信号通路表达的原因。

黄连解毒汤对动脉粥样硬化大鼠MCP-1/CCR2 mRNA表达的干预作用

目的研究黄连解毒汤对动脉粥样硬化大鼠主动脉组织MCP-1/CCR2mRNA表达的影响。方法建立动脉粥样硬化大鼠模型,随机分成正常对照组、模型对照组和黄连解毒汤低,中,高剂量组,阿托伐他汀组,用RT-PCR方法检测各实验组大鼠主动脉组织MCP-1,CCR2 mRNA表达。结果与模型组相比,黄连解毒汤中,高剂量组及阿托伐他汀组的MCP-1 mRNA、CCR2 mRNA表达明显降低,结果有显著性差异(P<0.05～0.01)。结论黄连解毒汤能下调MCP-1,CCR2 mRNA在主动脉的表达,减少局部炎症反应,减轻血管的损害。

MCP-1/CCR2在老年高血压不同证型中的表达

目的观察单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及其受体人CC趋化因子受体-2(CCR2)在老年高血压不同证型中的表达情况。方法 90例高血压患者随机分为肝阳上亢型、肝火上炎型、肝肾阴虚型各30例,选择30例健康人血清为对照组,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清MCP-1浓度,应用流式细胞仪检测单核细胞表面CCR2的表达。结果肝火上炎组、肝阳上亢组、肝肾阴虚组血清MCP-1水平和单核细胞表面CCR2表达率均高于健康对照组,且肝肾阴虚组高于肝火上炎组和肝阳上亢组,差异均有统计学意义(P<0.05和P<0.01)。结论 MCP-1和CCR2可能参与了不同证型高血压的发生发展过程,且随着病程的延长、病情的加重,MCP-1/CCR2的生成也就越多。

肾间质泡沫细胞MCP-1/CCR2的表达与肾小管-间质损害的关系

目的:检测Alport综合征、膜增生性肾小球肾炎、局灶节段硬化性肾小球肾炎、特发性膜性肾病及IgA肾病患者肾间质区域泡沫细胞浸润与MCP-1/CCR2蛋白的表达及小管-间质损害的相关性。方法:选取诊断明确的Alport综合征患者5例、膜增生性肾小球肾炎患者28例、局灶节段硬化性肾小球肾炎患者35例、特发性膜性肾病患者36例、IgA肾病患者34例作为研究对象。采用免疫组织化学法检测各例患者肾间质区域(除肾小管)MCP-1与CCR2的表达并分析其与肾小管-间质损害积分的相关性。结果:(1)肾小球疾病患者肾间质区域浸润的泡沫细胞上均可见MCP-1和CCR2蛋白的同时表达。(2)在各类原发性肾小球疾病患者中,泡沫细胞浸润组肾间质区域MCP-1和CCR2蛋白的表达明显高于无泡沫细胞组(P<0.05)。(3)MCP-1和CCR2蛋白的阳性表达值与肾小管-间质损害积分呈正相关(P<0.05)。结论:各种病理类型的肾小球疾病间质区域浸润的泡沫细胞可同时分泌产生MCP-1和CCR2蛋白,参与了肾小管-间质损害的发生。抑制泡沫细胞的浸润和阻断MCP-1/CCR2通路可延缓肾脏疾病的进展。

黄连解毒汤对动脉粥样硬化大鼠MCP-1/CCR2通路mRNA表达的干预作用

目的研究黄连解毒汤对动脉粥样硬化大鼠主动脉组织MCP-1/CCR2通路mRNA表达的影响。方法建立动脉粥样硬化大鼠模型,随机分成正常对照组、模型对照组和黄连解毒汤低,中,高剂量组,阿托伐他汀组,用RT-PCR方法检测各实验组大鼠主动脉组织MCP-1,CCR2mRNA表达。结果与模型组相比,黄连解毒汤组及阿托伐他汀组MCP-1/CCR2mRNA表达明显降低,结果有显著差异。结论黄连解毒汤能下调MCP-1,CCR2mRNA在主动脉的表达,减少局部炎症反应,减轻对血管的损害。

