胃癌耐药相关抗体MGr1筛选文库获得的基因MGr1-Ag1在胃癌组织中表达的研究

目的:为研究肿瘤的多药耐药现象,应用胃癌耐药相关的单克隆抗体MGr1筛选肿瘤耐药细胞表达文库获得的一个稳定阳性克隆的cDNA片段MGr1-Ag1,检测MGr1-Ag1在胃癌组织中的分布及表达水平.方法:利用原位杂交技术,对MGr1-Ag1mRNA在胃癌组织中的分布进行了检测,以了解其在胃癌中的表达情况及意义.结果:MGr1-Ag1mRNA定位在胃腺体细胞的胞质中,为蓝色小颗粒,呈弥漫性分布.MGr1-Ag1mRNA在SGC7901/VCR阳性信号明显高于SGC7901,胃癌与癌旁组织相比,MGr1-Ag1mRNA的阳性表达率均有显著差异(P<0.05).MGr1-Ag1mRNA在胃癌(50.00%)、癌旁组织(71.42%)、高分化腺癌(68.75%)和中分化腺癌组织(57.14%)中的阳性表达率无显著差别,但高分化组和中分化组都与低分化腺癌组织(10.00%)差别显著(P<0.05).此外,MGr1-Ag1mRNA还分布于小肠及大肠腺体内,因例数偏少,未做统计.结论:MGr1-Ag1与胃癌的分化程度有关,随着组织的分化程度增高,MGr1-Ag1mRNA的阳性表达率增加.

MGr1—Ag维持耐药表型与蛋白激酶C有关

［韩英，时永全，郑永悦，聂永战，张宏博，张淼莉，潘伯荣，樊代明. 世界华人消华杂志，2001;9(5):517-521］ 目的探讨MGr1-Ag维持耐药表型与蛋白激酶C的关系. 方法用免疫细胞化学方法检查MGr1-Ag在胃癌SGC7901细胞系及耐药亚系的表达；ELISA及点印迹方法检测胃癌SGC7901细胞系及其耐药亚系细胞培养上清中MGr1-Ag的表达；免疫荧光双标记及共聚焦显微镜技术观察MGr1-Ag与PKCα的相关表达；竞争蛋白结合法检测单克隆抗体MGr1-1对PKC活性的影响. 结果 MGr1-Ag在胃癌SGC7901细胞系及耐药亚系均有表达，以耐药细胞表达明显增多；ELISA及点印迹实验证实在表达MGr1-Ag的细胞培养上清中均可检测到MGr1-Ag；耐药细胞PKCα与MGr1-Ag的相关表达较药敏细胞明显增强；单克隆抗体MGr1-1与耐药细胞共同孵育后，耐药细胞PKC的活性减低，以细胞质的PKC降低较明显. 结论 MGr1-Ag可能是一种分泌蛋白，MGr1-Ag维持SGC7901/VCR耐药细胞系的耐药表型可受PKC信号转导通路的调节.

缺氧通过HIF-1依赖的MGr1-Ag介导胃癌多药耐药的机制研究

我们前期的研究结果发现缺氧诱导因子（hypoxia—inducible factor-1，HIF-1）能够促进胃癌的多药耐药表型。MGr1—Ag／37LRP是本实验室前期发现的一个新的耐药相关新分子。基于前期的研究，我们提出假设：MGr1—Ag／37LRP参与了缺氧条件下HIF-1依赖的胃癌多药耐药表型。首先，MTT和流式细胞仪检测凋亡结果显示利用siRNA抑制MGr1—Ag／37LRP的表达能够显著逆转缺氧诱导的胃癌多药耐药。

ERK/MAPK信号途径参与缺氧诱导MGr1-Ag/37LRP的表达及其在胃癌中抵抗凋亡的机制

我们在前期的研究中证实缺氧通过缺氧诱导因子1（hypoxia—inducible factor，HIF—1）的活化，上调MGr1—Ag／37LRP的表达，从而抑制化疗药物诱导的凋亡，参与了胃癌细胞的多药耐药。本研究旨在探讨细胞外调节激酶1／2（extracellular—regulated kinase，ERK1／2）在缺氧诱导MGr—Ag／37LRP表达中的机制。

罗格列酮逆转丝裂霉素对人胃癌SGC7901/VCR祼鼠移植瘤耐药作用的研究

目的探讨PPARγ激动剂罗格列酮(ROS)逆转人胃癌SGC7901/VCR细胞裸鼠移植瘤对丝裂霉素(MMC)的耐药作用及其可能机制。方法建立人胃癌SGC7901/VCR细胞裸鼠移植瘤模型,将48只裸鼠随机分为6组:空白对照组(生理盐水0.2 ml)、MMC组(MMC 2.5 mg/kg)、ROS组(ROS 100 mg/kg)、MMC+ROS中剂量组(MMC2.5 mg/kg+ROS 50 mg/kg)、MMC+ROS高剂量组(MMC 2.5 mg/kg+ROS 100 mg/kg)、MMC+CSA组(MMC 2.5 mg/kg+CSA 50 mg/kg)。每组8只裸鼠;用药40天后,观察各组裸鼠体重和移植瘤体积变化,计算抑瘤率,绘制移植瘤的生长曲线;Western-blot法检测P-gp和MGr1-Ag蛋白的表达。结果空白对照组、MMC组移植瘤瘤体积和抑瘤率差异无显著性,ROS组、MMC+ROS中剂量组、MMC+ROS高剂量组组、MMC+CSA组与空白对照组、MMC组比较,移植瘤瘤体积和抑瘤率差异有显著性。空白对照组、MMC组中P-gp、MGr1-Ag蛋白表达最强,ROS组、MMC+ROS中剂量组、MMC+ROS大剂量组、MMC+CSA组与空白对照组和MMC组P-gp、MGr1-Ag蛋白表达比较有统计学意义(P<0.05),MMC+ROS大剂量组、MMC+CSA组中其表达最弱,组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论罗格列酮可抑制人胃癌SGC7901/VCR细胞祼鼠移植瘤瘤体生长,罗格列酮可下调人胃癌SGC7901/VCR细胞裸鼠移植瘤组织中P-gp和MGr1-Ag蛋白的表达。罗格列酮可部分逆转人胃癌SGC7901/VCR细胞祼鼠移植瘤对丝裂霉素的耐药性。