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Mer受体酪氨酸激酶与SD大鼠糖尿病周围神经病变的相关性
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作者 苏晓杨 陈文婷 +3 位作者 付怡丹 赵燕 兰丹凤 杨秋萍 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第8期1593-1599,共7页
背景:糖尿病周围神经病变的发病机制目前尚未明确,TAM(Tyro3、Axl和MerTK)受体酪氨酸激酶具有控制中枢神经系统凋亡细胞和抑制炎症反应的作用。目的:探讨2型糖尿病及其周围神经病变SD大鼠血浆及坐骨神经组织Mer受体酪氨酸激酶水平的差异... 背景:糖尿病周围神经病变的发病机制目前尚未明确,TAM(Tyro3、Axl和MerTK)受体酪氨酸激酶具有控制中枢神经系统凋亡细胞和抑制炎症反应的作用。目的:探讨2型糖尿病及其周围神经病变SD大鼠血浆及坐骨神经组织Mer受体酪氨酸激酶水平的差异,研究Mer受体酪氨酸激酶与糖尿病周围神经病变的关联性。方法:40只雄性SD大鼠随机分为对照组15只、2型糖尿病组10只及2型糖尿病周围神经病变组15只。对照组大鼠喂普通饲料,实验组大鼠行高脂高糖饮食6周,并腹腔内注射单剂量小剂量链脲佐菌素35 mg/kg,14 d尾静脉取血检测血糖≥16.7 mmol/L为2型糖尿病造模成功。周围神经病变组大鼠动物继续高糖、高脂喂养8周。麻醉后活体分离检测大鼠坐骨神经传导速度,腹主动脉取血,取坐骨神经组织。光镜下观察各组神经纤维组织学改变,确认糖尿病周围神经病变造模成功。ELISA检测大鼠外周血血糖、血脂及血清MerTK水平,苏木精-伊红染色观察坐骨神经组织学改变;免疫荧光、免疫组化及免疫蛋白印迹检测坐骨神经组织中MerTK的表达。结果与结论:①实验成功构建SD大鼠2型糖尿病及2型糖尿病周围神经病变大鼠模型,糖尿病周围神经病变成模率80%;与对照组比较,2型糖尿病及糖尿病周围神经病变组大鼠血糖水平显著升高(P<0.0001),糖尿病周围神经病变组高于2型糖尿病组;坐骨神经传导速度明显下降(P<0.05),糖尿病周围神经病变组低于2型糖尿病组。②组织学检查:与对照组相比,2型糖尿病组大鼠坐骨神经核减少,有部分空泡变性,出现吞噬细胞;糖尿病周围神经病变组胞体肿胀,核间距增大,出现空泡变性,髓鞘周围出现隔断、不平滑,轴索变为网格状。③血清中MerTK水平:糖尿病周围神经病变组显著高于对照组(P<0.05)。④坐骨神经组织中MerTK的表达:与对照组比较,糖尿病周围神经病变组中明显上调(P<0.05)。⑤结论:糖尿病周围神经病变大鼠血浆及坐骨神经组织中Mer受体酪氨酸激酶水平升高,推测与其抗炎及免疫调节作用有关。 展开更多
关键词 mer受体酪氨酸激酶 糖尿病周围神经病变 生物学标记物 2型糖尿病 SD大鼠
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受体酪氨酸激酶Mer对高糖环境培养的大鼠雪旺细胞系RSC96增殖调控作用观察
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作者 付怡丹 陈文婷 +3 位作者 苏晓杨 赵燕 兰丹凤 杨秋萍 《山东医药》 CAS 2024年第6期29-33,共5页
目的观察受体酪氨酸激酶Mer(MER tyrosine kinase,Mertk)在高糖环境培养条件下的大鼠雪旺细胞系RSC96增殖的调控作用。方法取RSC96分为一、二、三、四、五组,分别置于含25(正常葡萄糖浓度)、50、75、100及125 mmol/L葡萄糖的培养基中培... 目的观察受体酪氨酸激酶Mer(MER tyrosine kinase,Mertk)在高糖环境培养条件下的大鼠雪旺细胞系RSC96增殖的调控作用。方法取RSC96分为一、二、三、四、五组,分别置于含25(正常葡萄糖浓度)、50、75、100及125 mmol/L葡萄糖的培养基中培养,培养48 h时采用Western Blotting法检测各组细胞Mertk,筛选Mertk蛋白相对表达量最高浓度为后续研究的高糖浓度。取RSC96细胞先饥饿处理4 h,置入含100 mmol/L的葡萄糖培养基中,分别于培养0、24、36、48、60 h时取各组细胞,采用Western Blotting法检测各组细胞Mertk,最终筛选Mertk蛋白相对表达量高的时间为后续研究培养时间。取RSC96细胞,分为对照组、高糖组、高糖敲降组及敲降组:高糖组细胞饥饿处理4 h,置于含100 mmol/L葡萄糖的培养基中培养;高糖敲降组细胞饥饿处理4 h,置于含100 mmol/L葡萄糖的培养基中,后加入5μL的敲降Mertk基因表达siRNA溶液;敲降组细胞饥饿处理4 h,加入5μL的敲降Mertk基因表达siRNA溶液;对照组细胞用正常培养基培养。培养48 h时取各组细胞,采用Edu法测算各组细胞增殖活力,采用Western Blotting法检测各组细胞Mertk、磷酸化核转录因子κB、P65及肿瘤坏死因子α(TNF-α)。结果与一组相比,四、五组细胞Mertk蛋白相对表达量高(P均<0.05);与培养0 h相比,培养48、60 h时RSC96细胞Mertk相对表达量高(P均<0.05)。与对照组相比,高糖组细胞增殖活力低(P<0.05),敲降组细胞增殖活力高(P<0.05);与对照组相比,高糖敲降组细胞P65、TNF-α相对表达量高(P均<0.05),敲降组细胞Mertk相对表达量低、P65及TNF-α相对表达量高(P均<0.05),高糖组细胞Mertk、P65及TNF-α相对表达量高(P均<0.05)。结论敲降Mertk基因表达的高糖环境培养RSC96细胞的增殖能力高,细胞P65、TNF-α表达高。Mertk可能通过促进细胞P65、TNF-α表达,促进高糖环境培养RSC96细胞的增殖。 展开更多
