Hydroxylation Polymorphisms of S─mephenytoin aDebrisoquin in Native Normal Chinese Zhuang MinorityVolunteers

S─mephenytoin and debrisoquin hydroxylation abilities were investigated in 118 normal Chinese Zhuang minority volunteers after co─administration po 100 mg racemic mephenytoin(MP)and 10 mg debrisoquin (DB). The ratio between S─and R─enantiomers of mephenytoin in urinewas determined by implication of GC─NPD and used as the measure of the drug hydroxylation. 2 ofthe 118 subjects had S/R ratios greater than 1.0 and were poor hydroxylators of S─mephenytoin. The frequency of S─mephenytoin poor metabolizers (PM) was 10.2%. No PM of debrisoquin was found in the volunteers. It indicated that there was no relationship between S─mephenytoin P(4′)─ hydroxylation and debrisoquin 4─hydroxylation polymorphisms in Chinese Zhuang Minority population. In addition, 16 of the 118 volunteers(4 PMs and 12 EMs of S-mephenytoin) were se─lected to conduct the elimination kinetic studies of racemic mephenytoin and debrisoquin in urine. The pharmacokinetic parameters of S─, R─mephenytoin, DB and 4─OH─DB were calculated.

我国正常志愿者S-美芬妥英(Mephenytoin)羟化代谢缺陷频发率及其与异喹胍羟化代谢表型的相关性研究

应用气相色谱法测定我国137名正常志愿者一次口服美芬妥英(100mg)和异喹胍(10mg)尿样中S/R美芬妥英比值和异喹胍/4-羟异喹胍比值。研究结果表明,137名志愿者中有20名为S-美芬妥英羟化代谢的弱代谢者(PMs),其缺陷频发率为14.6%,说明我国人群的S-美芬妥英羟化代谢缺陷频发率与日本人相近,但明显高于白种人。研究结果尚发现,137名志愿者有2例为异喹胍羟化代谢弱代谢者,其缺陷频发率为1.46%,并与S-美芬妥英羟化代谢表型不相关。这说明两药虽在体内均进行4-羟化代谢,但却被不同的细胞色素P_(450)羟化酶所催化和受不同酶基因所调控。

Determination of S/R ratio of mephenytoin in human urine by chiral HPLC and ultraviolet detection and its comparison with gas chromatography

目的：建立人尿中Ｒ，Ｓ美芬妥英的液相色谱手性分离与检测方法，用于ＣＹＰ２Ｃ１９酶活性的快速测定．方法：受试者口服消旋美芬妥英后的０－８ｈ尿液标本用二氯甲烷提取后用手性色谱柱进行分离，流动相为乙腈和水（１４∶８６，体积比），其中含有０．１％的冰醋酸和０．２％的三乙胺，流速为０．９ｍＬ·ｍｉｎ－１，紫外检测波长为２０７ｎｍ．结果：在选定的色谱条件下Ｒ，Ｓ美芬妥英能很好地分离，尿中其他物质无干扰．用外标法定量，线性范围在５０－５０００μｇ·Ｌ－１，最小检出浓度为１２．５μｇ·Ｌ－１，保留时间在９ｍｉｎ内．液相色谱分析结果和气相色谱分析具有良好的一致性．结论：该法样本制备简便、分析时间短、线性范围宽、干扰少、灵敏和准确。

高效液相色谱法检测人血浆中氟西汀及其代谢产物的浓度

目的 :建立一种快速测定人血浆中氟西汀及其代谢产物去甲氟西汀的反相高效液相色谱法。方法 :用正己烷 -乙腈(98∶2 )提取血浆样品中氟西汀、去甲氟西汀及氯丙帕明 (内标 ) ,在EclipseXDB -C8柱上 ,以 0 0 5mol·L-1磷酸二氢钾 -乙腈 -甲醇 (5 5∶40∶5 )为流动相进行分离 ,流速 1 2mL·min-1,于 2 2 6nm检测。结果 :线性范围为 10～ 5 0 0ng·mL-1,氟西汀和去甲氟西汀相对回收率分别为 99 1%～ 10 4 2 %和 98 2 %～ 10 0 3 % ,日内RSD分别为 4 1%～ 4 8%和 4 5 %～5 8% ,日间RSD分别为 3 5 %～ 5 9%和 4 9%～ 6 8%。结论 :本法简便、精密度高、重现性好 ,结果准确可靠。

