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MHC-Ⅰ类链相关基因A真核表达载体的构建及稳定转染舌鳞癌细胞的实验研究 被引量:7
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作者 李超 杨丹 +4 位作者 石芳琼 李跃辉 陈新群 翦新春 蒋灿华 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期437-441,共5页
目的构建人类MHC-Ⅰ类链相关基因A(MICA)的真核表达载体,转染人舌鳞癌脑高转移Tca8113-Tb细胞,建立稳定过表达MICA基因的口腔鳞癌细胞系。方法采用PCR技术扩增pCMV-SPORT6-MICA中编码MICA基因的cDNA序列,重组至有绿色荧光蛋白标记的真... 目的构建人类MHC-Ⅰ类链相关基因A(MICA)的真核表达载体,转染人舌鳞癌脑高转移Tca8113-Tb细胞,建立稳定过表达MICA基因的口腔鳞癌细胞系。方法采用PCR技术扩增pCMV-SPORT6-MICA中编码MICA基因的cDNA序列,重组至有绿色荧光蛋白标记的真核表达载体pEGFP-N1,构建最终的表达载体pEGFP-N1-MICA,脂质体法转染Tca8113-Tb细胞,G418筛选,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,有限稀释法建立稳定过表达MICA基因的Tca8113-Tb细胞系,RT-PCR、real time PCR和免疫细胞化学检测MICA在该细胞中的表达。结果通过PCR技术获取了MICA基因并成功克隆入载体,测序鉴定该序列与GenBank中的序列相同。转染的细胞可见绿色荧光蛋白表达,RT-PCR、real time PCR及免疫细胞化学检测到目的基因MICA在转染细胞中为过表达。结论 pEGFP-N1-MICA真核表达载体的成功构建与稳定转染Tca8113-Tb细胞系的建立,为进一步研究该基因的功能奠定了良好的实验基础。 展开更多
关键词 mhc-ⅰ类链相关基因a Tca8113-Tb细胞系 质粒构建 基因转染
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湖南地区白血病MHC-Ⅰ类链相关基因A微卫星多态性分析 被引量:1
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作者 李立新 田伟 +1 位作者 罗奇志 王帆 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期129-130,133,共3页
目的:探讨MHC-Ⅰ类相关链基因A(MHC class-Ⅰchain related gene A,MICA)与湖南地区白血病之间的相关性。方法:应用荧光聚合酶链反应-基因扫描技术和聚合酶链反应-序列特异性引物技术分析,对62例白血病患者和112名正常人群进行MICA基因... 目的:探讨MHC-Ⅰ类相关链基因A(MHC class-Ⅰchain related gene A,MICA)与湖南地区白血病之间的相关性。方法:应用荧光聚合酶链反应-基因扫描技术和聚合酶链反应-序列特异性引物技术分析,对62例白血病患者和112名正常人群进行MICA基因第5外显子微卫星等位基因分型及MICA基因缺失检测。结果:慢性粒细胞白血病组(n=35)的MICA*A5基因频率显著低于正常对照组(RR=0.635,P=0.0380);急性淋巴细胞性白血病组(n=13)的MICA*A4基因频率显著低于正常对照组(RR=0.120,P=0.0297);而在急性非淋巴细胞性白血病组(n=14),MICA*A5基因频率显著高于正常对照组(RR=2.229,P=0.0218)。结论:本文数据显示,MICA-STR多态性与湖南地区白血病之间存在相关性;不同病理类型的白血病相关格局有所不同。 展开更多
关键词 白血病 mhc-相关基因a 微卫星等位基因 相关
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MHC-Ⅰ类链相关基因A修饰的口腔鳞癌细胞疫苗诱导抗肿瘤免疫应答的实验研究
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作者 李超 石芳琼 +3 位作者 王洁 杨丹 翦新春 蒋灿华 《上海口腔医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期1-5,共5页
