咖啡因通过FAK/AKT/ROCK通路调控人脑胶质瘤U-373MG细胞的恶性生物学行为

目的:探讨咖啡因通过调节FAK/AKT/ROCK信号通路来影响人脑胶质瘤U-373MG细胞的增殖、迁移和侵袭能力。方法:常规培养U-373MG细胞,将其分为对照组、咖啡因低剂量(1 mmol/L)组、咖啡因高剂量(2 mmol/L)组、PF573228组(FAK抑制剂,1μmol/L)、咖啡因高剂量+SC79组(AKT激活剂,8mg/L)。用CCK-8法、Transwell小室实验、流式细胞术和WB法分别检测各组U-373MG细胞的增殖、迁移、侵袭及凋亡,以及U-373MG细胞中p-FAK、p-AKT、p-ROCK、Ki67、MMP-9蛋白表达水平。建立U-373MG细胞裸鼠移植瘤模型,观察咖啡因对移植瘤生长的影响,WB法检测移植瘤组织中相关蛋白的表达。结果:咖啡因、PF573228可显著抑制U-373MG细胞的增殖、迁移、侵袭能力,促进U-373MG细胞凋亡,抑制p-FAK、p-AKT、p-ROCK、Ki67、MMP-9蛋白的表达(均P<0.05),SC79则可部分逆转咖啡因对U-373MG细胞的作用(均P<0.05)。咖啡因可显著抑制移植瘤的生长及移植瘤组织中上述相关蛋白的表达(均P<0.05)。结论:咖啡因可通过抑制FAK/AKT/ROCK信号通路抑制U-373MG细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并促进其凋亡。

溶瘤新城疫病毒抑制IL-6诱导的人胶质母细胞瘤U87MG细胞的迁移和侵袭

目的:探讨溶瘤新城疫病毒(NDV)对IL-6诱导的人胶质母细胞瘤U87MG细胞增殖、迁移和侵袭的作用及其可能的机制。方法:将U87MG细胞分为对照组、IL-6组、NDV组、NDV+IL-6组,其中IL-6组与NDV+IL-6组用75 ng/mL IL-6预处理1 h,其余组用DMEM预处理1 h,后分别用DMEM、75 ng/mL IL-6、1 HU NDV、1 HU NDV+75 ng/mL IL-6处理24 h。MTT法、细胞划痕实验和Transwell侵袭实验分别检测IL-6、NDV对U87MG细胞增殖、迁移和侵袭的影响,WB法检测各组细胞JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3和MMP2蛋白的表达水平。结果:与对照组相比,IL-6组细胞迁移率显著升高(P<0.05),侵袭细胞数目显著增多(P<0.01);与IL-6组相比,NDV+IL-6组U87MG细胞增殖率显著降低(P<0.05),细胞迁移率和侵袭细胞数目均显著降低(均P<0.01)。WB实验结果显示,与对照组相比,IL-6组p-STAT3/STAT3比值显著升高(P<0.01),NDV组p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比值显著降低(P<0.05,P<0.01),MMP-2蛋白表达量显著降低(P<0.01);与IL-6组相比,NDV+IL-6组p-STAT3/STAT3比值、MMP-2蛋白表达量均显著降低(均P<0.05)。结论:NDV能抑制IL-6对人脑胶质瘤U87MG细胞迁移和侵袭的诱导作用,其机制可能与JAK2/STAT3信号通路的参与调控有关。

Leptin促进人脑胶质瘤U87MG细胞的迁移和侵袭

目的:探讨瘦素(leptin)对人脑胶质瘤U87MG细胞迁移及侵袭能力的影响及其机制。方法:Leptin处理U87MG细胞,采用细胞划痕实验检测U87MG细胞的迁移能力,Transwell实验检测U87MG细胞的侵袭能力,RT-PCR及Western blot-ting法检测U87MG细胞中MMP-2及MMP-9 mRNA和蛋白的表达。结果:Leptin明显促进U87MG细胞迁移能力[(152.42±3.29)vs(83.24±2.61)μm,P<0.05]和侵袭能力[(31.78±5.04)vs(17.03±2.41)个细胞,P<0.05],leptin能显著上调U87MG细胞中MMP-2、MMP-9 mRNA[(0.76±0.04)vs(0.35±0.02),(0.84±0.02)vs(0.41±0.06);均P<0.05]及蛋白[(0.79±0.03)vs(0.23±0.01),(0.81±0.05)vs(0.39±0.03);均P<0.05]的表达。MMP抑制剂GM6001(10μmol/ml)可以逆转leptin对U87MG细胞迁移[(82.05±2.98)vs(81.76±3.25)μm,P>0.05]和侵袭能力[(19.23±2.46)vs(18.02±1.98)个细胞,P>0.05]的影响。结论:Leptin可以促进人脑胶质瘤U87MG细胞的侵袭及迁移,其机制可能与上调MMP-2、MMP-9的表达有关。