手性毛细管色谱法测定人尿中美芬妥英对映体的含量及其在代谢分型中的应用

采用手性毛细管色谱柱和ＦＩＤ检测器建立了人尿中美芬妥英（ＭＰ）对映体的定量分析方法。尿样用二氯乙烷提取，用酸、碱洗涤得以纯化，测得各对映体的最低检测限为６０μｇ／Ｌ。在１１５～６９０μｇ／Ｌ浓度范围内，标准曲线呈良好的线性关系，ｒ＞０．９９，日内、日间精密度ＲＳＤ＜６．５％，Ｓ－ＭＰ的平均回收率为７４．４１％，Ｒ－ＭＰ的平均回收率为７３．７８％。并以ＭＰ为探针药物，对３２名志愿者的尿样进行了ＭＰ氧化代谢分型研究。

手性毛细管气相色谱法测定人尿中美芬妥英光学异构体含量的方法学研究

抗癫痫药美芬妥英(mephenytion,MP)是乙内酰脲的5位碳上被乙基和苯环取代的化合物。其中乙内酰脲环上的5位碳不对称,有旋光性。美芬妥英是由S-和R-两种对映体组成的混旋体。在人体内,主要通过两条途径进行代谢,并存在立体异构选择性。即R-MP主要通过脱甲基生成5-苯基-5-乙基乙内酰脲(norvanol,PEH);S-MP主要通过芳香基对位羟化生成3-甲基-5-(4′-羟基苯基)-5-乙基乙内酰脲(4′-OH-MP)(图1),小部分S-MP经去甲基生成S-PEH。

中国健康志愿者S－美芬妥英和苯妥英4’－羟化代谢的相关性研究

１６名汉族健康志愿者进行Ｓ－美芬妥英４’－羟化代谢分型，１３名为强代谢者（ＥＭｓ），３名为弱代谢者（ＰＭｓ）。口服苯妥英１００ｍｇ，应用ＨＰＬＣ法测定服药后２４ｈ尿中苯妥英和４’－羟苯妥英（４’－ＯＨ－ＰＨＴ）的排泄量。１３名Ｓ－美芬妥英强代谢者Ｌｇ苯妥英／４’－羟苯妥英比值为－２．１７±０．２６；３名弱代谢者为－２．２７±０．１０，两组无显著性差异Ｐ＞０．０５）。１６名受试者Ｓ－美芬妥英和苯妥英的羟化代谢比值无相关性（ｒ＝－０．１０８，Ｐ＞０．００５）。本文结果表明，Ｓ－美芬妥英和苯妥英虽同为乙内酰脲类抗癫痫药，化学结构和羟化反应均相似，但在人体内不属同一羟化途径代谢，无交叉代谢障碍。

中国人S－美芬妥英／奥美拉唑羟化代谢多态性的分子机制探讨

为探讨中国人Ｓ－美芬妥英／奥美拉唑氧化代谢多态性的分子机制，本文用多聚酶链式反应（ＰＣＲ）方法扩增出ＣＹＰ２Ｃ１９ｉｎｔｒｏｎ４／ｅｘｏｎ５特异的ＤＮＡ片段，并用限制性内切酶ＳｍａＩ进行酶切分析。研究结果表明，１６位健康志愿者（９名Ｓ－ＭＰＥＭｓ，７名Ｓ－ＭＰＰＭｓ）的ＣＹＰ２Ｃ１９存在ＳｍａＩ酶切位点的多态性，且与Ｓ－ＭＰ羟化代谢表型有相关性。在９名ＥＭｓ中，有３名为ＣＹＰ２Ｃ１９ｗｔ／ｗｔ的纯合子，而在７名ＰＭｓ中，有４名为ＣＹＰ２Ｃ１９ｍ／ｍ的纯合子，余下９位均为杂合子（ＣＹＰ２Ｃ１９ｗｔ／ｍ）。因此中国人导致Ｓ－ＭＰ弱代谢表型主要由于ＣＹＰ２Ｃ１９基因外显子５的ＳｍａＩ酶切位点的突变。但这种突变只能解释Ｓ－ＭＰＰＭｓ的８０％等位基因突变（ＣＹＰ２Ｃ１９ｍ）或６０％的中国受试者弱代谢表型。对中国人ＣＹＰ２Ｃ１９基因ｉｎｔｒｏｎ４／ｅｘｏｎ５ＤＮＡ序列进行测定的结果表明，在ＥＭｓ的基因序列中有一个ＳｍａＩ酶位切点，而在ＰＭｓ中，由于Ｇ→Ａ突变，使ＳｍａＩ酶位切点消失。