目的:研究MHC-Ⅰ类链相关基因A(MHC classⅠchain-related gene A,MICA)修饰的口腔鳞癌疫苗诱导机体抗肿瘤免疫应答的有效性并探讨其作用机制。方法:灭活稳定转染MICA基因的口腔鳞癌细胞,制备成肿瘤疫苗,通过腹腔注射严重联合免疫缺陷(s... 目的:研究MHC-Ⅰ类链相关基因A(MHC classⅠchain-related gene A,MICA)修饰的口腔鳞癌疫苗诱导机体抗肿瘤免疫应答的有效性并探讨其作用机制。方法:灭活稳定转染MICA基因的口腔鳞癌细胞,制备成肿瘤疫苗,通过腹腔注射严重联合免疫缺陷(severe combined immunodeficiency,SCID)鼠,观察其对皮下移植瘤生长的抑制作用;应用流式细胞术和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放法检测免疫重建荷瘤SCID鼠外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)和脾细胞表面NKG2D的表达及对肿瘤靶细胞的杀伤活性。采用SPSS16.0软件包对数据进行统计学处理。结果:转染MICA基因的口腔鳞癌疫苗能显著抑制免疫重建荷瘤SCID鼠皮下移植瘤的生长,上调PBMC和脾细胞表面NKG2D的表达,并增强对肿瘤靶细胞的杀伤活性,与未转染组及转染空白载体组比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:过表达MICA蛋白的口腔鳞癌疫苗能显著增强机体的抗肿瘤免疫应答能力,MICA有望作为口腔鳞癌免疫基因治疗的潜在靶标。 展开更多
关键词 口腔 鳞状细胞癌 mhc-相关蛋白A 肿瘤疫苗 基因治疗
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湖南地区鼻咽癌MHC-Ⅰ类链相关基因A第5外显子微卫星多态性研究 被引量:4
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作者 田伟 罗奇志 +4 位作者 李立新 金和坤 王帆 郭实士 曹亚 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期309-312,共4页
目的研究MHCⅠ类链相关基因A(MHCclassⅠchainrelatedgeneA,MICA)第5外显子微卫星多态性与湖南地区鼻咽癌之间的相关性。方法应用荧光聚合酶链反应基因扫描技术和聚合酶链反应序列特异性引物技术分析127例湖南地区鼻咽癌患者和112名正... 目的研究MHCⅠ类链相关基因A(MHCclassⅠchainrelatedgeneA,MICA)第5外显子微卫星多态性与湖南地区鼻咽癌之间的相关性。方法应用荧光聚合酶链反应基因扫描技术和聚合酶链反应序列特异性引物技术分析127例湖南地区鼻咽癌患者和112名正常人群MICA基因第5外显子微卫星等位基因及MICA基因缺失(MICADel)频率。结果MICAA9表型频率在患者组(45/127)高于对照组(20/112),相对风险值(relativerisk)为2.524(P=0.001,Pc=0.006);MICAA5.1表型频率在患者组(51/127)低于对照组(69/112),相对风险值为0.418(P=0.0004,Pc=0.0026)。进一步分析发现,MICAA9在男性患者组的表型频率(35/101)高于男性对照组(11/78),相对风险值为3.23(P=0.00095,Pc=0.006);MICAA5.1在男性患者组的表型频率(39/101)低于男性对照组(49/78),相对风险值为0.372(P=0.0007,Pc=0.004);各MICASTR等位基因频率在女性患者组与女性对照组之间的差异无统计学意义(Pc>0.05)。结论湖南地区MICASTR等位基因多态性与鼻咽癌相关,MICAA9是该人群男性个体的一个鼻咽癌遗传易感标记。 展开更多
关键词 湖南 鼻咽癌 mhc-ⅰ类链相关基因a 第5外显子 微卫星多态性 遗传因素
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肾移植受者术前主要组织相容性复合物Ⅰ类链相关基因A抗体对移植后早期急性排斥反应的影响 被引量:4
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作者 于立新 张新科 +4 位作者 罗敏 肖露露 徐健 杜传福 刘如敏 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期651-654,共4页
