虎杖苷调节Akt/MDM2/p53信号通路对胆囊癌细胞增殖、迁移和细胞周期的影响

目的探讨虎杖苷(PD)调节蛋白激酶B/原癌基因MDM2/抑癌基因p53信号通路对胆囊癌细胞增殖、迁移和细胞周期的影响。方法以人胆囊癌细胞株(GBC-SD)为研究对象,体外培养人胆囊癌细胞株(GBC-SD),使用浓度为10~160 mmol/L的虎杖苷处理细胞24、48、72 h,采用CCK-8法检测细胞的增殖能力,确定最佳实验浓度。将GBC-SD细胞分为对照组(Control组)、虎杖苷低、中、高浓度组(PD-L组、PD-M组、PD-H组)、虎杖苷+Akt激活剂组(PD+SC79组),Transwell小室法评价细胞的迁移能力,Hoechst染色观察细胞的凋亡,流式细胞术检测细胞周期与细胞凋亡,Western blot检测Akt、MDM2、p53磷酸化水平,建立荷瘤小鼠模型评价虎杖苷对胆囊癌肿瘤生长的影响。结果浓度为10~160 mmol/L的虎杖苷处理细胞24 h,可显著抑制GBC-SD细胞的增殖活性,选择10、20、40 mmol/L的虎杖苷进行后续实验;与Control组比较,PD-L组、PD-M组、PD-H组GBC-SD细胞的迁移数、细胞凋亡率、G2/M期细胞比例及S期细胞比例、P-Akt、P-MDM2蛋白表达显著降低,G0/G1期细胞比例、P-p53蛋白表达显著升高,且呈浓度依赖性(P<0.05);与PD-H组比较,PD+SC79组GBC-SD细胞的迁移数、细胞凋亡率、G2/M期细胞比例及S期细胞比例、P-Akt、P-MDM2蛋白表达显著升高,G0/G1期细胞比例、P-p53蛋白表达显著降低(P<0.05);虎杖苷干预治疗后,小鼠移植瘤的生长速度显著降低(P<0.05)。结论虎杖苷可以通过调节Akt/MDM2/p53信号通路使细胞周期阻滞,抑制胆囊癌细胞增殖、迁移。

癌基因MDM2与异构酶PIN1在瘤细胞中的表达

目的 研究MDM 2癌基因产物与脯氨酰异构酶PIN1之间的相互关系。方法 在U2OS骨髓瘤细胞中分别用MDM2对PIN1的单抗通过免疫沉淀法分离出MDM2或PIN1的结合蛋白 ,再用Westernblot对蛋白进行分离。结果 U2OS骨髓瘤细胞的蛋白天然提取物中MDM 2与P1 8的共沉淀物移行位置与用PIN1单抗检测的免疫沉淀物的移行位置相同。同时PIN1与P90的共沉淀物的移行位置与用MDM2单抗检测的免疫沉淀物的移行位置相同。结论 U2OS骨髓瘤细胞中MDM2与PIN1形成稳定的复合物 ,这可能是MDM2在调控G2 /M过渡点的重要机制之一。

癌基因MDM2与异构酶PIN1的交互作用

目的 为研究 MDM2癌基因产物与脯氨酰异构酶 PIN1之间的相互关系。方法 在 U2 0 S骨髓瘤细胞中分别用 MDM2或 PIN1的单抗通过免疫沉淀法分离出 MDM2或 PIN1的结合蛋白 ,再用 Western blot对蛋白进行分离。结果 U2 0 S骨髓瘤细胞的蛋白天然提取物中 MDM2与 P18的共沉淀物移行位置与用 MIN1单抗检测的免疫沉淀物的移行位置相同。同时 PIN1与 P90的共沉淀物的移行位置与用 MDM2单抗检测的免疫沉淀物的移行位置相同。结论 U2 0 S骨髓瘤细胞中 MDM2与 PIN1形成稳定的复合物 ,这可能是 MDM2在调控 G2 /

鼠双微体基因2多态性309T/G与非小细胞肺癌易感性关系的Meta分析

目的：综合评价鼠双微体基因2（murine doubleminute2，MDM2）启动子309位点的单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNP）与非小细胞肺癌易感性的关系。方法：应用计算机检索Cochrane Library、PubMed、EMBase、中国知网、万方和维普等数据库，按照文献纳入标准和排除标准选择研究文献，评价文献质量，并提取资料。采用STATA12．0软件进行Meta分析，计算MDM2SNP309T／G与qH,细胞肺癌易感性关系的合并比值比（oddsratio，OR），并进行亚组分析、敏感性分析和发表偏倚检验。结果：最终纳入8项病例对照研究，共包括5343例患者和6652例正常对照。Meta分析结果显示，MDM2SNP309GG显著增加了tbd,细胞肺癌的发病风险[TTwGG，OR=0．77，95％可信区间（confidence interval，CI）=0．62～0．96；GT珊GG，0R=0．83，95％CI：0．75～0．92：TT＋GTwGG，OR=0．82，95％CI=0．75～0．911。在种族亚组分析中，MDM2SNP309GG显著增加了亚洲人群非小细胞肺癌的发病风险[TTVSGG，OR=0．62，95％CI=0．52～0．73；GT vs GG，OR=0．78，95％CI=0．67～0．90；TTvsGG＋GT，OR=0．71，95％CI=0．59～0．86；TT＋GTwGG，OR=0．73，95％CZ=0．63～0．84]。在性别亚组分析中，MDM2SNP309GG显著增加了女性非小细胞肺癌的发病风险[TTVSGG，OR=0．70，95％C7=0．54～0．91；GTVSGG，OR=0．69，95％C7=0．54～0．90；TT＋GTV8GG，OR=0．70，95％CI=0．55～0．891。结论：MDM2SNP309GG是非小细胞肺癌易感性增加的危险因素，尤其是对于亚洲人群和女性人群。