中国汉族人群S-美芬妥英4'-羟化酶的表型与基因分析

目的：研究中国汉族人群Ｓ美芬妥英４’羟化代谢遗传多态性。方法：以美芬妥英为探针药物采用手性毛细管气相色谱法测定尿中Ｓ／ＲＭＰ浓度比值，对９０名志愿者进行了表型分型测定，应用ＰＣＲ技术对其中的２６名志愿者进行了Ｓ美芬妥英４’羟化酶（ＣＹＰ２Ｃ１９）基因分析。结果：表型分析结果，１１人属慢代谢者（ＰＭ），Ｓ／Ｒ比值０９５；基因分析结果，６人为野生型纯合子（ｗｔ／ｗｔ）；１０人为杂合子（ｗｔ／ｍ１和ｗｔ／ｍ２），９人为ＣＹＰ２Ｃ１９ｍ１突变型纯合子（ｍ１／ｍ１），１人为两突变型杂合子（ｍ１／ｍ２）。结论：表型分析与基因分析结果显示了很好的相关性，本实验测得慢代谢者的频发率为１２２％，与文献报道相符。

气相色谱法检测人尿中R,S-美芬妥英浓度

建立了人尿中Ｒ，Ｓ－美芬妥英的气相色谱（ＧＣ）手性分离与检测方法。在选定的色谱条件下能很好地分离Ｒ，Ｓ－美芬妥英，尿中其它物质无干扰。用外标法定量，线性范围为１２．５～２５００μｇ／Ｌ尿，最小检出浓度为６μｇ／Ｌ尿。方法具有样本制备简便、分析时间短、线性范围宽、干扰少、灵敏和准确等优点，已广泛用于人体内美芬妥英代谢的研究和肝药酶ＣＹＰ２Ｃ１９酶活性的检测。

高蛋白高脂肪高碳水化合物饲料对大鼠地西泮、美芬妥英代谢影响

目的：研究高蛋白、高脂肪、高碳水化合物饲料对大鼠地西泮、美芬妥英的体内代谢，以了解饮食因素对药物氧化代谢的影响。方法：ＨＰＬＣ测定用药后不同时间血浆药物及其代谢产物浓度，用３Ｐ８７程序处理数据，求得药动学参数。结果：与对照组相比，高蛋白饮食使地西泮ｔ１／２β缩短，ＡＵＣ降低，Ｃｌｓ增高；使地西泮的代谢产物去甲地西泮的ＡＵＣ增高；使尿液中Ｓ／Ｒ美芬妥英比值明显降低。结论：高蛋白饮食加快地西泮的去甲基化反应，增强Ｓ美芬妥英羟化代谢。

氯米帕明在体外人肝微粒体中的氮位去甲基代谢(英文)