目的探讨肾移植受者术前主要组织相容性复合物Ⅰ类链相关基因A(MICA)抗体对肾移植术后早期急性排斥反应和移植肾功能恢复的影响。方法检测2009年~2010年本院197例未使用免疫抑制剂的肾移植受者术前MICA抗体及其特异性,随访其后接受尸... 目的探讨肾移植受者术前主要组织相容性复合物Ⅰ类链相关基因A(MICA)抗体对肾移植术后早期急性排斥反应和移植肾功能恢复的影响。方法检测2009年~2010年本院197例未使用免疫抑制剂的肾移植受者术前MICA抗体及其特异性,随访其后接受尸体肾移植手术的139例受者的术后早期急性排斥反应(AR)和移植肾功能。结果 197例肾移植受者术前MICA抗体阳性45例(22.84%)。MICA抗体特异性分析发现有11种抗体,其中出现频率最高的是抗MICA019(占65.7%),出现频率最低的是抗MICA015(占8.6%)和抗MICA017(占8.6%),高、低频率抗体间的差异具有显著性(χ2=24.48,P〈0.01)。45例阳性受者中单一特异性抗体18例(占51.4%),多种特异性抗体17例(占48.6%)。197例受者中139例在术后有39例发生早期AR(占28.1%);其中,45例术前MICA抗体阳性受者中38例接受移植后有14例发生早期AR(占36.8%);152例术前MICA抗体阴性受者中有101例接受移植后有25例发生了早期AR(占24.8%)。结论中国人群中最常见的MICA抗体中为抗MICA019,推测MICA019为中国人群中较常见基因是其表现出临床上高频率抗体的原因。 展开更多
关键词 肾移植 急性排斥反应 主要组织相容性复合物相关基因a 抗体
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口腔鳞癌细胞过表达MHC-Ⅰ类链相关蛋白A对自然杀伤细胞与细胞毒性T淋巴细胞杀伤活性影响的实验研究 被引量:1
6
作者 李超 石芳琼 +3 位作者 杨丹 王洁 翦新春 蒋灿华 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期32-35,共4页
目的探讨口腔鳞癌细胞过表达MHC-Ⅰ类链相关蛋白A(MICA)对自然杀伤细胞(NK)与细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性的影响。方法通过绘制细胞生长曲线、检测细胞周期、进行平板集落形成率及裸鼠皮下成瘤等方法对稳定转染并过表达MICA的口腔... 目的探讨口腔鳞癌细胞过表达MHC-Ⅰ类链相关蛋白A(MICA)对自然杀伤细胞(NK)与细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性的影响。方法通过绘制细胞生长曲线、检测细胞周期、进行平板集落形成率及裸鼠皮下成瘤等方法对稳定转染并过表达MICA的口腔鳞癌细胞株进行生物学特性鉴定。采用乳酸脱氢酶释放法及流式细胞术分析口腔鳞癌细胞过表达MICA对NK与CTL细胞杀伤活性及自然杀伤细胞2族成员D(NKG2D)受体表达的影响。结果口腔鳞癌细胞转染MICA基因后主要生物学特性未发生改变,但能显著增强NK与CTL细胞杀伤活性并上调其表面NKG2D的表达,与未转染及转染空白载体的细胞比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MICA可作为口腔鳞癌免疫基因治疗的潜在靶标,值得进一步研究。 展开更多
关键词 口腔 鳞状细胞癌 mhc-相关蛋白A 杀伤活性 基因治疗
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携带非A5.1型MHC-Ⅰ类相关分子A穿膜区等位基因中晚期食管癌患者对NK细胞免疫治疗的敏感性高 被引量:1
7
作者 周智锋 王玲 +4 位作者 林万松 陈淑萍 李洁羽 叶韵斌 郑庆丰 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期639-644,共6页
