利用荧光MFLP标记技术分析烟草种质的遗传多样性

微卫星锚定片段长度多态性(MFLP)是一种新型分子标记技术,本研究依据该技术原理,通过将M13通用荧光接头连接在设计的SSR引物上对扩增产物进行荧光标记,建立了适合于烟草的荧光MFLP标记体系;在此基础上,利用该技术从144对选择性扩增引物组合中筛选出15对适宜的引物组合,对32份来自于不同国家和地区的烟草种质材料的遗传多态性进行了分析。试验结果显示,这些引物组合扩增的产物在32个烟草种质中的多态性范围为2～13个,平均4.3个;利用种质材料间遗传多态性开展的遗传相似性分析表明,32份烟草种质间的相似系数在0.40到0.83之间。运用UPGMA聚类分析和主坐标分析法,有效地将这些烟草种质材料的来源和类型进行了分类。结果表明,荧光MFLP标记技术能有效地发现供试烟草材料的DNA多态性,表明该技术适用于烟草遗传特性分析的研究和应用。

利用MFLP标记分析栽培种花生遗传多样性

利用5对多态性良好的锚定微卫星片段长度多态性(MFLP)引物,对包含两大亚种四大类型的18份花生栽培种质的遗传多样性进行分析。5对引物共扩增出291条带,其中多态性条带236条,多态率为81.1%。供试材料间的遗传相似系数值在0.3143～0.8286之间,平均为0.5862。UPGMA聚类分析将18份供试材料按照亚种聚为两类(I,II);在两大类群下,大多数品种基本按照类型聚类,少数存在交叉。本研究结果表明,MFLP分子标记技术能有效检测栽培种花生的遗传变异,且在遗传关系分析及分子分类上有较高的效率。

MFLP分子标记技术及其应用

微卫星锚锭片段长度多态性(MFLP)是建立在PCR技术基础上、结合了扩增片段长度多态性(AFLP)和微卫星锚锭引物技术(SSR-anchor primer)双重原理的新一代分子标记技术。与其他标记技术相比,MFLP具有分辨率高、重复性好、多态性强等优点。本文介绍了MFLP的原理、特点、技术流程,并阐述和讨论了其在遗传连锁图谱构建、目的基因定位、遗传多样性研究、标记辅助育种等方面的应用及前景,旨在为相关研究提供参考。

小麦条锈菌MFLP分子标记体系的建立与优化

【目的】建立并优化小麦条锈菌的MFLP技术体系。【方法】以小麦条锈菌混合菌种为材料,通过对DNA提取、限制性内切酶2次酶切、PCR双重扩增等试验因素的选择优化,建立适用于小麦条锈菌的MFLP分析体系。【结果】改良的CTAB/SDS法有较好的破壁效果,所提取的DNA品质良好,完全符合MFLP的操作要求。优化确定的最佳MseⅠ酶切反应时间为4h,预扩增最适退火温度为55℃,选择性扩增使用的模板为预扩增产物的100倍稀释物,其最适退火温度为58℃。【结论】建立的MFLP技术体系可提供清晰、稳定的MFLP指纹图谱,为小麦条锈菌等专性寄生菌的群体遗传学与流行学研究提供了新的技术手段和方法。

MFLP分子标记技术在花生上的应用初探

采用MFLP标记技术对两个栽培种花生DNA进行扩增分析。从160对MFLP引物中筛选出41对多态性条带引物,引物多态率为25.63%;每对多态性引物扩增带数约23～56条(其中多态性条带1～3条),共检测到差异条带59条;其中约有29条表现显性多态,15对表现共显性多态,共显性标记出现频率为34.09%。研究结果表明,MFLP标记在栽培种花生中具有较丰富的多态性和较高的共显性率,在遗传多样性分析和分子标记辅助育种等方面具有良好的应用前景。