MCP-1/CCR2与肉鸡腹水综合征肺动脉高压的关系研究

为了进一步研究肉鸡腹水综合征的免疫炎症机理,试验以腹水肉鸡为研究对象,采用石蜡切片和实时荧光定量PCR技术研究单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）及其受体CCR2在血管重构中的作用。结果表明：腹水肉鸡肺脏组织中可见血管周围炎性细胞的浸润,同时病鸡肺脏组织中趋化因子MCP-1及其受体CCR2水平升高。说明趋化因子MCP-1及其受体CCR2参与了腹水肉鸡肺动脉高压的发生和发展。

MCP-1及其受体CCR2与心血管疾病的研究进展

MCP-1是G蛋白耦联受体CCR2的配体，一种单核细胞趋化因子，也是一种免疫、炎症调节因子。在体内具有广泛的生物学功能，在多种心血管疾病的发生、发展中起着重要作用。MCP-1及CCR2受体有望成为临床上新的治疗靶点。

基质金属蛋白酶-9和细胞外信号调节激酶1/2在哮喘中的表达及其与CCR3/RANTES信号轴的关系

目的探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)在哮喘中的表达水平,并进一步探讨两者与CCR3/RANTES信号轴的关系。方法复制小鼠哮喘模型,分为对照组、哮喘组、干预组。3组小鼠处死后进行肺泡灌洗,收集肺泡灌洗液,对各细胞进行计数,取右肺叶进行苏木精-伊红染色法染色,免疫荧光法检测CCR3在支气管上皮细胞的表达。体外实验分别用活化正常T细胞表达分泌的调节蛋白(RANTES)及RANTES+SB328437刺激16HBE细胞,明胶酶谱法检测MMP-9的活性;用RANTES及RANTES+PD98059(ERK1/2阻断剂)刺激16HBE细胞,Western blot检测ERK1/2、p ERK1/2及MMP-9的表达水平。结果体内实验结果证明成功复制哮喘小鼠模型。通过苏木精-伊红染色法及计数肺泡灌洗液中各细胞数量发现,哮喘组小鼠气道周围有明显的炎症细胞聚集,而干预组小鼠气道周围的炎症细胞明显减少。通过免疫荧光实验发现,小鼠支气管上皮细胞大量表达趋化因子CCR3。体外实验结果发现,哮喘组小鼠MMP-9的活性升高,而干预组MMP-9的活性下降。用外源性RANTES刺激16HBE细胞后发现,RANTES可以诱导高水平MMP-9的表达,而加入ERK1/2阻断剂PD98059后30 min,检测MMP-9的表达量明显降低。结论在哮喘疾病中,CCR3/RANTES信号轴通过ERK通路来调节MMP-9的表达。

MCP-1、CCR2与动脉粥样硬化研究进展

动脉粥样硬化(AS)是一种慢性炎症性疾病,近年来越来越多的证据表明单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及其受体CCR2在AS发生和发展过程中具有重要的意义。

抑制S1PR2的活性可下调高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞SphK1和MCP-1的表达

目的观察高糖及1-磷酸鞘氨醇受体2(S1PR2)特异性拮抗剂JTE-013对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞(GMC)鞘氨醇激酶1(Sph K1)、S1PR2、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)表达的影响。方法将培养的大鼠GMC分为正常糖对照组(NG,含5.5 mmol/L葡萄糖)、甘露醇渗透压对照组(HM,含5.5 mmol/L葡萄糖、24.5 mmol/L甘露醇)、高糖组(HG,含30 mmol/L葡萄糖)、JTE-013干预组(HJ,含30 mmol/L葡萄糖、10μmol/L JTE-013)。实时定量PCR检测培养0、12、24、48 h的细胞中Sph K1、S1PR2、MCP-1 mRNA的表达,ELISA检测培养细胞上清中MCP-1的蛋白表达。结果与NG组相比,高糖培养下的大鼠GMC中Sph K1、S1PR2 mRNA的表达在12 h下降,之后随着时间延长基因的表达量升高,48 h达最高。MCP-1 mRNA的表达随培养时间的延长而升高,12 h表达已升高,24 h表达为最高,48 h的表达下降。高糖诱导大鼠GMC的MCP-1蛋白分泌增加,呈时间依赖性。GMC经JTE-013处理后,高糖继续培养24 h,与HG组相比,HJ组Sph K1、S1PR2、MCP-1 mRNA及MCP-1蛋白的表达明显下降。结论抑制S1PR2的活性可引起高糖培养下的大鼠GMC中Sph K1、MCP-1表达下调。