目的:探讨非A5.1型MHC-Ⅰ类相关分子A(MHC classⅠ-related molecules A,MICA)穿膜区等位基因对中晚期食管癌患者术后化疗联合NK细胞免疫治疗疗效的影响。方法:选取福建省肿瘤医院2013年4月至2015年10月收治的中晚期(TNMⅢ-Ⅳa期)食管... 目的:探讨非A5.1型MHC-Ⅰ类相关分子A(MHC classⅠ-related molecules A,MICA)穿膜区等位基因对中晚期食管癌患者术后化疗联合NK细胞免疫治疗疗效的影响。方法:选取福建省肿瘤医院2013年4月至2015年10月收治的中晚期(TNMⅢ-Ⅳa期)食管癌患者152例,均在姑息性手术后行全身化疗,根据患者MICA穿膜区等位基因是否为A5.1分为4组:(1)A5.1化疗+NK细胞治疗(A5.1+NK)组;(2)A5.1单纯化疗(A5.1)组;(3)非A5.1化疗+NK细胞治疗(no A5.1+NK)组;(4)非A5.1单纯化疗(no A5.1)组,观察各组患者临床疗效。构建食管癌组织标本MICA等位基因A5.1的真核表达载体p TE-1A5.1,转染食管癌TE-1细胞株;Western blotting检测p TE-1A5.1转染对TE-1细胞MICA蛋白表达的影响,LDH法检测TE-1细胞转染p TE-1A5.1前后对NK细胞杀伤敏感性的变化,ELISA法检测食管癌患者血清可溶性MICA及转染p TE-1A5.1前后TE-1细胞上清中可溶性MICA含量。结果:经过3年的随防,A5.1+NK组患者中位总生存期(medium overall survival,m OS)为15.0个月,A5.1组为16.0个月,no A5.1+NK组为22.4个月,no A5.1组为16.0个月,no A5.1+NK组m OS明显长于其他3组(P<0.05)。经Cox多因素回归分析发现,患者年龄、性别、ECOG评分及基因型与预后均无明显相关(P>0.05),将基因类型与是否NK细胞治疗进行交叉分析,no A5.1+NK组m OS明显长于其他3组(P<0.01)。转染p TE-1A5.1后TE-1细胞内MICA表达显著升高,培养液上清可溶性MICA分泌明显增加[(256.2±45.3)vs(45.3±11.5)pg/ml,P<0.01];与转染前相比,NK细胞对过表达MICA的TE-1细胞的杀伤率明显降低[(29.5±7.2)%vs(42.5±7.1)%,P<0.05]。结论:相对中晚期食管癌MICA穿膜区A5.1等位基因患者,非A5.1基因患者手术后化疗联合NK细胞的疗效较好,其机制与其不容易产生可溶性MICA密切相关。 展开更多
关键词 食管癌 A5.1型mhc-相关分子A MICA等位基因 免疫治疗
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肾癌患者血清中可溶性人类主要组织相容性复合体Ⅰ类链相关基因A蛋白的表达和临床意义 被引量:2
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作者 杨丰强 刘敏 +4 位作者 朱凯 郭长城 罗俊 王吉娇 郑军华 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期612-615,共4页
目的探讨血清中可溶性人类主要组织相容性复合体Ⅰ类链相关基因A蛋白(sMICA)检测对肾癌患者的临床诊断价值。方法应用酶联免疫吸附试验测定40例肾癌患者(肾癌组)手术前后和40名健康者(对照组)的血清sMICA水平,并对血清sMICA水平与临床... 目的探讨血清中可溶性人类主要组织相容性复合体Ⅰ类链相关基因A蛋白(sMICA)检测对肾癌患者的临床诊断价值。方法应用酶联免疫吸附试验测定40例肾癌患者(肾癌组)手术前后和40名健康者(对照组)的血清sMICA水平,并对血清sMICA水平与临床特征的关系进行分析。结果肾癌组术前的血清sMICA水平为(366.15±27.89)pg/mL,显著高于对照组的(214.03±22.15)pg/mL(P<0.01)。肾癌组术后的血清sMICA水平为(229.18±45.54)pg/mL,显著低于术前水平(P<0.01),与对照组的差异无统计学意义(P>0.05)。肿瘤TNM分期中Ⅲ期和Ⅳ期肾癌患者的血清sMICA水平为(443.79±27.21)pg/mL,显著高于Ⅰ期和Ⅱ期患者的(310.68±40.93)pg/mL(P<0.05),而男性与女性患者间、<65岁与≥65岁患者间血清sMlCA水平的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论血清sMICA水平可作为肾癌的一个辅助诊断指标,且其与肾癌患者的免疫功能状态和临床分期有一定的关系。 展开更多
关键词 肾癌 血清可溶性人主要组织相容性复合体相关基因a蛋白 酶联免疫吸附试验
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外源性抗原对内皮细胞MHC-I类链相关基因A表达的影响(英文) 被引量:1