关键词 受体酪氨酸激酶 受体酪氨酸激酶mer 葡萄糖 雪旺细胞 细胞增殖 核转录因子κB P65基因 肿瘤坏死因子α
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磷酸中MER值对磷酸氢钙反应过程的影响与研究
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作者 沈海龙 张灿 +4 位作者 何宾宾 杨军 李雪 朱桂华 侯屹东 《山东化工》 CAS 2024年第2期21-23,共3页
磷酸氢钙反应是制备磷酸盐产品的重要工艺步骤之一。MER值(Magnesium to Extractable Phosphorus Ratio)作为一个衡量磷酸氢钙反应过程中杂质含量的指标,对反应过程的影响引起了广泛的关注。通过研究液相中的反应物扩散过程、杂质产物... 磷酸氢钙反应是制备磷酸盐产品的重要工艺步骤之一。MER值(Magnesium to Extractable Phosphorus Ratio)作为一个衡量磷酸氢钙反应过程中杂质含量的指标,对反应过程的影响引起了广泛的关注。通过研究液相中的反应物扩散过程、杂质产物对固体膜和液体膜的影响、磷酸电离与氢离子活度变化的关系以及镁离子对反应速率和能耗的影响,探讨了MER值对磷酸氢钙反应过程的影响机制。实验结果表明,较高的MER值会导致反应物扩散受阻、杂质产物影响反应进行、磷酸电离减弱以及反应速率降低。因此,在工业生产中,需要控制和优化MER值,以提高反应过程的效果和产物的纯度。这些研究结果对于磷酸氢钙反应的工艺改进和优化具有重要的指导意义。 展开更多
关键词 磷酸 mer 磷酸氢钙
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MER联合Lead-DBS在帕金森病患者术后程控中的应用研究
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作者 刘明辉 杨新超 +2 位作者 路小奇 田海港 郭效东 《临床研究》 2024年第7期11-14,共4页
目的探讨微电极记录(MER)联合多模态影像融合技术(Lead-DBS)多模态影像融合技术在帕金森病患者术后程控中的应用效果。方法选取中国人民解放军联勤保障部队第九八八医院2018年10月至2023年8月期间收治的60例帕金森病患者,随机将其分为... 目的探讨微电极记录(MER)联合多模态影像融合技术(Lead-DBS)多模态影像融合技术在帕金森病患者术后程控中的应用效果。方法选取中国人民解放军联勤保障部队第九八八医院2018年10月至2023年8月期间收治的60例帕金森病患者,随机将其分为对照组和观察组。对照组患者根据脑深部电刺激术(DBS)专家程控共识逐个触点程控,观察组患者根据MER联合术后Lead-DBS多模态影像融合技术进行程控。比较两组术中操作时间、术后症状改善情况、生活质量评分、不良情绪及并发症发生率。结果观察组术中操作时间少于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);干预前两组帕金森症状评分、帕金森病生活质量评分、不良情绪评分、并发症发生率差异均无统计学意义(P>0.05),干预后观察组帕金森症状评分、帕金森病生活质量评分、不良情绪评分、并发症发生率均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论术中MER联合术后Lead-DBS多模态影像融合技术,结合患者症状针对性选择开机触点方法具有较高的可行性,可提高手术效率、改善患者预后,安全性良好。 展开更多
关键词 mer Lead-DBS 帕金森病 术后程控
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基于流式细胞术和K-mer分析的荆芥基因组大小评估 被引量:1
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作者 姜涛 刘灵娣 +2 位作者 田伟 刘铭 温春秀 《特产研究》 2023年第6期1-5,共5页
荆芥是我国常用大宗药材。为了研究荆芥基因组大小,本研究采用流式细胞术和K-mer分析方法对荆芥进行了基因组大小、GC含量、杂合度和重复序列评估。结果显示:基于流式细胞术,荆芥基因组平均大小为0.76Gb;采用K-mer分析显示,荆芥基因组... 荆芥是我国常用大宗药材。为了研究荆芥基因组大小,本研究采用流式细胞术和K-mer分析方法对荆芥进行了基因组大小、GC含量、杂合度和重复序列评估。结果显示:基于流式细胞术,荆芥基因组平均大小为0.76Gb;采用K-mer分析显示,荆芥基因组大小为0.903 Gb,GC含量为38.77%,杂合率约为0.32%,重复序列约为66.93%;荆芥基因组拼接组装后contig总长为792215707 bp,contig N50为960 bp,scaffold总长为813473842 bp,scaffold N50为1650 bp。本研究结合流式细胞术和全基因组调查结果,分析评估荆芥基因组大小在0.7~0.9 Gb之间,基因组序列重复比例较高。本研究对荆芥基因组进行了初步的探索,为荆芥的基因组学研究提供了参考依据。 展开更多