转铁蛋白结合镱跨膜转运及镱对U-87 MG细胞增殖的影响

目的 :研究转铁蛋白 /转铁蛋白受体转运系统对转铁蛋白结合镱 (Yb2 Tf)跨膜转运进入神经胶质瘤U- 87MG细胞 ,以及转铁蛋白结合镱和非转铁蛋白结合镱对U - 87MG细胞增殖的影响。方法 :细胞培养及ICP -MS镱测定法。结果 :随Yb2 Tf浓度增加 ,细胞镱摄入量增加。当浓度达 2 μmol/L时 ,细胞摄取镱基本达到饱和状态。细胞摄入镱量也随镱 :apoTf摩尔比增大而增加 ,当摩尔比达到 1.5时 ,摄入量达到最高水平。 0 .4 μmol/LYb2 Tf可显著抑制U - 87MG细胞增殖 ,而Yb3 +浓度高达 10 μmol对细胞增殖仅有轻微影响。 结论 :转铁蛋白 /转铁蛋白受体介导的膜转运可能是镱跨越U - 87MG细胞的机制之一。转铁蛋白结合Yb3 +可以有效地抑制U - 87MG细胞的增殖。

腺病毒介导IL-24基因诱导人脑胶质瘤U87MG细胞的凋亡

目的:研究腺病毒介导IL-24基因表达载体(Ad-IL-24)对人脑胶质瘤U87MG细胞的抑制作用,初步探讨其作用机制。方法:将本科室构建的Ad-IL-24感染U87MG细胞,RT-PCR法检测IL-24基因的表达,MTT法和流式细胞术检测U87MG细胞的生长和凋亡,激光共聚焦显微镜观察U87MG细胞凋亡的形态学变化,RT-PCR法检测Bax、Bcl-2基因mRNA的表达,Western blotting检测caspase-3的活化。结果:Ad-IL-24感染U87MG细胞后,IL-24在U87MG细胞中有明显表达,并抑制U87MG细胞生长、诱导其凋亡、出现典型的凋亡细胞核形态学改变。Ad-IL-24可上调U87MG细胞中Bax基因、下调Bcl-2基因的表达,并诱导caspase-3蛋白的活化。结论:Ad-IL-24可诱导U87MG细胞凋亡,其机制可能与上调Bax基因、下调Bcl-2基因表达,并活化caspase-3有关。

人脑胶质瘤中DNA拓扑异构酶-Ⅱα的表达及其对胶质瘤U87MG细胞凋亡的影响

目的研究DNA拓扑异构酶-Ⅱα(Topoisomerase-Ⅱα,Topo-Ⅱα)基因在人脑胶质瘤中的表达改变及其对胶质瘤U87MG细胞凋亡的影响。方法 Real-time PCR检测25例脑胶质瘤及相应癌旁组织中Topo-ⅡαmRNA的表达。将Topo-Ⅱα基因特异性的siRNA转染U87MG细胞。转染后,Western Blot检测转染后Topo-Ⅱα蛋白的表达,双标流式细胞法检测细胞凋亡率。结果与癌旁组织相比,Topo-ⅡαmRNA在脑胶质瘤组织中表达明显上调。转染后,U87MG细胞中的Topo-Ⅱα蛋白表达明显降低,同时,凋亡率明显增加。结论 Topo-Ⅱα基因在脑胶质瘤中存在表达异常,其表达降低能够促进细胞凋亡。

稳定表达EGFRvIII的U87MG细胞株的建立与鉴定

目的:构建稳定表达表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)的U87MG细胞株。方法:采用电转染方法将pcD-NA4/TO-EGFRvⅢ质粒导入U87MG细胞,加入zeocin筛选,进一步将细胞有限稀释并克隆化培养以建立稳定的转染细胞株。应用RT-PCR、Western blot及细胞免疫荧光染色方法鉴定稳定表达EGFRvⅢ基因的细胞株。结果:经RT-PCR鉴定发现V6号和V24号单克隆细胞株EGFRvⅢ基因mRNA水平高表达,进一步Western blot及细胞免疫荧光染色方法鉴定发现V6号细胞株EGFRvⅢ蛋白水平高表达。结论:成功建立了稳定表达EGFRvⅢ的U87MG细胞株,为进一步的抗肿瘤治疗及其机制研究提供基础。

