胃癌单抗MGd1的噬菌体呈现型ScFv的制备

目的制备胃癌单抗 MGd1的单链可变区片段 (single chain variable fragm ent,Sc Fv) ,为胃癌体内诊疗研究提供候选靶向载体分子。方法从 MGd1杂交瘤分离 m RNA,RT- PCR分别扩增抗体重、轻链可变区基因 (VH和 VL DNA) ,二者经 linker DNA连接形成 Sc Fv DNA。将 Sc Fv DNA与载体 p CANTAB5 E的连接产物转化于大肠杆菌 TG1,经 M13KO7感染后 ,获得重组噬菌体抗体 Sc Fv。以高表达 MGd1结合抗原的细胞株 KATO 对重组噬菌体抗体 Sc Fv进行两轮筛选后 ,随机挑取克隆经 EL ISA筛选 MGd1Sc Fv单克隆 ,并对其结合抗原的能力进行鉴定。结果 VH、VL 和 Sc Fv DNA分别约为 340、32 0和 75 0 bp。经两轮亲和筛选后 ,在随机筛检的 30个克隆中得到 12个噬菌体呈现型 MGd1Sc Fv单克隆 ,其中结合抗原能力强的克隆有 5个。结论用噬菌体呈现技术成功地获得了单抗 MGd1的 Sc Fv,为拓展该抗体的应用范围奠定了基础。

单克隆抗体MGd1对胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究不同浓度的MGd1对体外培养胃癌细胞SGC-7901增殖及凋亡的影响。方法:采用MTT法测定不同浓度MGd1对SGC-7901生长抑制作用;流式细胞术(FCM)进行细胞凋亡分析。激光共聚焦显微镜观察MGd1抗原(MGd1-Ag)的亚细胞定位。结果:MTT结果显示不同浓度的MGd1均对SGC-7901细胞产生明显的抑制效应(P=0.02);流式细胞术分析发现MGd1可诱导SGC-7901发生凋亡并呈浓度和时间依赖性(P<0.01);共聚焦显微镜结果显示MGd1-Ag主要定位于细胞膜上。结论:以上结果证实胃癌特异性单抗MGd1可抑制SGC-7901的增殖并促进凋亡发生。它可能通过与细胞膜上抗原特异性结合,影响下游信号传导,从而发挥抑制效应。

反向间接血凝法测定血清中MG_7、MGd_1抗原的价值

恶性肿瘤的血清学诊断多以放射性同位素法和免疫酶法为主,由于操作复杂,受仪器、试剂的限制和同位素半衰期的影响,不便于基层推广使用。本研究应用RPHA法测定人血清中MG_7、MGd_1抗原(MG-AgS),探讨其对胃癌的诊断价值。

MGd_1-KLH加佐剂免疫同系BALB/c小鼠制备抗独特型抗体的免疫效果评价

ＭＧｄ１－ＫＬＨ加佐剂免疫同系ＢＡＬＢ／ｃ小鼠制备抗独特型抗体的免疫效果评价＊刘宪玲樊代明（第四军医大学西京医院消化病研究所，西安７１００３２）抗独特型抗体（ａｎｔｉ－Ｉｄ）是针对抗体分子可变区高变区的抗原决定簇（又称独特位）的抗体。依其针对的独特位...

单克隆抗体MG_7和MG_(d1)在卵巢肿瘤中的含量及临床意义

目的 探讨单克隆抗体MG7、MGd1在卵巢肿瘤中的表达与临床相关性。方法 采用免疫荧光流式细胞术检测 10例正常卵巢组织、2 4例良性卵巢肿瘤及 48例恶性卵巢肿瘤细胞中MG7、MGd1的FI值 ,并进行比较分析。结果 卵巢恶性肿瘤的MG7、MGd1FI值及阳性表达率明显高于良性肿瘤组 (P <0 .0 5 ) ,卵巢粘液性癌的阳性表达率明显高于浆液性癌 ,宫内膜样癌 (P均 <0 .0 5 )。而恶性生殖细胞肿瘤MG7、MGd1的表达率均为 80 % ,与粘液性癌无显著差异 (P >0 .0 5 )。 5例卵巢转移性腺癌中 ,有 2例胃肠道来源的肿瘤MG7、MGd1为阳性表达。良性肿瘤中有 1例复发性粘液性瘤 ,其MG7,MGd1均为阳性 ,而其余MG7或MGd1为阳性表达者均为生殖细胞肿瘤。结论 免疫荧光流式细胞术检测卵巢肿瘤组织中单克隆抗体MG7、MGd1的表达 ,是诊断卵巢癌的一种可行的方法 ,可作为卵巢粘液上皮癌的监测指标。并证实了胃癌与卵巢癌具有共同抗原 ,从而可帮助判断卵巢转移性肿瘤的组织来源。