关键词 荆芥 流式细胞术 K-mer 基因组大小
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基于Swin Transformer和三维残差多层融合网络的高光谱图像分类 被引量:2
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作者 王先旺 周浩 +1 位作者 张明慧 朱尤伟 《计算机科学》 CSCD 北大核心 2023年第5期155-160,共6页
卷积神经网络(CNNs)具有出色的局部上下文建模能力,被广泛用于高光谱图像分类中,但由于其固有网络主干的局限性,CNNs未能很好地挖掘和表示光谱特征的序列属性。为了解决此问题,提出了一种基于Swin Transformer和三维残差多层融合网络的... 卷积神经网络(CNNs)具有出色的局部上下文建模能力,被广泛用于高光谱图像分类中,但由于其固有网络主干的局限性,CNNs未能很好地挖掘和表示光谱特征的序列属性。为了解决此问题,提出了一种基于Swin Transformer和三维残差多层融合网络的新型网络(ReSTrans)用于高光谱图像分类。在ReSTrans网络中,为了尽可能地挖掘高光谱图像的深层特征,采用三维残差多层融合网络来提取空谱特征,然后由基于自注意机制的Swin Transformer网络模块近一步捕获连续光谱间的关系,最后由多层感知机根据空谱联合特征完成最终的分类任务。为了验证ReSTrans网络模型的有效性,改进的模型在IP,UP和KSC 3个高光谱数据集上进行实验验证,分类精度分别达到了98.65%,99.64%,99.78%。与SST方法相比,该网络模型的分类性能分别平均提高了3.55%,0.68%,1.87%。实验结果表明该模型具有很好的泛化能力,可以提取更深层的、判别性的特征。 展开更多
关键词 高光谱图像分类 三维残差多层融合网络 自注意力机制 Swin Transformer 空谱联合特征
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Microglia and astrocytes mediate synapse engulfment in a MER tyrosine kinase-dependent manner after traumatic brain injury 被引量:3
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作者 Hui Shen Xiao-Jing Shi +6 位作者 Lin Qi Cheng Wang Muyassar Mamtilahun Zhi-Jun Zhang Won-Suk Chung Guo-Yuan Yang Yao-Hui Tang 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2023年第8期1770-1776,共7页
Recent studies have shown that microglia/macrophages and astrocytes can mediate synaptic phagocytosis through the MER proto-oncokinase in developmental or stroke models,but it is unclear whether the same mechanism is ... Recent studies have shown that microglia/macrophages and astrocytes can mediate synaptic phagocytosis through the MER proto-oncokinase in developmental or stroke models,but it is unclear whether the same mechanism is also active in traumatic brain injury.In this study,we established a mouse model of traumatic brain injury and found that both microglia/macrophages and astrocytes phagocytosed synapses and expression of the MER proto-oncokinase increased 14 days after injury.Specific knockout of MER in microglia/macrophages or astrocytes markedly reduced injury volume and greatly improved neurobehavioral function.In addition,in both microglia/macrophages-specific and astrocytes-specific MER knock-out mice,the number of microglia/macrophage and astrocyte phagocytosing synapses was markedly decreased,and the total number of dendritic spines was increased.Our study suggested that MER proto-oncokinase expression in microglia/macrophages and astrocytes may play an important role in synaptic phagocytosis,and inhibiting this process could be a new strategy for treating traumatic brain injury. 展开更多