采用人肝微粒体应用酶促动力学分析，观察特异性细胞色素Ｐ４５０（ＣＹＰ４５０）抑制剂对氯米帕明（ＣＩＭ） Ｎ－去甲基代谢的作用以及ＣＩＭ 去甲基代谢与Ｓ－美芬妥英４′－羟化代谢的相关性，以阐明参与ＣＩＭ Ｎ－去甲基代谢的ＣＹＰ４５０ 的种类， 性质及其在代谢中的作用． 酶促动力学分析结果表明有高亲和力酶及具有底物别构激活特性的低亲和力酶参与了ＣＩＭ 的Ｎ－去甲基代谢． 抑制实验结果表明ＣＹＰ１Ａ２ 特异性抑制剂呋拉茶碱（Ｆｕｒ）主要抑制低浓度ＣＩＭ 的去甲基代谢，ＣＹＰ３Ａ４ 特异性抑制剂醋竹桃霉素（ＴＡＯ）主要抑制高浓度ＣＩＭ 去甲基代谢． 相关实验发现３ μｍ ｏｌ·Ｌ－ １ ＣＩＭ 代谢生成Ｎ－去甲基ＣＩＭ 的速率与２００ μｍ ｏｌ·Ｌ－ １ Ｓ－美芬妥英生成４′－羟基美芬妥英的速率无显著相关性， 提示ＣＹＰ２Ｃ１９ 对于催化人肝微粒体中ＣＩＭ 的去甲基代谢仅起较为次要或很小的作用． 结果表明，ＣＹＰ１Ａ２ 主要参与低浓度ＣＩＭ 在体外人肝微粒体Ｎ－去甲基代谢，ＣＹＰ３Ａ４ 因其底物激活特性主要在高浓度ＣＩＭ的去甲基代谢中起作用，ＣＹＰ２Ｃ１９ 则作用很小．

高效液相色谱法测定尿中美芬妥英及代谢产物4＇－羟基美芬妥英

高效液相色谱法测定尿中美芬妥英及代谢产物４＇－羟基美芬妥英阮邹荣，程源深，丁德云（浙江医科大学附属第二医院临床药理研究所３１０００９）美芬妥英（ｍｅｐｈｅｎｙｔｏｉｎ，ＭＰ）化学名为３－甲基－５－苯基－５－乙基乙内酰脲（３－ｍｅｔｈｙｌ－５－ｐｈｅｎ...

S－美芬妥英羟化代谢多态性的分子机制研究进展

人群中存在着Ｓ－美芬妥英羟化代谢多态性。从人肝微粒体已分离出Ｓ－美芬妥英羟化酶。在基因克隆研究中已分离出与该羟化酶活性有关的Ｐ４５０ｃＤＮＡ，属Ｐ４５０２Ｃ１９。最近报道，人肝中Ｐ４５０２Ｃ１９的含量和催活Ｓ－美芬妥英羟化活性密切相关，其弱代谢者主要由于ＣＹＰ２Ｃ１９的外显子５单碱基对（Ｇ→Ａ）的变异，使核苷酸序列错位而产生无功能的Ｐ４５０蛋白的结果。

应用中国成人肝微粒体研究地西泮代谢

本文建立了中国成人肝库，并应用中国成人肝微粒体研究了中国人地西泮代谢的规律和代谢地西泮的肝微粒体细胞色素Ｐ４５０氧化酶的特点，结果表明，中国人的地西泮代谢主要经Ｎ－去甲基化和Ｃ３－羟化反应，分别生成去甲地西泮（ＮＤＺ）和羟地西拌（ＴＭＺ）两种代谢产物，随着底物浓度的增加，这两种酶促反应呈双曲线分布，当底物浓度＞２０μｍｏｌ·Ｌ－１时，Ｎ－去甲基化反应的速率低于羟化反应速率，羟地西泮代谢物生成量明显高于去甲地西泮，同时发现，中国成人肝微粒体中可能存在着两种与地西泮具有不同亲和力的药酶组份，结果还表明，异喹胍，奎尼丁（被Ｐ４５０２Ｄ６酶所催化代谢）和美芬妥因，苯妥英（被Ｐ４５０２Ｃ类酶所催化代谢）对中国人肝微粒体试管内地西泮代谢无影响，而普奈洛尔及与Ｓ－美芬妥英羟化代谢相关的奥米拉唑能显著地抑制试管内地西泮的Ｎ－去甲基化和Ｃ３－羟化代谢反应。催眠药甲喹酮能显著地激活地西泮的氧化代谢反应。

