中药复方熄风胶囊对难治性癫痫大鼠多药耐药基因MDR1mRNA表达的影响

目的探讨中药复方熄风胶囊对氯化锂—匹罗卡品致难治性癫痫模型大鼠脑组织MDR1mRNA表达的影响。方法建立氯化锂—匹罗卡品癫痫大鼠模型。实验大鼠随机分为8组:正常对照组(空白组)、模型对照组(模型组)、熄风胶囊低剂量组(熄低组)、熄风胶囊中剂量组(熄中组)、熄风胶囊高剂量组(熄高组)、卡马西平治疗组(CBZ组)、熄风胶囊中剂量+卡马西平组(熄卡组)、熄风胶囊中剂量+1/2卡马西平组(熄卡低组)。熄低、中、高组分别予熄风胶囊0.33 g、0.66 g、0.99 g,浓缩剂2 m L;CBZ组予CBZ 20 mg/kg;熄卡、熄卡低组分别予熄风胶囊0.66 g和CBZ20 mg/kg、CBZ 10 mg/kg;模型组和空白组分别予生理盐水2 m L。每天上午灌胃一次,共持续60天。给药结束后检测各组大鼠脑组织MDR1mRNA的表达。结果与空白组比较,其余各组的MDR1mRNA的基因表达均上调(P<0.05);与模型组比较,熄中组、熄卡低组、熄卡组和CBZ组的MDR1mRNA表达均下降(P<0.05);与CBZ组相比,熄卡低组和熄卡组的基因表达均明显降低(P<0.05)。结论熄中组、熄卡低组、熄卡组、CBZ组对MDR1mRNA表达有抑制作用,且熄卡低组和熄卡组对MDR1mRNA表达的抑制作用比单用卡马西平作用更明显。

累积高剂量照射对体外培养的小细胞肺癌细胞系的总RNA及其多药耐药基因的影响

观察累积高剂量外照射对小细胞肺癌NCI H4 4 6细胞系的总RNA及其MDR1mRNA的影响。采用GWGP80型远距离60Co治疗机对进入指数生长期的NCI H4 4 6小细胞肺癌细胞系进行分次外照射 ,每次 2Gy ,累积总剂量为 5 0Gy。用Trizol分别提取未照射和已完成全部外照射剂量的NCI H4 4 6细胞系的总RNA。通过RT PCR ,琼脂胶电泳 ,Gelbase电脑软件计算电泳条带的平均OD值 (OD值愈大 ,表示产物愈多 ) ,求两组细胞的MDR1DNA与其β actinDNA的平均OD值的比来确定两组细胞MDR1mRNA表达的高低。结果显示 ,在相同细胞数和相同体积的条件下 ,未照射组和照射组细胞总RNA的浓度分别为 2 5 9μg/ml和 16 6 μg/ml;未照射组细胞MDR1DNA/ β actinDNA为 1 0 78,照射组为 1 338。由此推断MDR1mRNA表达增加。研究表明 ,对小细胞癌细胞系NCI H4 4 6进行累积高剂量外照射可抑制其总RNA的生物合成 ;同时可提高其MDR1mRNA的表达水平。提示累积高剂量放射可能诱发多药耐药。

定量分析乳腺癌术后化疗前外周血多药耐药基因及其临床意义的研究

目的探讨乳腺癌肿瘤组织多药耐药基因产物P170与外周血多药耐药基因MDR1mRNA的表达及乳腺癌组织ER、PR、癌基因、Her-2之间的相关性及其临床意义。方法应用荧光定量RT-PCR及免疫组化法对32例乳腺癌组织标本P170蛋白表达阳性的病人（试验组）和11例乳腺癌组织标本P170蛋白表达阴性的病人（对照组）进行化疗前的外周血液MDR1mRNA及ER、PR、Her-2检测。结果乳腺癌组织中多药耐药基因产物P170表达阳性的病人中，外周血MDR1mRNA表达阳性者14例（43．75％），阴性18例（56．25％）；乳腺癌组织中多药耐药基因产物P170表达阴性的11例病人中，外周血MDR1mRNA表达阳性者6例（54．55％），阴性5例（45．45％）；P170阳性组外周血MDR1mRNA阳性表达率43．75％与P170阴性组外周血MDR1mRNA阳性表达率54．55％之间差异无相关性（Χ^2=0．383，P〉0．05）。P170阳性组Her-2阳性表达12例（37．50％），阴性20例（62．50％）；P170阴性组Her-2阳性表达2例（18．18％），阴性9例（81．82％）；P170阳性组Her-2阳性表达率37．50％与P170阴性组Her-2阳性表达率18．18％之间差异无显著性（Χ^2=1．391，P〉0．05）。P170阳性组ER表达阳性者13例（40．63％），阴性19例（59．37％）；P170阴性组ER阳性表达者7例（63．64％），阴性4例（36．36％）；P170阳性组ER阳性表达率40．63％与P170阴性组ER阳性表达率63．64％之间差异无相关性（Χ^2=1．742，P〉0．05）。P170阳性组PR阳性表达者20例（62．50％），阴性12例（37．50％）；P170阴性组PR阳性表达者4例（36．36％），阴性7例（63．64％）；P170阳性组PR阳性表达率62．50％与P170阴性组PR阳性表达36．36％之间差异无相关性（Χ^2=2．267，P〉0．05）。P170阳性组淋巴结转移者9例（28．12％），无淋巴结转移23例（71．88％）；P170阴性组淋巴结转移者5例（45．45％），无淋巴结转移6例（54．55％）；P170阳性组淋巴结转移率28．12％与P170阴性组淋巴结转移率45．45％之间差异无显著性（Χ^2=1．120，P〉0．05）。结论①无论肿瘤组织中P170阳性或阴性表达，乳腺癌病人化疗前外周血均能检出MDR1mRNA。②外周血耐药基因MDR1的动态检测可有利于指导乳腺癌的化疗和判断预后。