关键词 animal model astrocyte dendritic spines LYSOSOME macrophage mer proto-oncokinase MICROGLIA neurologic function phagocytosis synapse engulfment traumatic brain injury
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穴位埋线对心肌梗死大鼠巨噬细胞MerTK胞葬作用的影响 被引量:2
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作者 张薇 黄小楼 +3 位作者 韦雪兰 杨珣 平兰芝 吴高鑫 《云南中医药大学学报》 2023年第4期87-92,共6页
目的观察“内关”和“心俞”穴位埋线对心肌梗死大鼠巨噬细胞Mer受体酪氨酸激酶(MerTK)相关表达影响,探讨“内关”和“心俞”穴位埋线对心肌梗死大鼠心肌肥大其可能的机制作用。方法雄性大鼠(SD)采用左冠状动脉前降结扎法构建心肌梗死模... 目的观察“内关”和“心俞”穴位埋线对心肌梗死大鼠巨噬细胞Mer受体酪氨酸激酶(MerTK)相关表达影响,探讨“内关”和“心俞”穴位埋线对心肌梗死大鼠心肌肥大其可能的机制作用。方法雄性大鼠(SD)采用左冠状动脉前降结扎法构建心肌梗死模型,按照随机数字法分为伪手术组、模型组、“内关”和“心俞”穴位埋线组、培哚普利组,每组5只,其中伪手术组只开胸撕开心包膜。术后第2天开始干预治疗,以第7、28天为观测点。苏木精-伊红(HE)染色观察心肌组织病理形态,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清IL-6、TNF-α、IL-1β浓度水平,蛋白质印迹(Western blotting)检测心肌组织MerTK、p-Mertk蛋白表达。结果(1)与伪手术组大鼠相比较,模型建构后7、28 d,模型组大鼠HE染色心肌细胞形态异常、错乱排列,游离细胞核增多,见明显的细胞间质且心肌细胞横截面积增大(P<0.05),血清IL-6、TNF-α、IL-1β浓度呈明显上升趋势,MerTK蛋白表达降低(P<0.05),p-MerTK蛋白表达升高(P<0.05)。(2)与模型组大鼠相比较,治疗后7、28 d,两治疗组大鼠HE染色心肌细胞形态和大小相对规则,排列相较平行有序,心肌细胞核游离及肥大的情况均有不同程度改善且心肌细胞横截面积均不同程度降低(P<0.05),IL-6、TNF-α、IL-1β浓度均下降(P<0.05),MerTK蛋白表达均不同程度升高(P<0.05),p-MerTK蛋白表达不同程度降低。结论“内关”和“心俞”埋线能够改善心肌梗死大鼠心肌肥大的程度,其机制可能与维持心肌组织中巨噬细胞表面受体MerTK的表达、降低血清炎症细胞因子含量相关。 展开更多
关键词 心肌梗死 穴位埋线 mer受体酪氨酸激酶 巨噬细胞
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基于k-mer词频向量的九种DNA序列相似性计算方法比较分析 被引量:2
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作者 张小丹 李喆 +3 位作者 卫泽刚 刘策 余凯哲 魏月华 《科学技术创新》 2023年第21期106-111,共6页
序列相似性计算是生物序列分析的前提和基础,传统的序列相似性分析方法需要借助双序列比对,如Needleman-Wunsch(NW)序列比对算法。面对海量序列数据,基于序列比对的相似性计算方法具有较高的时间复杂度。为快速得到序列间相似性,可以通... 序列相似性计算是生物序列分析的前提和基础,传统的序列相似性分析方法需要借助双序列比对,如Needleman-Wunsch(NW)序列比对算法。面对海量序列数据,基于序列比对的相似性计算方法具有较高的时间复杂度。为快速得到序列间相似性,可以通过提取序列k-mer信息,利用序列k-mer词频向量进行计算。本文从序列k-mer词频向量提取及基于k-mer词频向量的九种相似性计算方法进行了详细介绍,并用两种数据集进行了比较分析。实验结果表明,基于k-mer词频相似性计算方法比标准NW算法速度至少快103倍,但不同的k-mer词频计算方法得到的相似性与标准NW算法差别较大,相对而言,欧式距离在两个数据集的相似性结果与NW方法更接近,在计算大规模序列相似性时,可以作为优先选择的方法。 展开更多
关键词 非序列对比 k-mer词频 Needleman-Wunsch算法 序列相似性
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New MERS-like Coronavirus Discovered in Pangolins
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《Bulletin of the Chinese Academy of Sciences》 2023年第1期6-7,共2页