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作者 王云炎 侯建全 +3 位作者 何军 袁晓妮 张江磊 温端改 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2011年第53期9999-10002,共4页
背景:研究表明部分肾移植受者在移植前就产生了MHC-I类链相关基因A(MICA)抗体,包括部分自身抗体,其急性排斥反应发生率明显高于抗体阴性者。目的:探讨外源性抗原对内皮细胞MICA表达的影响。方法:分别以5,10和25μg/L3个剂量,将MICA重组... 背景:研究表明部分肾移植受者在移植前就产生了MHC-I类链相关基因A(MICA)抗体,包括部分自身抗体,其急性排斥反应发生率明显高于抗体阴性者。目的:探讨外源性抗原对内皮细胞MICA表达的影响。方法:分别以5,10和25μg/L3个剂量,将MICA重组蛋白分为M5,M10,M25组,将热休克蛋白分为H5,H10,H25组,对人脐静脉内皮细胞予以诱导培养48h,对照组加入等量的磷酸盐缓冲液。结果与结论:用MICA重组蛋白诱导48h后,各实验组(M5,M10,M25)内皮细胞MICA mRNA和MICA蛋白的表达量与对照组比较均有显著增加(P<0.05)。M5组和M10组MICA mRNA和MICA蛋白均高于M25组(P<0.05)。MICA膜蛋白表达以M10组最高,并与M5组、M25组之间差异有显著性意义(P<0.05)。各实验组(M5,M10,M25)可溶性MICA水平较对照组显著下降(P<0.05)。热休克蛋白组内皮细胞MICA基因的表达和可溶性MICA水平均无明显改变。结果表明外源性MICA抗原能够诱导内皮细胞自身MICA mRNA和蛋白表达上调,尤其是细胞膜蛋白增加明显,但可溶性MICA水平显著下降。 展开更多
关键词 抗原 mhc-I相关基因a 内皮细胞 可溶性MICA 热休克蛋白
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湖南地区HBV患者MHC-I类链相关基因A第五外显子微卫星多态性研究
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作者 梁湘辉 刘文恩 《激光生物学报》 CAS CSCD 2011年第5期600-606,共7页
分别提取湖南汉族人群108例慢性乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)患者、96例HBV携带者和142例健康对照者外周血基因组DNA,利用聚合酶链反应和基因扫描技术分别对它们的主要组织相容性复合体Ⅰ类链相关A(major histocompatibility comple... 分别提取湖南汉族人群108例慢性乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)患者、96例HBV携带者和142例健康对照者外周血基因组DNA,利用聚合酶链反应和基因扫描技术分别对它们的主要组织相容性复合体Ⅰ类链相关A(major histocompatibility complex classⅠchain related A,MICA)基因第5外显子进行微卫星多态性分析;应用DNA测序分析对不同的基因型进行验证,同时应用PCR/SSP技术进行MICA*Del检测,确定MICA基因第5外显子基因型。发现本研究的三组中分别检出A4、A5、A5.1、A6、A9五种等位基因,且以A5和A5.1为主;在HBV携带组和健康对照组中分别检出MICA*Del基因。结果同时显示慢性HBV患者组MICA*A5.1/A9基因型频率、慢性HBV患者组的MICA*A9等位基因频率、慢性HBV患者组MICA*A9表型频率和HBV携带组MICA*A5.1/A9基因型频率均低于相应的健康对照组;而湖南地区汉族人群HBV携带者和慢性HBV患者间的基因型频率、等位基因频率和表型频率无显著性差异;因而推测MICA*A5.1/A9基因型和MICA*A9等位基因可能是抗HBV感染的一种保护性等位基因。为今后进一步研究HBV的感染、预防和治疗提供参考依据。 展开更多
关键词 乙型肝炎 白细胞抗原 MHC—I相关基因a 微卫星DNA
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组织相容性Ⅰ类相关链A位点基因多态性在预判肾移植物排斥中的意义
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作者 何军 侯建全 +6 位作者 袁晓妮 温端改 鲍晓晶 邱桥成 王乾 钟键 李强 《中华细胞与干细胞移植(电子版)》 2009年第2期12-17,共6页