MFLP分子标记技术及其在茶树上的应用前景

微卫星锚定片段长度多态性(Microsatellite-anchored fragment length polymorphism,MFLP)分子标记技术是结合AFLP和SSR双重原理创造的,具有无需预知基因组信息、多态性丰富、可靠性强、重复性好、属湿性共显性标记、易于转化序列特异性标记等优点。作为一种新型分子标记技术,在茶树的遗传育种上应用潜力大。

利用MFLP方法分析我国小麦地方品种及黄淮麦区主栽品种的遗传多样性

为明确小麦地方品种和生产主栽品种间的亲缘关系以及MFLP分子标记技术在小麦品种遗传多样性研究中的有效性,利用MFLP标记技术对24个地方品种和12个来自河北、山东和河南的生产主栽品种基因组DNA进行遗传多样性分析,并利用NTSYS pc 2.10软件对试验数据进行非加权组法（UPGMA）聚类研究。结果表明,5对MFLP引物共扩增出279条具有特异性的多态性谱带。主栽品种间遗传相似系数为0.6989~0.8746,其遗传距离比较近;而地方品种间及地方品种与生产品种间遗传多样性差异较大。利用34个MFLP指纹图谱标记位点编制了分子检索表,能成功区分36个小麦品种。研究结果还表明,MFLP分子标记技术可有效地应用于小麦品种间的亲缘关系和遗传多样性研究中。

菜薹种质遗传多样性的荧光MFLP标记分析

采用M13通用接头连接锚定引物,建立了适合于菜薹的荧光微卫星锚定片段长度多态性(MFLP)技术;在此基础上,从360对选择性扩增引物组合中筛选出9对适宜的引物组合,对收集的32份菜薹种质进行等位基因多态性分析;结果显示这些引物组合的扩增产物在32份菜薹种质中的等位基因多态性在10~31之间,平均为17.7个;多态性信息量在0.61~0.98之间,平均0.81。利用获得等位基因多态性进行的遗传相似性分析表明,32份菜薹种质间的相似系数在0.277~0.836之间,平均0.624;基于多态性数据,运用除权配对法(UPGMA)进行聚类分析,将这些菜薹种质材料分为2个组群和4个亚群。这些结果显示荧光MFLP标记技术能有效地发现供试菜薹种质材料的DNA多态性,表明该技术在菜薹遗传特性分析的研究和应用领域具有可行性。

利用荧光SSR和MFLP标记技术分析烟草核心种质的遗传多样性

了解烟草种质材料的遗传多样性,可为其有效利用与保护提供依据。据此,本研究采用荧光SSR和荧光MFLP技术,对来源于12个不同国家和地区94份烟草核心种质材料进行遗传多样性分析。结果显示,17对SSR和52对MFLP引物组合分别检测出34个和136个具多态性的等位变异位点,平均每对SSR和MFLP引物分别为2个和2.61个。SSR标记的多态性信息量(PIC)变幅为0.126 4~0.466 2,平均为0.281 1;MFLP标记的PIC值在0.119 5~0.803 4之间,平均为0.462 4。遗传多样性分析表明,94份烟草核心种质材料间的遗传距离在0.095 2~0.902 6之间,平均为0.453 9;遗传相似系数在0.444 4~0.905 5之间,平均为0.664 8。UPGMA聚类分析和主坐标分析均将94份材料分为6大类,且两种方法能相互对应、补充和验证。此外,依据12个不同地区烟草种质材料间的遗传一致度,可将其聚类为4个大组,其中第IV大组可以分为4个亚组。本研究结果表明94份烟草核心种质的遗传多样性较丰富,合理地利用这些种质材料,将有利于拓宽中国烟草品种的遗传基础。