A research team jointly led by Dr.SHI Zhengli and Dr.ZHOU Peng from the CAS Wuhan Institute of Virology and their collaborators have discovered a novel MERS-like coronavirus in Malayan pangolins,the world’s most traf... A research team jointly led by Dr.SHI Zhengli and Dr.ZHOU Peng from the CAS Wuhan Institute of Virology and their collaborators have discovered a novel MERS-like coronavirus in Malayan pangolins,the world’s most trafficked mammals(doi:10.1016/j.cell.2023.01.019). 展开更多
关键词 jointly WUHAN merS
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基于流式细胞法和基因组K-mer分析法检测漆树基因组大小
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作者 郭晖 陈鹏 +3 位作者 郭欣怡 任俊澎 商慧颖 柏国清 《中国生漆》 2023年第3期51-54,共4页
漆树Toxicodendron vernicifluum(Stokes)F.A.Barkl.是我国重要的经济林木资源,在工业、药用、生态、文化等领域产生了积极的影响。本研究利用流式细胞技术和高通量测序技术对漆树基因组特征进行了初步研究。利用已知基因组大小的柳树(S... 漆树Toxicodendron vernicifluum(Stokes)F.A.Barkl.是我国重要的经济林木资源,在工业、药用、生态、文化等领域产生了积极的影响。本研究利用流式细胞技术和高通量测序技术对漆树基因组特征进行了初步研究。利用已知基因组大小的柳树(Salix matsudana Koidz)作为对照,利用流式细胞技术估算漆树基因组大小为538.90 Mb。利用高通量测序技术对漆树基因组进行K-mer分析,估算漆树基因组大小为605.9Mb,基因组杂合度为0.572%,重复序列约占71.4%,GC含量为37.2%。从基因组基本结构特征上看,漆树基因组属于高重复、高杂合的复杂基因组。利用获得的DNA序列数据,从头组装了一个大小为638.5Mb,contig N50长度为153bp的漆树基因组。本研究为漆树全基因组精细图谱的绘制和分子育种研究提供了重要的理论依据。 展开更多
关键词 漆树(Toxicodendron vernicifluum(Stokes)F.A.Barkl.) 基因组大小 流式细胞术 K-mer分析
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Self-assembly of block copolymers grafted onto a flat substrate:Recent progress in theory and simulations
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作者 王铮 李宝会 《Chinese Physics B》 SCIE EI CAS CSCD 2016年第1期270-281,共12页
Block copolymers are a class of soft matter that self-assemble to form ordered morphologies on the scale of nanome- ters, making them ideal materials for various applications. These applications directly depend on the... Block copolymers are a class of soft matter that self-assemble to form ordered morphologies on the scale of nanome- ters, making them ideal materials for various applications. These applications directly depend on the shape and size of the self-assembled morphologies, and hence, a high degree of control over the self-assembly is desired. Grafting block copolymer chains onto a substrate to form copolymer brushes is a versatile method to fabricate functional surfaces. Such surfaces demonstrate a response to their environment, i.e., they change their surface topography in response to different external