目的研究组织相容性Ⅰ类相关链A位点(MICA)基因多态性和抗MICA特异性抗体在肾移植排斥反应发生中的意义。方法采用免疫磁珠液相芯片技术对40例肾移植患者在移植术前和移植术后1个月、3个月、6个月、1年和2年动态检测抗MICA抗体的特异... 目的研究组织相容性Ⅰ类相关链A位点(MICA)基因多态性和抗MICA特异性抗体在肾移植排斥反应发生中的意义。方法采用免疫磁珠液相芯片技术对40例肾移植患者在移植术前和移植术后1个月、3个月、6个月、1年和2年动态检测抗MICA抗体的特异性和阳性分值的变化,同时采用SSOP方法分析16对肾移植供受者的MICA基因分型,并把MICA基因具有相同抗原表位的特征性分为G1组和G2组。结果在40例肾移植中尸体供肾35例,亲缘活体供肾5例。35例肾移植受者均带肾存活良好,其中33例接受动态随访。移植术前预存抗MICA抗体为12例,其中抗MICA抗体10例、抗HLA-Ⅰ类+MICA抗体2例;4例分为MICA-G1组、6例分为MICA-G2组、2例共为MICA-G1和G2组。16对供受者MICA等位基因频率分布:在MICA-G1组中频率M﹡002最高,M﹡007次之;MICA-G2组中频率M﹡008最高,M﹡009和M﹡019次之。33例移植术后有4例新生抗MICA抗体,3例新生抗HLA抗体,均为抗供者特异性抗体和抗非供者特异性抗体。移植术前预存抗MICA抗体,在移植术后1~2年的动态随访中其特异性均未改变,而抗体的阳性分值呈现高低的变化。12例移植术前预存抗MICA抗体中的3例和抗体阴性1例移植术后发生急性排斥反应,临床表现为发热,尿量减少,肌酐和肾动脉阻力指数升高。33例动态随访资料显示:无论是MICA基因频率分布特点,还是抗MICA特异性抗体类型与排斥反应的关系,M﹡002、M﹡004、M﹡008、M﹡019和M﹡001基因型最常见,但未见MICA﹡012和MICA﹡006基因型。结论移植术前分析供受者的MICA基因多态性,受者的特异性抗体鉴定和特征性分组;移植术后动态监测抗MICA抗体的变化,是肾移植术后预防急性和慢性移植物排斥的重要靶分子。 展开更多
关键词 组织相容性相关A位点分子 基因多态性 抗体 肾移植 排斥
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鸭MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因的克隆、序列分析及表达载体构建 被引量:1
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作者 孙凯 李新生 +5 位作者 崔保安 陈红英 魏战勇 张蕾 宋亚鹏 阮武营 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2010年第2期57-62,共6页
【目的】克隆鸭MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因cDNA序列,构建并鉴定其原核表达质粒pET/DuMHC-Ⅰ。【方法】依据GenBank/DDBJ/EMBL基因库中公布的鸭MHC-Ⅰ基因序列设计1对引物,采用RT-PCR技术从鸳鸯鸭脾脏组织中扩增MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽... 【目的】克隆鸭MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因cDNA序列,构建并鉴定其原核表达质粒pET/DuMHC-Ⅰ。【方法】依据GenBank/DDBJ/EMBL基因库中公布的鸭MHC-Ⅰ基因序列设计1对引物,采用RT-PCR技术从鸳鸯鸭脾脏组织中扩增MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因cDNA,T-A克隆到pGEM-T Easy载体中,并进行测序。通过PCR和酶切的方法,将鸭MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因亚克隆入pET-28a(+)载体,构建重组表达质粒pET/Du MHC-Ⅰ,并进行PCR、NcoⅠ和NotⅠ双酶切及测序鉴定。【结果】测序结果表明,获得了MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因,其长度为813 bp,编码271个氨基酸。MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因与GenBank中登录的鸭MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因序列的同源性为89.4%~91.7%,氨基酸同源性为78.2%~83.7%;与鸡、鹅、鹌鹑、草鱼、狗、猪、鼠和人的MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽氨基酸序列的同源性分别为64.6%,79.3%,59.4%,41.0%,26.6%,45.0%,12.5%和22.1%,这表明MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因存在着种属多样性,且... 展开更多
关键词 mhc-α 胞外区成熟肽基因 原核表达载体
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MHC-I链相关基因A的生物学特性及与疾病的关联 被引量:1
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作者 陈永玲 王昌富 《国际检验医学杂志》 CAS 2006年第5期451-453,共3页
MHC-I链相关基因A(MICA)是近年来发现的一个新基因,位于MHC-I类区域,包含多个基因位点,具有高度多态性。已发现的MICA等位基因多达50余个,不同人群之间MICA各等位基因的分布存在差异。MICA基因所编码分子的表达具有组织特异性,此外还与... MHC-I链相关基因A(MICA)是近年来发现的一个新基因,位于MHC-I类区域,包含多个基因位点,具有高度多态性。已发现的MICA等位基因多达50余个,不同人群之间MICA各等位基因的分布存在差异。MICA基因所编码分子的表达具有组织特异性,此外还与基因型相关,某些基因型的MICA分子在细胞表面表达可出现缺陷。与MHC分子类似,MICA分子在机体中也发挥着一定免疫学作用,MICA分子通过与相应受体NKG2D结合可传递活化信号,活化γδT细胞、NK细胞等参与天然免疫的细胞。研究发现,MICA基因与多种自身免疫病及肿瘤的发病相关,包括白塞氏病、强直性脊柱炎、1型糖尿病、直肠癌和白血病等,并可能参与了肿瘤细胞的免疫逃避机制。 展开更多
关键词 基因 mhc- 分子生物学
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MHCⅠ类链相关蛋白A和基质金属蛋白酶-9在骨肉瘤组织学和血清学中的关系 被引量:1
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作者 卢善明 薛玲 +3 位作者 邓汪东 曹清华 郑惊雷 车丽洪 《中国骨与关节外科》 2009年第3期206-210,共5页
目的探讨MHCⅠ类链相关蛋白A(MHC classⅠchain-related A,MICA)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)在骨肉瘤组织学和血清学中的关系,为研究骨肉瘤组织中MICA蛋白脱落的分子机制提供组织学基础。方法应用免疫组织化... 目的探讨MHCⅠ类链相关蛋白A(MHC classⅠchain-related A,MICA)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)在骨肉瘤组织学和血清学中的关系,为研究骨肉瘤组织中MICA蛋白脱落的分子机制提供组织学基础。方法应用免疫组织化学方法检测16例骨肉瘤中MICA和MMP-9蛋白的表达情况,同时采用酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测16例骨肉瘤患者血清中MICA和MMP-9的含量。结果16例骨肉瘤组织中MICA和MMP-9蛋白的表达率分别为42.5%(7/16)和56.3%(9/16),两者的表达无相关性(r=0.454,P>0.05);骨肉瘤患者血清中可溶性MICA(soluble MICA,sMICA)浓度高于健康人(P<0.05),与血清中MMP-9的浓度无相关性(r=-0.429,P>0.05),但与组织中MICA蛋白表达呈负相关(r= -0.502,P<0.05)。结论骨肉瘤患者血清中sMICA浓度升高,而血清中MMP-9含量对MICA浓度无明显影响;骨肉瘤患者可能存在NKG2D-MICA介导的免疫监视功能障碍,MICA蛋白的脱落可能是骨肉瘤逃避免疫监视的一个新机制。 展开更多