外照射对体外培养的小细胞肺癌细胞系的总RNA及多药耐药基因的影响

目的 观察分次外照射对NCI H4 4 6小细胞肺癌细胞系的总RNA及其MDR1基因的影响。方法 采用GWGP80型远距离6 0 Co治疗机对进入指数生长期的NCI H4 4 6小细胞肺癌细胞系进行分次外照射 ,每次 2Gy ,总剂量为 5 0Gy。用Trizol分别提取未照射和已完成全部外照射剂量的NCI H4 4 6细胞系的总RNA。通过RT PCR ,琼脂胶电泳 ,应用Gelbase电脑软件计算电泳条带的平均光密度值 (光密度值愈大 ,表示产物愈多 ) ,求两组细胞的MDR1DNA与其 β actinDNA的平均光密度值的比来确定两组细胞MDR1mRNA表达的高低。 结果在相同细胞数和相同体积的条件下 ,未照射组和照射组细胞总RNA的浓度分别为 2 5 9μg ml和 16 6 μg ml;未照射组细胞其MDR1DNA β actinDNA为 1 0 78,照射组为 1 338。结论 对NCI H4 4 6小细胞肺癌细胞系进行外照射可抑制其总RNA的生物合成 ;

Quantitative detection of peripheral MDR genes in breast cancer before chemotherapy and their clinical significances

Objective： To explore expressions of multidrug resistance gene （MDR） product P170 and peripheral blood MDR1 mRNA in breast cancer tissue and their clinical significances. Methods： Fluorescent quantitative RT-PCR and immunohistochemistry were used to detect peripheral blood MDR1 mRNA before chemotherapy in breast cancer tissue samples from 32 cases with P170 positive （trial group） and 11 cases with P170 negative （control group）. Results： There were 14 cases （43.75%） peripheral blood MDR1 mRNA positive and 18 cases （56.25%） negative in 32 cases P170 positive breast cancer patients, while there were 6 cases （54.55%） peripheral blood MDR1 mRNA positive and 5 cases （45.45%） negative in 11 cases P170 negative breast cancer patients; there wasn＇t a significance difference with peripheral blood MDR1 mRNA express rate in P170 positive （43.75%） group and P170 negative （54.55%） group （x2 = 0.383, P 〉 0.05）. There were 12 cases （37.50%） Her-2 positive and 20 cases （62.50%） negative in P170 positive group; there were 2 cases （18.18%） Her-2 positive and 9 cases （81.82%） negative in P170 negative group; there wasn＇t a significance difference with Her-2 positive rate in P170 positive group （37.50%） and P170 negative （18.18%） group （χ^2= 1.391, P 〉 0.05）. There were 13 cases （40.63%） ER positive and 19 cases （59.37%） negative in P170 positive group; there were 7 cases （63.64%） ER positive and 4 cases （36.36%） negative in P170 negative group; there wasn＇t a significance difference with ER positive rate in P170 positive group （40.63%） and P170 negative （63.64） group （χ^2 = 1.742, P 〉 0.05）. There were 20 cases （62.50%） PR positive and 12 cases （37.50%） negative in P170 positive group; there were 4 cases （36.36%） PR positive and 7 cases （63.64%） negative in P170 negative group; there wasn＇t a significance difference with PR positive rate in P170 positive group （62.50%） and P170 negative （36.36%） group （χ^2 = 2.267, P 〉 0.05）. There were 9 cases （28.12%） with lymphaden metastasis and 23 cases （71.88%） without lymphaden metastasis in P170 positive group; there were 5 cases （45.45%） with lymphaden metastasis and 6 cases （54.55%） without lymphaden metastasis in P170 negative group; there wasn＇t a significance difference with lymphaden metastasis rate in P170 positive group （28.12%） and P170 negative （45.45%） group （χ^2 = 1.120, P 〉 0.05）. Conclusion： 1） There were possibly MDR expressing infrequently in carcinoma tissue and peripheral blood before chemotherapy. 2） FQ-RT-PCR for detecting of peripheral blood MDR1 mRNA is special, sensitive and reliable. It can be used as new molecular biology diagnostic maker dynamic detecting peripheral blood MDR1 mRNA for regulating chemotherapy proposal and elevating chemotherapy effect.