conditions. Furthermore, such surfaces may possess nanoscale patterns, which are important for some applica- tions; however, such patterns may not form with spun-cast films under the same condition. In this review, we summarize the recent progress of the self-assembly of block copolymers grafted onto a flat substrate. We mainly concentrate on the self-assembled morphologies of end-grafted AB dibloek eopolymers, junction p0int-grafted AB diblock copolymers (i.e., Y-shaped brushes), and end-grafted ABA triblock copolymers. Special emphasis is placed on theoretical and simulation progress. 展开更多
关键词 grafted AB diblock copolymers grafted ABA triblock copolymers SELF-ASSEMBLY block copoly-mer brushes
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MER型沸石的结构、合成及应用进展 被引量:3
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作者 石勤 王建强 +1 位作者 席静 张富民 《石油化工》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1004-1011,共8页
MER型沸石是一种稀有的三维八元环小孔沸石,因其特殊的孔道结构和良好的物化性质,在海水卤水提钾、工业催化、气体吸附分离以及工业脱水等领域展现出了潜在的应用前景。对MER型沸石的结构、合成和应用的研究现状进行了较为全面的综述,... MER型沸石是一种稀有的三维八元环小孔沸石,因其特殊的孔道结构和良好的物化性质,在海水卤水提钾、工业催化、气体吸附分离以及工业脱水等领域展现出了潜在的应用前景。对MER型沸石的结构、合成和应用的研究现状进行了较为全面的综述,并对其研究方向进行了展望,为进一步研究MER型沸石并对其进行推广应用提供了参考。 展开更多
关键词 mer型沸石 沸石W 提钾 分离 催化 脱水
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三相对称系统中SVC-MERS注入谐波电流分析 被引量:5
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作者 程苗苗 包跃跃 +2 位作者 涂春鸣 张忠杰 刘治国 《电源学报》 CSCD 2016年第1期18-26,共9页
磁能恢复开关MERS(magnetic energy recovery switch)是一种新型的无功补偿装置,它相较于其他无功补偿装置,具有结构简单、易于控制和损耗低等诸多优点,但在进行无功功率补偿的过程中会产生谐波电流。首先,在对MERS的结构和控制方法阐... 磁能恢复开关MERS(magnetic energy recovery switch)是一种新型的无功补偿装置,它相较于其他无功补偿装置,具有结构简单、易于控制和损耗低等诸多优点,但在进行无功功率补偿的过程中会产生谐波电流。首先,在对MERS的结构和控制方法阐述的基础上建立了三相对称系统中SVC-MERS的数学模型,讨论分析了控制参数对三相对称系统中线电流谐波特性的影响;进而提出了控制参数的优化设计方法。仿真和实验结果表明,通过控制参数的优化设计可以有效地减小三相对称系统中线电流的谐波含量,所提控制参数的优化设计方法是可行的。 展开更多
关键词 三相对称系统 并联无功补偿 磁能恢复开关(merS) 谐波电流
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Mer免疫球蛋白样区原核蛋白表达和单克隆抗体制备 被引量:3
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作者 范磊 沈飞 +2 位作者 谢丽倩 周梦云 阮长耿(指导) 《苏州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2007年第1期4-7,共4页
目的利用原核蛋白表达载体,体外表达Mer的IgG样区,并利用此重组蛋白制备抗Mer的单克隆抗体。方法从K562细胞中抽提总RNA,利用RT-PCR扩增Mer的IgG样区片断。经过测序将所得片断与PQE30原核表达载体连接并转化到大肠杆菌M15中,挑选阳性克... 目的利用原核蛋白表达载体,体外表达Mer的IgG样区,并利用此重组蛋白制备抗Mer的单克隆抗体。方法从K562细胞中抽提总RNA,利用RT-PCR扩增Mer的IgG样区片断。经过测序将所得片断与PQE30原核表达载体连接并转化到大肠杆菌M15中,挑选阳性克隆,经诱导和纯化后获得原核蛋白。利用所得的重组蛋白免疫Balb/c小鼠,取其脾脏和小鼠杂交瘤细胞融合制备针对Mer的IgG样区的特异性抗体。利用ELISA方法筛选阳性克隆,Westernblot方法进行验证。结果体外成功表达MerIgG样区的原核蛋白,片断大小经修饰后约为26kd,表达量占菌体总蛋白的15%,经Ni-NTAagrose柱纯化后得到纯化蛋白并免疫Balb/c小鼠。将小鼠脾脏细胞和杂交瘤细胞融合后得到1株特异性抗MerIgG样区的单克隆抗体——SZ-128,Westernblot显示此单抗可以和表达的重组蛋白和Mer胞外区真核蛋白反应。结论成功制备1株抗MerIgG样区的特异性单克隆抗体,为研究Mer的功能提供了有力的工具。 展开更多