早期生长反应因子对U87MG细胞Aβ40表达的影响

目的:研究早期生长因子EGR1对U87MG细胞Aβ40表达的影响。方法:构建EGR1表达质粒并转染U87MG(实验组),以转染空白质粒的U87MG细胞作为对照。采用qRT-PCR法检测两组EGR1 mRNA的表达;收集细胞培养液用ELISA法检测Aβ40的水平;提取总蛋白用蛋白印迹法检测BACE1和PS1蛋白的表达。结果:质粒成功构建并表达。实验组EGR1 mRNA表达水平较对照组明显增高(P<0.001);实验组细胞培养液中Aβ40水平较对照组增高(P<0.001);实验组BACE1蛋白的表达较对照组增加(P<0.001);两组PS1蛋白的表达差异无统计学意义(P=0.367)。结论:EGR1在体外可能使Aβ40表达增加,且可能与上调BACE1有关。

表达VASH1基因的人脑胶质瘤U-87MG细胞对化疗药物敏感性的变化

目的探讨表达人血管生成抑制因子1(VASH1)的人脑胶质瘤U-87MG细胞对化疗药物的敏感性变化。方法构建针对VASH1的慢病毒载体p GCL-GFP-VASH1,经测序鉴定后转染293T细胞,筛选出适合浓度的慢病毒转染人脑胶质瘤U-87MG细胞,荧光显微镜下检测转染效率;通过RT-PCR和Western blot分析U-87MG细胞VASH1 m RNA和蛋白表达水平;用CCK-8法检测U-87MG细胞在化疗药物顺铂和替莫唑胺作用下的存活率。流式细胞仪检测U-87MG细胞凋亡。结果成功构建p GCL-GFP-VASH1慢病毒载体,并成功转染U-87MG细胞,转染率达70%以上;RT-PCR和Western blot结果证实转染VASH1慢病毒载体的U-87MG细胞表达VASH1 m RNA和蛋白。在顺铂或替莫唑胺作用下,表达VASH1的U-87MG细胞存活率均较未表达VASH1的U-87MG细胞明显降低(P<0.01),而且U-87MG细胞凋亡率明显增加(P<0.01)。结论 VASH1慢病毒载体转染U-87MG细胞可使其稳定表达VASH1,并提高人脑胶质瘤U-87MG细胞对化疗药物敏感性、增加细胞凋亡率。

PEDF对脑胶质瘤U87MG细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨色素上皮衍生因子(PEDF)对脑胶质瘤U87MG细胞增殖与凋亡的影响。方法分组培养U87MG细胞,对照组不添加PEDF蛋白,干预组分别添加80nmol/L、160nmol/L、320nmol/L的PEDF蛋白,采用MMT法检测不同时间点各组细胞增殖抑制率,采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率并进行比较。结果同一时间点,各浓度PEDF干预组的细胞增殖抑制率均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);各浓度PEDF干预组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);相同浓度PEDF环境下,各时间点间细胞增殖抑制率差异亦有统计学意义(P<0.05)。随着PEDF浓度增高,U87MG细胞凋亡率呈增高趋势。结论 PEDF能够抑制脑胶质瘤U87MG细胞增殖并能促其凋亡,其抑制增殖水平与浓度、作用时间相关,促进凋亡水平与浓度相关。

MicroRNA-21反义寡核苷酸可以抑制U373MG细胞对替尼泊苷VM-26的耐受性

脑胶质瘤患者对化疗药物的耐受性是亟待解决的问题之一.microRNA参与了肿瘤发生发展的诸多过程.选取目前临床上常用的治疗脑恶性胶质瘤的化疗药物替尼泊苷(teniposide)VM-26和人恶性胶质瘤细胞系U373MG为研究对象,通过反义寡核苷酸技术,应用MTT及细胞生长曲线等方法,发现抑制microRNA-21的功能后,细胞活性明显降低,且可以在一定程度上抑制U373MG细胞对VM-26作用的耐受性,而且这种耐受性的抑制与细胞生长速度关系不大,从而为指导临床用药,探索肿瘤细胞耐受化疗药物的机制提供新的线索.

