荧光PCR熔解曲线法对抗结核药物耐药性的诊断价值

目的 评价荧光PCR熔解曲线法对抗结核药物利福平、异烟肼、氟喹诺酮、二线注射类药物(卡那霉素、阿米卡星、卷曲霉素)耐药性的诊断价值。方法 收集2018年1月~2019年5月在浙江大学医学院附属杭州市胸科医院收治的培养阳性且具有荧光PCR熔解曲线和BACTEC MGIT 960药敏结果的205例资料。以BACTEC MGIT960药敏结果为金标准,评价荧光PCR熔解曲线法对抗结核药物利福平、异烟肼、氟喹诺酮、二线注射类药物耐药性的诊断价值。结果 荧光PCR熔解曲线法敏感而BACTEC MGIT960药敏耐药的例数,在利福平、异烟肼、氟喹诺酮、二线注射类分别为1、9、1、1例。荧光PCR熔解曲线法耐药而BACTEC MGIT960药敏敏感的例数,在利福平、异烟肼、氟喹诺酮、二线注射类分别为2、1、2、0例。两种技术方法的总体符合率,在利福平、异烟肼、氟喹诺酮、二线注射类分别为98.54%、95.12%、98.54%、99.51%。荧光PCR熔解曲线法检测利福平耐药性的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、Kappa值分别是96.96%、98.84%、94.12%、99.42%、0.946,对异烟肼耐药性的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、Kappa值分别是80.43%、99.37%、97.37%、94.61%、0.851,对氟喹诺酮耐药性的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、Kappa值分别是93.33%、98.94%、87.50%、99.47%、0.895,对二线注射类药物耐药性的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、Kappa值分别是85.71%、100.00%、100.00%、99.50%、0.921。结论 荧光PCR熔解曲线法对利福平、异烟肼、氟喹诺酮、二线注射类药物的耐药性有较好的辅助诊断价值,适合临床结核病患者的早期耐药性筛查。

肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF联合血清TSPOT-TB在病原学阴性肺结核的诊断价值

肺结核是由结核杆菌引起的呼吸道传染疾病,主要临床表现为咳嗽、咳血、午后低烧、夜间可有盗汗、乏力、食欲减退、消瘦等^([1])。肺泡灌洗液利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(Xpert MTB/RIF)是基于核酸扩增的一种半巢式荧光定量PCR体外分子诊断技术,该技术可操作性、敏感性均较高。

荧光PCR熔解曲线技术在结核病耐药诊断中的应用价值

目的探讨荧光PCR熔解曲线法对痰样本的利福平和异烟肼相关耐药基因的检测效能。方法回顾性分析2019年7月—2020年7月沈阳市第十人民医院收取的254例痰样本检验结果,以BACTEC MGIT 960液体药敏(以下简称MGIT 960药敏)为参考标准,评价熔解曲线法检测利福平、异烟肼耐药性的效能。结果与MGIT 960药敏结果比较,利福平耐药检测的敏感性、特异性和Kappa值分别为89.6%、95.6%和0.83;异烟肼耐药检测的敏感性、特异性和Kappa值分别为81.5%、98.9%和0.85。在初治患者中具有较好的一致性,优于复治患者。结论应用熔解曲线法检测患者痰样本的利福平和异烟肼相关耐药基因,与MGIT 960药敏法比较具有较好的敏感度、特异度和一致性,可快速检测出患者的耐药情况和耐多药结核病(MDR-TB)患者,为临床患者尤其是初治患者提供快速有效的化疗参考方案。

微阵列芯片技术在结核分枝杆菌耐药性检测中的应用

目的评价微阵列芯片法与BACTEC MGIT 960液体药敏(简称MGIT960药敏)、罗氏比例法药敏(简称罗氏比例法)在结核分枝杆菌(MTB)对异烟肼(INH)、利福平(RFP)药敏试验检测方面的差异,用于指导临床用药。方法选择医院临床科室2016年3月—2017年11月期间确诊及疑似结核病的住院和门诊患者标本,同时采用微阵列芯片法、MGIT960药敏和罗氏比例法对其进行结核分枝杆菌检测,选择3种方法检测均为阳性的446例患者标本进行异烟肼和利福平药敏检测,比较三者检测结果的差异性。结果分别以MGIT960药敏结果和罗氏比例法为参照,微阵列芯片法检测MTB对异烟肼耐药性的灵敏度分别为84.8%和83.5%、特异度分别为99.7%和98.5%、Kappa值分别0.885和0.855,对利福平耐药性的灵敏度分别为96.2%和93.7%、特异度分别为93.8%和93.5%、Kappa值分别为0.817和0.796,表明微阵列芯片法和另外两种方法对异烟肼和利福平耐药性的检测具有极好的一致性;此外,MGIT960药敏和罗氏比例法药敏不一致的MTB样本采用微阵列芯片法检测,结果显示,MGIT960药敏和罗氏比例法分别与微阵列芯片法比较,利福平的耐药性符合率分别为77.8%和88.9%,异烟肼的耐药性符合率分别为100.0%和75.0%,表明两种表型药敏不一致的MTB样本可能存在异质性耐药。结论微阵列芯片法与MGIT960药敏和罗氏比例法药敏比较,对异烟肼和利福平耐药性检测具有极好的一致性,具有快速、精准、较高的灵敏度和特异度,对于表型药敏不一致的临床样本采用微阵列芯片法检测,可对其进行验证并为临床上异质性耐药的治疗提供更好的实验室依据。