关键词 mer IgG样区 原核表达 单克隆抗体
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基于流式细胞术和K-mer分析的好好芭基因组大小估测 被引量:6
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作者 马鹏举 周佳熠 +4 位作者 孙会改 马丹丹 高飞 周宜君 张根发 《北京师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期733-737,共5页
好好芭是一种重要的特种油料植物,具有极高的经济价值.由于好好芭基因组数据缺乏,导致其分子生物学研究进展相对缓慢.本研究以黄瓜和大豆作为内标,用流式细胞仪测定经碘化丙啶(PI)染色的内标细胞核和好好芭细胞核混合样品的PI荧光强度,... 好好芭是一种重要的特种油料植物,具有极高的经济价值.由于好好芭基因组数据缺乏,导致其分子生物学研究进展相对缓慢.本研究以黄瓜和大豆作为内标,用流式细胞仪测定经碘化丙啶(PI)染色的内标细胞核和好好芭细胞核混合样品的PI荧光强度,通过比较好好芭与内标细胞DNA含量峰值的倍数关系,计算好好芭的基因组大小.同时使用基于生物信息学的K-mer分析来估测好好芭的基因组大小.采用流式细胞术测得好好芭基因组大小约为774 Mb.Kmer分析表明,当K值分别为17、19、21时,相应的DNA峰值出现在128、125和123,因此估测jojoba基因组大小为777~794Mb.K-mer分布曲线有明显的杂合峰,说明jojoba基因组杂合度较高.本研究完成了对好好芭基因组大小的估测,可为好好芭基因组学研究提供参考. 展开更多
关键词 好好芭 流式细胞术 K-mer分析 基因组大小
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基于流式细胞术和K-mer分析的银缕梅属(Parrotia C.A.Mey.)植物基因组大小测定 被引量:7
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作者 张云燕 安宇 +5 位作者 林峰 马秋月 周翔宇 金亮 李朋富 王中生 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期561-570,共10页
金缕梅科(Hamamelidaceae)银缕梅属(Parrotia C.A.Mey.)仅包含银缕梅(Parrotia subaequalis(H.T.Chang)R.M.Hao&H.T.Wei)和波斯铁木(Parrotia persica(DC.)C.A.Mey.)两种落叶阔叶乔木,其中银缕梅是我国华东地区特有的Ⅰ级濒危珍稀... 金缕梅科(Hamamelidaceae)银缕梅属(Parrotia C.A.Mey.)仅包含银缕梅(Parrotia subaequalis(H.T.Chang)R.M.Hao&H.T.Wei)和波斯铁木(Parrotia persica(DC.)C.A.Mey.)两种落叶阔叶乔木,其中银缕梅是我国华东地区特有的Ⅰ级濒危珍稀保护植物,属东亚第三纪孑遗成分;其姊妹种波斯铁木则间断分布于伊朗北部,属北极第三纪孑遗植物类群。本研究首次利用流式细胞术和K-mer分析方法对银缕梅属两姊妹种的基因组大小进行了测定,建立和优化了以萝卜(Raphanus sativus L.‘Saxa’)为内标、WPB(Woody plant buffer)为细胞核解离液的两种植物单倍体基因组的DNA含量(DNA C值)流式测定的适宜体系,旨在为金缕梅科银缕梅属植物的全基因组测序、基因组学研究、种质资源开发和利用以及物种保育等提供前期基础数据参考;同时也可为金缕梅科其他属、种的基因组大小测定提供借鉴。主要研究结果如下:(1)通过流式测定银缕梅基因组大小约为971.45±13.91 Mb,波斯铁木基因组大小约为890.52±24.69 Mb;(2)K-mer分析估测银缕梅基因组大小为951.70 Mb,杂合率为1.740%,重复序列比例为77.50%;波斯铁木基因组大小为858.50 Mb,杂合率为0.695%,重复序列占74.30%;(3)银缕梅属于高杂合和高重复基因组,波斯铁木则属于微杂合和高重复基因组。本研究的结果为银缕梅属植物后续基于DNA三代高通量测序技术的全基因组测序、组装及去冗余处理等工作提供了重要的数据参考。 展开更多
关键词 银缕梅 波斯铁木 基因组大小 流式细胞术 K-mer分析 基因组去冗余
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Mer在Jurkat细胞中的表达和抗凋亡作用 被引量:1
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作者 范磊 戴兰 +3 位作者 沈飞 周梦云 董宁征 阮长耿 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第7期698-702,共5页
