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新型转录因子MDFIC的原核表达及多克隆抗体制备
被引量:
1
1
作者
刘兆宇
郭芬
+3 位作者
黄晓峰
孙丽敏
李月琴
周天鸿
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第2期49-53,共5页
小鼠MDFIC(MyoD family inhibitor domain containing)蛋白是一个新近发现的与HIC(Human I-mfa domain containing protein)高度同源的转录调控因子,可能在肌细胞的分化过程中起着重要的作用。为了深入研究MDFIC的功能,首先要制备抗MDFI...
小鼠MDFIC(MyoD family inhibitor domain containing)蛋白是一个新近发现的与HIC(Human I-mfa domain containing protein)高度同源的转录调控因子,可能在肌细胞的分化过程中起着重要的作用。为了深入研究MDFIC的功能,首先要制备抗MDFIC的多克隆抗体。首先采用PCR方法扩增出编码MDFIC的cDNA片段,然后将其克隆至原核表达载体pGEX-4T-3,并在大肠杆菌BL21中进行诱导表达。SDS-PAGE和Western blotting检测鉴定表达产物。亲和层析技术对融合蛋白进行纯化,纯化后的目的蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体。间接ELISA检测抗体效价达1∶640 000以上,检测证明抗体效价较高。此外,Western blotting结果显示,该抗体可特异性识别真核细胞外源性及内源性的MDFIC蛋白。MDFIC多克隆抗体的成功制备为进一步研究MDFIC的功能以及进一步探索肌细胞的发生分化机制提供了重要工具。
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关键词
mdfic
转录因子
多克隆抗体
肌细胞分化
原文传递
题名
新型转录因子MDFIC的原核表达及多克隆抗体制备
被引量:
1
1
作者
刘兆宇
郭芬
黄晓峰
孙丽敏
李月琴
周天鸿
机构
暨南大学基因工程药物国家工程研究中心
广东药学院生命科学与生物制药学院
出处
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第2期49-53,共5页
基金
高等学校博士学科点专项科研基金资助项目(20060559006)
文摘
小鼠MDFIC(MyoD family inhibitor domain containing)蛋白是一个新近发现的与HIC(Human I-mfa domain containing protein)高度同源的转录调控因子,可能在肌细胞的分化过程中起着重要的作用。为了深入研究MDFIC的功能,首先要制备抗MDFIC的多克隆抗体。首先采用PCR方法扩增出编码MDFIC的cDNA片段,然后将其克隆至原核表达载体pGEX-4T-3,并在大肠杆菌BL21中进行诱导表达。SDS-PAGE和Western blotting检测鉴定表达产物。亲和层析技术对融合蛋白进行纯化,纯化后的目的蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体。间接ELISA检测抗体效价达1∶640 000以上,检测证明抗体效价较高。此外,Western blotting结果显示,该抗体可特异性识别真核细胞外源性及内源性的MDFIC蛋白。MDFIC多克隆抗体的成功制备为进一步研究MDFIC的功能以及进一步探索肌细胞的发生分化机制提供了重要工具。
关键词
mdfic
转录因子
多克隆抗体
肌细胞分化
Keywords
mdfic transcriptional factor polyclonal antibody myogenic differentiation
分类号
Q819 [生物学—生物工程]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
新型转录因子MDFIC的原核表达及多克隆抗体制备
刘兆宇
郭芬
黄晓峰
孙丽敏
李月琴
周天鸿
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010
1
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