实时定量逆转录PCR检测慢性淋巴细胞白血病MDM4基因mRNA的表达及其临床意义

本研究旨在探讨慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者鼠双微体4(MDM4)基因mRNA的表达情况及其在CLL预后中的意义。采用SYBR Green I荧光染料行实时定量逆转录PCR(qRT-PCR)方法检测66例CLL患者白血病细胞MDM4 mRNA的表达,以β-actin为内参照物,以2(-△Ct)方法计算MDM4的相对定量值,组间分析采用秩和检验。结果显示,66例CLL患者MDM4 mRNA相对表达水平的中位数为0.037098(0.088245-0.014875);具有P53基因缺失的CLL患者,其MDM4的表达明显高于无P53基因缺失的患者(0.13167 vs 0.030927)(p<0.001),具有P53基因突变的CLL患者MDM4 mRNA表达也明显高于无P53基因突变的患者(0.13167 vs0.03077)(p<0.001);此外,MDM4 mRNA的表达水平还与Binet分期(p=0.044)和ATM基因缺失(p=0.046)显著相关,但与血清乳酸脱氢酶(LDH)(p=0.216)、β2-微球蛋白(β2-MG)(p=0.314)、胸苷激酶(TK)1(p=0.300)、ZAP-70(p=0.559)、CD38(p=0.513)和免疫球蛋白重链可变区(IgVH)基因突变状态(p=0.333)无显著相关性。结论:MDM4的表达与P53基因异常关系密切,与Binet分期和ATM基因缺失相关,MDM4可能在CLL的预后中具有重要价值。

干扰MDM4基因对卵巢癌细胞顺铂耐药性的影响

目的:探讨沉默鼠双微体4(MDM4)基因对卵巢癌细胞顺铂(DDP)耐药性的影响。方法:采用qRT-PCR法检测卵巢癌细胞株SKOV3、A2780及其DDP耐药细胞株SKOV3/DDP、A2780/DDP中MDM4的表达情况。在A2780/DDP细胞中分别转染MDM4 siRNA及阴性对照,分别记为MDM4 siRNA组和阴性对照组,将未转染的A2780/DDP细胞记为空白对照组,采用qRT-PCR和Western blot法检测转染效率,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,采用Western blot法检测t-PI3K、p-PI3K、t-AKT和p-AKT蛋白的表达水平。结果:SKOV3/DDP、A2780/DDP细胞与SKOV3、A2780细胞比较,MDM4的表达水平升高(P<0.05)。MDM4 siRNA组与空白对照组和阴性对照组相比,MDM4 mRNA和蛋白表达水平降低,细胞增殖抑制率升高,p-PI3K和p-AKT蛋白表达水平降低,IC 50降低(P<0.05)。结论:沉默MDM4基因能够降低A2780/DDP细胞对DDP的耐药性,其作用机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路的激活有关。

MDM4小分子抑制剂的研究进展

MDM4是肿瘤抑制蛋白P53最重要的负性调控因子之一,研究发现MDM4在多种肿瘤中异常扩增或过度表达,如乳腺癌、视网膜母细胞瘤等。肿瘤组织内异常扩增的MDM4通过直接抑制P53的转录功能和(或)降低P53的稳定性抑制P53蛋白的抗肿瘤活性,进而促进肿瘤细胞的增殖。近年来MDM4作为一种潜在的抗肿瘤治疗靶点受到广泛关注,同时靶向MDM4的小分子抑制剂进展迅速。本文就MDM4的生物学特征及MDM4小分子抑制剂的研究进展进行综述,为针对MDM4的肿瘤治疗药物的研究与开发提供一些参考。