铅引发细胞株U373MG细胞表现肿瘤坏死因子α之信号传导通路

[目的 ]在研究探究铅暴露对于神经胶原细胞的影响以及其诱发细胞内信号传导的通路。 [方法与结果 ]在生物体外培养条件下 ,低浓度的铅暴露 ( 0 0 1μmol/L)会诱发神经胶原细胞株U 373MG内的肿瘤坏死因子 α(TNF α)过量产生。而且 ,C5 7BL/6小鼠经腹腔注射含 12 5mg/kg体重之醋酸铅溶液后 ,也能诱导小鼠脑部之神经胶原细胞及神经细胞表达TNF α。TNF α可能会刺激astroglia的增生 ,或者使neuroncells死亡 ,并且这样的状况一般被认为与病理性的astrogliosis与demyelinisa tion有关。虽然铅使细胞表达TNF α ,但是不管是在体外培养的状态 ,分析U 373MG细胞增生速率以及用propidiumiodinestain ing侦测细胞凋亡 (apoptosis)的数目所得的结果 ;或是利用 (ter minaldeoxynucleotidyltransferaselabeling ;TUNEL)染色法直接分析铅处理以后小鼠的脑部神经和胶原细胞凋亡的细胞数目 ,结果显示铅并不会直接抑制细胞生长或是引起凋亡。同样的以细菌内毒素 (lipopolysaccharide ;LPS)处理小鼠 ( 10mg/kg体重 )或是细胞株U 373MG也不会直接抑制细胞生长或是引起凋亡。虽然细胞的存活所受的影响会因实验条件而有些差异性。除此之外 ,U373MG细胞在暴露 0 0 1μmol/L到 10 μmol/L等不同浓度之醋酸铅后 。

高良姜素通过激活cGAS/STING信号通路抑制骨肉瘤MG63细胞的恶性生物学行为

目的:探讨高良姜素(Gal)是否通过调节cGAS/STING信号通路影响骨肉瘤MG63细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡。方法:体外培养人骨肉瘤MG63细胞,分别使用0、5、15、25、50、100、200μmol/L的Gal培养48 h后,CCK-8法检测Gal对细胞活力的影响。将MG63细胞分为对照组(未处理细胞)、Gal低浓度组(Gal-L组,50μmol/L Gal处理)、Gal高浓度组(Gal-H组,100μmol/L Gal处理)和Gal-H+STING抑制剂组(Gal-H+H-151组,100μmol/L Gal+8μmol/L H-151处理)。采用EdU染色法、划痕愈合实验、Transwell小室法、流式细胞术检测各组细胞增殖活力、迁移、侵袭和凋亡能力,WB法检测各组细胞中cGAS、STING蛋白的表达水平。结果:与对照组比较,Gal-L组、Gal-H组细胞增殖活力、迁移、侵袭能力均显著降低(均P<0.05),细胞凋亡率和cGAS、STING蛋白表达水平均显著升高(均P<0.05);与Gal-H组比较,Gal-H+H-151组细胞增殖活力、迁移和侵袭能力均显著升高(均P<0.05),细胞凋亡率和cGAS、STING蛋白表达水平均显著降低(均P<0.05)。结论:Gal可能通过激活cGAS/STING信号通路抑制骨肉瘤MG63细胞增殖、迁移、侵袭并促进细胞凋亡。

成骨诱导因子缓释系统修饰国产多孔钽对MG63细胞功能的影响

背景:课题组前期研究发现,国产多孔钽有利于MG63细胞的早期黏附、增殖,可用作骨组织工程支架材料。目的:进一步探讨成骨诱导因子缓释系统修饰的国产多孔钽对MG63细胞黏附增殖及分化能力的影响。方法:在聚乳酸-羟基乙酸共聚化合物凝胶中加入体积分数为15%的成骨诱导因子溶液,构成成骨诱导因子缓释系统。取第3代MG63细胞,分别接种于单纯多孔钽表面(对照组)、聚乳酸-羟基乙酸共聚化合物凝胶涂覆的多孔钽表面(凝胶涂覆组)、成骨诱导因子缓释系统涂覆的多孔钽表面(缓释系统涂覆组),共培养5 d后,利用鬼笔环肽染色观察材料表面细胞骨架,流式细胞仪检测细胞增殖,Western blot、RT-qPCR检测材料表面细胞Ⅰ型胶原、骨桥蛋白、RUNX-2的蛋白和mRNA表达。结果与结论:①鬼笔环肽染色显示,MG63细胞在3组多孔钽表面及内部黏附生长,细胞分泌的基质覆盖在材料表面;②流式细胞仪检测显示,缓释系统涂覆组细胞增殖快于对照组、凝胶涂覆组(P<0.05);③Western blot、RT-qPCR检测显示,缓释系统涂覆组Ⅰ型胶原、骨桥蛋白、RUNX-2的蛋白和mRNA表达均高于对照组、凝胶涂覆组(P<0.05);④结果表明,经成骨诱导因子缓释系统修饰的国产多孔钽有利于MG63成骨细胞的黏附、增殖及分化。