背景与目的:Mer是Axl受体酪氨酸激酶家族中的一员,其配体Gas6和Mer结合后可以激活Mer的酪氨酸激酶活性以及下游信号转导途径,在细胞炎症、凋亡等方面发挥作用。近年来对于Mer及其家族成员功能的研究不断完善,但关于其在恶性疾病方面的... 背景与目的:Mer是Axl受体酪氨酸激酶家族中的一员,其配体Gas6和Mer结合后可以激活Mer的酪氨酸激酶活性以及下游信号转导途径,在细胞炎症、凋亡等方面发挥作用。近年来对于Mer及其家族成员功能的研究不断完善,但关于其在恶性疾病方面的研究报道甚少。本实验探讨Mer在恶性T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat中的表达及其对Jurkat细胞凋亡过程的影响,并对其抗凋亡机制进行初步探究。方法:利用流式细胞仪分别检测正常外周血、骨髓中T淋巴细胞以及Jurkat细胞中Mer的表达。利用RNAi技术敲除Jurkat细胞中Mer的表达后采用噻唑蓝(MTT)法检测Mer对于Jurkat细胞增殖的影响,AnnexinV/PI双染流式细胞术检测Mer对于Jurkat细胞血清撤离诱导凋亡过程的影响。最后利用荧光定量PCR检测RNA干扰后凋亡相关基因Bcl-2和Caspase-3以探讨Mer在Jurkat细胞中抗凋亡机制。结果:Mer在正常外周血和骨髓的T细胞中均未见表达,而在Jurkat细胞中高表达(51.1%)。特异性的siRNA(第1403位点)可以抑制86.0%Mer在Jurkat细胞中的表达。在血清撤离48h导致的凋亡实验中正常Jurkat细胞仅有1.5%的凋亡率,而敲除Mer后的Jurkat细胞凋亡率达到15.3%,而MTT增殖实验中阻断Mer前后差异无统计学意义(P>0.05)。定量PCR结果显示敲除Mer基因后Jurkat细胞中Bcl-2明显下调,为对照组的42.7%,而Caspase-3变化不显著。结论:Mer在Jurkat细胞中异常高表达,并可能通过Bcl-2途径影响细胞凋亡过程。 展开更多
关键词 mer 受体酪氨酸激酶 白血病 JURKAT细胞 凋亡 BCL-2
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MER型沸石吸附分离CO2/CH4的分子模拟 被引量:4
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作者 石勤 席静 张富民 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第11期4408-4417,共10页
MER型沸石在吸附分离CO2/CH4方面展现出良好的工业应用前景,受到广泛关注,但还缺乏理论基础数据。本文采用巨正则蒙特卡洛(GCMC)模拟方法,以全硅MER型沸石作为对照,模拟分析了CO2/CH4在Na^+、K^+、Cs^+和Ca^2+交换的MER型沸石中的吸附... MER型沸石在吸附分离CO2/CH4方面展现出良好的工业应用前景,受到广泛关注,但还缺乏理论基础数据。本文采用巨正则蒙特卡洛(GCMC)模拟方法,以全硅MER型沸石作为对照,模拟分析了CO2/CH4在Na^+、K^+、Cs^+和Ca^2+交换的MER型沸石中的吸附分离行为。结果表明:不同阳离子交换的MER型沸石对CO2和CH4的吸附符合Langmuir-Freundlich吸附等温线模型,平衡吸附量的大小顺序为:Ca-MER>Na-MER>K-MER>CsMER,与沸石的自由体积和比表面积大小顺序一致,且近似成线性关系,选用高价阳离子MER型沸石可以提高吸附量;CO2和CH4主要分布在沸石的pau笼中,在d8R笼和ste笼中也有少量分布;骨架外阳离子与CO2的强吸附作用和独特的八元环窗口孔径是MER型沸石对CO2/CH4混合组分表现出超高吸附选择性的原因,吸附选择性高达1000以上。综合吸附量、吸附热和吸附选择性分析指出,Na-MER和K-MER型沸石是优良的CO2吸附剂。本研究为MER型沸石吸附分离CO2/CH4提供了理论依据和实验指导。 展开更多
关键词 mer型沸石 吸附 分离 二氧化碳 分子模拟
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60mer长寡核苷酸微阵列构建的优化 被引量:2
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作者 温颖 马文丽 +2 位作者 吴清华 李凌 郑文岭 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期460-462,共3页
目的 优化长寡核苷酸芯片方阵的构建。方法 采用4种不同玻片表面,4种点样液溶解经设计高度特异性探针,制备长寡核苷酸芯片。样品经RD -梯度PCR扩增标记后与芯片杂交,扫描芯片后进行统计学分析。结果 点样液3×SSC与丙烯酰胺聚合... 目的 优化长寡核苷酸芯片方阵的构建。方法 采用4种不同玻片表面,4种点样液溶解经设计高度特异性探针,制备长寡核苷酸芯片。样品经RD -梯度PCR扩增标记后与芯片杂交,扫描芯片后进行统计学分析。结果 点样液3×SSC与丙烯酰胺聚合物表面(国产玻片)联合使用杂交效果最佳。结论 该研究优化了长寡核苷酸芯片微阵列的构建,为芯片的下游技术发展提供支持。 展开更多
关键词 60mer长寡核苷酸 微阵列构建 RD-PCR 信噪比
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