4-酰胺基苯并噁唑酮类抗炎小分子化合物的合成及其对MD2蛋白的抑制活性研究

目的设计合成系列4-酰胺基苯并噁唑酮类化合物,并测定其体外抗炎活性,探究其与MD2蛋白的结合能力,以期发现高抗炎活性的新型MD2抑制剂。方法以3-硝基-2-氨基苯酚为原料,经过成环、还原、取代反应制得目标化合物,通过ESI-MS、^(1)H-NMR、^(13)C-NMR对其结构进行确证。建立脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症模型,Griess法测定细胞培养液中NO的释放量,ELISA法测定炎症因子IL-6的含量,评价化合物的体外抗炎活性;流式细胞术、bis-ANS小分子荧光光谱技术结合计算机模拟检测高活性化合物与MD2蛋白的结合能力及其作用方式。结果与结论合成了9个未见文献报道的新化合物,其结构均经ESI-MS、^(1)H-NMR和^(13)C-NMR确证。大多数化合物对NO、IL-6呈现出较好的抑制活性。尤其是化合物4b,在浓度为25μmol·L^(-1)时对NO抑制率为(72.5±3.16)%,对IL-6的抑制率为(48.5±2.83)%,与阳性药塞来昔布[NO抑制率(88.9±2.22)%,IL-6抑制率(45.1±3.90)%]相当;化合物4b可剂量依赖性竞争LPS与细胞膜表面受体的结合,竞争bis-ANS小分子荧光探针与rhMD-2蛋白的结合,是新型具有抗炎活性的MD2抑制剂。