骨碎补UPLC指纹图谱与人骨肉瘤细胞MG63中碱性磷酸酶活性的谱效关系研究

建立骨碎补生品和砂烫品提取物的UPLC指纹图谱,并研究骨碎补提取物与人骨肉瘤细胞MG63中碱性磷酸酶(ALP)活性之间的谱效关系。采用UPLC法建立骨碎补生品和烫品的指纹图谱并通过UPLC-Q-TOF MS法对其化学成分进行鉴别;通过测定MG63细胞中ALP活性检测骨碎补提取物对MG63细胞成骨分化的影响;采用灰色关联度分析、双变量相关性分析以及偏最小二乘回归分析法分析骨碎补生品和烫品的UPLC特征指纹峰与其促ALP活性之间的谱效关系。在标定的12个共有峰中,确定了4、5、12号峰与ALP活性呈正相关,其对应的物质依次是咖啡酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、儿茶素7-葡糖苷、柚皮苷,为深入研究骨碎补的促成骨分化活性物质基础提供依据。

黑骨藤对高表达表皮生长因子受体突变体Ⅲ的人胶质母细胞瘤细胞DKMG的影响及机制

目的探讨黑骨藤对高表达表皮生长因子(EGF)受体突变体Ⅲ(EGFRvⅢ)的人胶质母细胞瘤细胞DKMG的影响及其机制。方法取对数生长期的DKMG和不表达EGFRvⅢ的人脑星形胶质母细胞瘤细胞U87MG,各自分为空白(Con)组(DMEM培养液)、低浓度黑骨藤组(100 mg/L黑骨藤培养液)、中浓度黑骨藤组(200 mg/L黑骨藤培养液)及高浓度黑骨藤组(400 mg/L黑骨藤培养液),处理细胞24 h,采用细胞增殖与毒力检测试剂盒(MTS)检测各组DKMG、U87MG细胞的存活率,采用流式细胞术检测各组DKMG细胞凋亡率;实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(qRT-PCR)检测各组DKMG细胞中EGFRvⅢ、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)及BCL2-Associated X(Bax)的信使核糖核酸(mRNA)表达,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组DKMG细胞中EGFRvⅢ、Bcl-2、Bax、半胱氨酸蛋酶家族(Caspase-3、Cleaved caspase-3)蛋白的表达。结果MTS检测显示,与Con组相比,各浓度黑骨藤组DKMG细胞存活率明显降低(P<0.05),各浓度黑骨藤组U87MG细胞存活率比较、差异无统计学意义(P>0.05);流式细胞术结果表明,与Con组比较,各浓度黑骨藤组DKMG细胞凋亡率明显增加(P<0.05);qRT-PCR结果表明,与Con组比较,各浓度黑骨藤组DKMG细胞中EGFRvⅢ和Bcl-2 mRNA表达降低(P<0.05),Bax表达无变化(P>0.05);Western blot结果显示,各浓度黑骨藤组DKMG细胞中EGFRvⅢ、Bcl-2及Caspase-3蛋白表达下降(P<0.05),Bax、Cleaved caspase-3蛋白表达升高(P<0.05)。结论黑骨藤可诱发DKMG细胞凋亡,产生细胞杀伤作用,其机制可能与下调EGFRvⅢ、Bcl-2、Caspase-3表达及上调Bax、Cleaved caspase-3表达有关。

UMSCs对U87MG细胞增殖的影响

目的:通过对研究脐带间充质干细胞(Umbilical cord mesenchymal stell cells,UCMSCs)与人恶性胶质母细胞瘤细胞U87MG细胞(U87 Malignant glioma cells)体外共培养,模拟肿瘤生长的内环境,以及其对U87MG细胞增值作用的影响及肿瘤细胞与间充质干细胞的共培养方法。方法:提取人脐带间充质干细胞进行体外培养、扩增,用MTT法测定UMSCS上清液对U87MG的影响,用瑞士染色法检测U87MG形态学变化。结果:MTT比色法结果显示UMSCS对U87MG有抑制作用。96小时培养后1:8、1:4、1:2及未稀释的UMSCs上清液对U87MG的抑制率分别为17%,24%,37.2%及46.4%,U87MG细胞形态亦随着培养时间的延长由多角形变为梭形,突起消失,细胞间骨架结构断裂。结论:通过对共培养前后U87MG与UMSCs共培养后形态学变化、生长曲线变化及对生长周期的影响作用的观察分析,得出UMSCs及其上清液对U87MG有抑制作用,而且呈时间及浓度依赖性。