茶树MFLP技术体系的建立及遗传多样性分析

微卫星锚定片段长度多态性(microsatellite-anchored fragment length polymorphism,MFLP)分子标记技术是结合AFLP和SSR双重原理创造的。本研究采用通用荧光引物M13-F-IRDye700(5'-CACGAC GTTGTAAACGAC-3'),利用MFLP分子标记技术建立了适合茶树的PCR反应体系,从324对引物体系中,筛选出6对最适合的引物对,对壶瓶山的44株茶树样品进行试验,分析其亲缘关系。6对MFLP选择性扩增引物共同扩增出288条带,其中多态性条带232条,多态性为80.6%,得出44株有性繁殖茶苗两两间的遗传相似系数在0.10~0.58之间,这表明同一地理位置,不同有性繁殖群体的基因组存在差异性。

棉花MFLP标记技术体系建立与适用性分析

目的：建立适用于棉花的稳定可靠的MFLP技术体系，初步分析该技术在棉花应用中的适用性。方法：以冀棉169为材料对试验因素进行选择优化，建立适用于棉花分析体系。利用32对MFLP引物组合对33B、冀棉20、中棉所12、鲁棉1号4个品种进行扩增，初步分析该技术在棉花应用中的适用性。结果：确定的最佳酶切反应时间为2h，预扩增最适退火温度为54℃，选择性扩增使用的模板为预扩增产物的20倍稀释物。利用32对引物组合对4个棉花品种进行扩增分析，其中14对引物组合产生多态性条带，引物多态率为43．75％，每个组合的多态性条带为1～5条不等。结论：建立的MFLP技术体系稳定可靠，在棉花遗传多样性分析和分子标记辅助育种等方面具有良好的应用前景。

烟草种质材料TSNA含量的关联分析

为寻找与烟叶TSNA含量显著关联的标记位点,利用分布于烟草24个染色体具多态性的SSR标记和MFLP标记,分析24份烟草种质材料的遗传多样性,在此基础上对烟叶中烟草特有亚硝胺(TSNA)含量的表型变异与标记多态性进行关联分析。结果显示,33对MFLP引物和28对SSR引物在24份烟草材料中共发现188个多态位点;群体结构分析将24份烟草材料分为3个亚群,且亚群划分与烟草类型(烤烟、晾晒烟和白肋烟)基本一致;关联分析发现1个SSR位点和6个MFLP位点至少与1种TSNA含量的相关性在0.01水平上显著,其中标记MFLP26与烤后烟叶中NNN含量的相关性在0.001水平上显著,表型变异解释率最高(R2=0.5831)。这些显著关联的分子标记可为筛选低TSNA含量的烟草材料提供参考。

菜心种质材料的分子身份证构建研究

建立菜心种质材料的分子身份证有利于菜心种质材料的收集、保存、管理和利用.利用荧光MFLP标记技术分析供试的36份菜心种质材料,从200对选择性扩增引物组合中筛选出扩增产物清晰稳定的18对引物组合.这些引物组合在36份菜心种质材料中有3～31等位变异,多态性信息量（PIC）和标记指数值（MI）分别在0.26～0.98和0.8～30.4之间.主坐标分析表明,18对引物组合可以区分各供试材料,并按遗传相似性将供试材料归为3个类群.考虑到使用最少引物组合区分不同种质材料,筛选和确定出PIC和MI值最高的3个MFLP选择性扩增引物组合（tfCCTA（CA）7/mAAG、tfGGTC（ATT）5/mCAA和tfCCTA（CA）7/mCTC）作为核心引物组合,建立3个引物组合检测到每份种质材料等位变异有（1）无（0）的二进制数据,并将其转换成简捷直观的16进制数据,从而构建了供试菜心种质材料的分子身份证。

最优场址问题的研究进展(英文)

３０年代以来，最优场址问题一直是运筹学界最活跃的研究领域之一．此问题具有深远的实际背景和广泛的实用价值．本文综述了最优场址问题的研究进展并对其发展历史进行了简单的回顾．主要介绍近年来最优场址问题研究的一些重要成果，对每一种成果进行了基本的评论．