中国健康志愿者普罗帕酮的药代动力学及与异喹胍，美芬妥英代谢多态性的相关性研究

应用高效液相色谱法及气相色谱法，研究了９名健康志愿者口服单剂量普罗帕酮的药代动力学及与异喹胍，Ｓ－美芬妥英羟化代谢多态性的相关性。结果表明，６名志愿者中普罗帕酮按一房室模型消除，其余３名符合二房室模型。普罗帕酮消除半衰期为３．４±ｓ１．１ｈ，药时曲线下面积为２．５±ｓ１．１μｇ·＝ｍＬ１，血浆清除率为１４５±ｓ６４Ｌ·ｈ１．普罗帕酮药代动力学参数在异喹胍强与弱代谢者中有较大的差异，而与Ｓ－美芬妥英不同羟化代谢表型则无明显相关性．同时服用普罗帕酮和异喹胍时，两药氧化代谢可产生互相抑制性影响．而普罗帕酮与Ｓ－美芬妥英公用则无明显改变。

高效液相色谱法测定人血浆中花椒毒酚的浓度

目的 建立用高效液相色谱法测定人血浆中花椒毒酚浓度的方法。方法 本试验血浆样品用乙酸乙酯进行液液萃取,S-美芬妥英为内标,色谱柱为Hypersil BDS C18,流动相为乙腈-水,梯度洗脱,流速1 m L/min,检测波长为300nm。结果 内标物质和花椒毒酚分离度良好,人血浆中的内源性物质不干扰测定。在0.01~2μg/m L浓度范围内花椒毒酚和内标物的色谱峰面积比值线性关系良好（r=0.999 2）;花椒毒酚的最低定量限为0.01μg/m L,样品日内日间精密度的RSD均小于6%,提取回收率为84.5%~92.1%,方法回收率99.5%~102.5%。结论 本实验建立的HPLC方法操作简便宜行,重现性好、灵敏度高,可用于人血浆花椒毒酚浓度测定及药代动力学的进一步研究。

中国人S－美芬妥英羟化酶的两种突变基因型

为了查明Ｓ－美芬妥英羟化酶（ＣＹＰ２Ｃ１９）在中国人群中的突变基因型，采用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）结合限制性内切酶技术分析了１９例Ｓ－美芬妥英弱代谢者（ＰＭ）和５５例强代谢者（ＥＭ）的基因型。结果显示，表型ＰＭ的基因型是ｍ１／ｍ１（７９％）和ｍ１／ｍ２（２１％），ＥＭ中杂合子（ｍ１／ｗｔ和ｍ２／ｗｔ）占５４．５％。表明在中国人中ＣＹＰ２Ｃ１９等位基因至少存在有两种突变基因型（ｍ１和ｍ２）。

普萘洛尔侧链氧化与S-美芬妥英羟化酶活性间无相关(英文)

目的:了解健康志愿者S-美芬妥英(S-Mep)羟化酶(CYP2C19)与体内普萘洛尔(Pro)侧链氧化能力间的相关性.方法:14名健康的S-Mep强氧化代谢者分批分别口服单剂量消旋Mep 100 mg和消旋Pro 80 mg,分别用气相色谱和液相色谱方法定量分析人尿中S-和R-Mep、4＇-羟基美芬妥英(4＇-OH-M)、萘氧乳酸和人血浆中Pro的浓度.结果:0-8小时尿排泄的S/R比值和4＇-OH-M的1g D％均与Pro侧链氧化的部分代谢清除率不相关(r_s分别为-0.0484和-0.1077).结论:人的CYP2C19不是催化Pro侧链氧化代谢的主要的P-450酶.

中国汉族人S-美芬妥英4′-羟化代谢的遗传多态性(英文)

目的:研究我国汉族人S-美芬妥英(S-Mep)4′-羟化代谢的遗传多态性。方法:148名互无血缘关系的汉族健康志愿者和5个家族21名成员,口服美芬妥英100mg后,用HPLC法测定0-12h尿中S-Mep 4′-羟化代谢的代谢比值(lg MR)和羟化指数(lg HI)。结果:lg MR和lg HI均呈两态性分布,分型点(antimode)分别为-1.00和1.50,羟化代谢缺陷的频发率为13.5％(20/148)。系谱分析表明S-Mep 4′-羟化代谢缺陷为常染色体隐性遗传。结论:S-Mep 4′-羟化代谢缺陷频发率东方人高于高加索人,遗传方式均为常染色体隐性遗传。