MEKKl与胰腺癌恶性程度的相关性研究

目的：研究人不同类型胰腺癌培养细胞系以及其他肿瘤细胞系中MEKKl的表达水平与其增殖、运动功能以及侵袭转移能力之间的关系，为寻找和建立MEKKl高表达细胞筛选模型和临床诊断奠定基础。方法：利用RT-PCR方法和Western-blot方法检测人胰腺癌培养细胞系和其他肿瘤细胞系中MEKKl的mRNA和蛋白质表达水平。通过细胞划痕试验、改良MTT的细胞黏附实验、软琼脂集落生成实验以及细胞运动实验，观察MEKKl表达水平与细胞存活、增殖能力及侵袭转移能力的关系。结果：胰腺癌培养细胞系Bx-PC-3、SWl990、Copan-2中MEKKl的mRNA水平和蛋白质水平均高表达。MEKKl高表达细胞系的克隆形成、增殖、运动功能以及侵袭转移能力均增强。结论：胰腺癌细胞中MEKKl的表达水平与其恶性程度呈高度正相关。

基于MEKK1/SEK1/JNK1/AP-1通路探讨三七总皂苷对4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤模型的影响

目的:通过研究三七总皂苷对4T1乳腺癌荷瘤小鼠促分裂原激活的蛋白激酶的激酶1(MEKK1)/应激激活的蛋白激酶/细胞外信号调节的蛋白激酶(SAPK/Erk激酶,SEK1)/c-Jun氨基末端激酶1(JNK1)/激活蛋白-1(AP-1)通路的影响,探讨三七总皂苷抑制肿瘤的可能机制。方法:建立4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤模型,将48只造模成功的小鼠随机分为三七总皂苷低、中、高剂量组(10,20,40 mg·kg^-1)和模型组,每组12只,三七总皂苷各剂量组腹腔注射剂量为10 mL·kg^-1,模型组给予相同剂量的生理盐水,连续给药28 d。给药结束后分离肿瘤组织、称质量、切片、匀浆等,采用脱氧核苷酸末端转移酶(TdT)介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)染色检测肿瘤细胞凋亡;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肿瘤组织MEKK1,SEK1,JNK1,AP-1 mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤组织MEKK1,SEK1,JNK1,AP-1蛋白表达。结果:与模型组比较,三七总皂苷中、高剂量组的肿瘤质量明显下降(P<0.05);肿瘤细胞凋亡数量随三七总皂苷剂量的升高明显升高(P<0.05);三七总皂苷中、高剂量组肿瘤组织中MEKK1,SEK1,JNK1,AP-1 mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论:三七总皂苷对4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤模型具有抑制作用,其作用机制可能与激活MEKK1/SEK1/JNK1/AP-1信号通路有关。