过表达miR-139-5p对胶质母细胞瘤U87MG细胞增殖、侵袭的影响

目的探讨过表达miR-139-5p对胶质瘤U87MG细胞增殖和侵袭的影响,并初步分析其可能机制。方法在胶质瘤U87MG细胞中瞬时转染miR-139-5p并用real-time PCR方法验证其转染效率,CCK-8法检测转染后各组U87MG细胞的增殖能力,Transwell实验检测转染后各组U87MG细胞的侵袭能力,Western blot检测转染后各组U87MG细胞中BMI1蛋白的表达,应用生物信息网站Targetscan和双荧光素酶报告基因实验验证BMI1是否为miR-139-5p的靶基因。结果 miR-139-5p过表达使U87MG细胞增殖能力下降,侵袭能力下降,U87MG细胞中BMI1蛋白表达下降,生物信息学分析及双荧光素酶实验证实BMI1为miR-139-5p的靶基因。结论过表达miR-139-5p抑制U87MG细胞增殖及侵袭能力,与下调BMI1的表达相关。

姜黄素对U87MG细胞体外生长及血管生成拟态的影响

目的观察姜黄素对人恶性胶质瘤细胞体外生长及血管生成拟态的影响及姜黄素的干预作用。方法培养细胞,普通显微镜下观察姜黄素对U87MG细胞血管生成拟态的影响,MTT法筛选姜黄素最佳浓度后将其分为4组,采用免疫细胞化学技术、WestenBlot技术检测相关蛋白的表达情况,PCR技术检测基因表达变化。结果人恶性胶质母细胞瘤细胞体外培养时可发生血管生成拟态现象,姜黄素干预后血管生成拟态现象不明显,VE-cadherin/EphA2/PI3K/MMP-2细胞信号转导通路中各因子蛋白和mRNA的表达下降。结论姜黄素可能通过影响VE-cadherin/EphA2/PI3K/MMP-2细胞信号转导通路中各因子干预血管生成拟态现象,从而达到抑制胶质母细胞瘤生长的作用。

异硫氰酸苄酯抑制人胶质瘤U87MG细胞体外侵袭和诱导凋亡的作用和机制

目的研究异硫氰酸苄酯对人胶质瘤U87MG细胞体外侵袭和凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法采用MTS实验考察异硫氰酸苄酯对肿瘤细胞体外增殖的抑制作用;2,5μmol·L-1异硫氰酸苄酯作用24 h后,采用Transwell实验、黏附实验和划痕实验观察异硫氰酸苄酯对人胶质瘤细胞侵袭、黏附和迁移能力的影响;应用Real-time-PCR和Western blot法检测相应浓度异硫氰酸酯处理后人胶质瘤U87MG细胞中MMP-2、MMP-9、CD44、Survivin、Bcl-2、Net1、Roh A、caspase-3、caspase-8和p-AKT的表达变化;应用报告基因技术检测NF-κB转录活性的变化;采用ELISA法测定胞内8-OH-d G含量;10,20μmol·L-1异硫氰酸酯作用24 h后,采用流式细胞术观察其对细胞凋亡的作用。结果异硫氰酸苄酯可显著抑制人胶质瘤U87MG细胞体外增殖;与0μmol·L-1组相比,2,5μmol·L-1异硫氰酸苄酯对人胶质瘤细胞U87MG侵袭、黏附和迁移能力有明显的抑制作用;不同浓度异硫氰酸苄酯处理后,肿瘤细胞MMP-2、MMP-9、CD44、Survivin、Bcl-2、NET1和Rho A的m RNA和蛋白表达、AKT磷酸化水平和NF-κB转录活性明显下调,caspase-3和caspase-8表达以及8-OH-d G含量显著上调;10,20μmol·L-1异硫氰酸苄酯可显著诱导细胞凋亡。结论异硫氰酸苄酯抑制人胶质瘤细胞U87MG的侵袭能力,诱导细胞凋亡,其机制可能与抑制AKT/NF-κB信号转导途径,进而调节侵袭和凋亡相关基因表达有关。