关键词 骨肉瘤 MHC 相关蛋白A MMP-9
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鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链基因的克隆与分子进化分析
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作者 孙凯 李新生 +5 位作者 崔保安 陈红英 魏战勇 张蕾 宋亚鹏 阮武营 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第12期60-63,共4页
根据GenBank中登录(登录号:AB115244)的鸭MHC-Ⅰα链序列设计并合成1对引物,采用RT-PCR技术从鸳鸯鸭脾脏组织中克隆出鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链基因,并进行T-A克隆和序列测定。结果表明,所获得的鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链基因长909bp,编码303个氨基... 根据GenBank中登录(登录号:AB115244)的鸭MHC-Ⅰα链序列设计并合成1对引物,采用RT-PCR技术从鸳鸯鸭脾脏组织中克隆出鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链基因,并进行T-A克隆和序列测定。结果表明,所获得的鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链基因长909bp,编码303个氨基酸的多肽,含一个完整的鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因。序列比较发现,鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链基因与GenBank登录的其它品种的鸭MHC-Ⅰα链核苷酸同源性为89.4%~91.0%,与人和其他动物的MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因的氨基酸同源性为11.1%~79.3%,表明MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因存在着种的多样性,且亲缘关系越近,同源性越高。鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因的成功克隆为进一步研究鸭MHC-Ⅰ基因表达、生物学活性和应用奠定基础。 展开更多
关键词 鸳鸯鸭 mhc-α胞外区成熟肽基因 克隆 序列分析
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主要组织相容性复合体-Ⅰ类分子链相关蛋白A-自然杀伤细胞2族成员D通路及其在头颈部鳞状细胞癌中的研究进展
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作者 李超 蒋灿华 翦新春 《国际口腔医学杂志》 CAS 2011年第1期59-62,共4页
主要组织相容性复合体-Ⅰ类分子链相关蛋白A(MICA)作为自然杀伤细胞2族成员D(NKG2D)的配体,与其特异性结合,活化以自然杀伤细胞为主的免疫效应细胞,发挥免疫监视作用。本文就近5年来有关MICA-NKG2D通路的表达、调控及其在头颈部鳞状细... 主要组织相容性复合体-Ⅰ类分子链相关蛋白A(MICA)作为自然杀伤细胞2族成员D(NKG2D)的配体,与其特异性结合,活化以自然杀伤细胞为主的免疫效应细胞,发挥免疫监视作用。本文就近5年来有关MICA-NKG2D通路的表达、调控及其在头颈部鳞状细胞癌中的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 主要组织相容性复合体-分子相关蛋白A 自然杀伤细胞2族成员D 头颈部 鳞状细胞癌
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骨肉瘤组织中主要组织相容性复合物Ⅰ类链相关A蛋白和基质金属蛋白酶-9的关系
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作者 卢善明 薛玲 +2 位作者 邓汪东 曹清华 车丽洪 《汕头大学医学院学报》 2009年第2期86-88,F0002,共4页
目的:探讨骨肉瘤组织中主要组织相容性复合物Ⅰ类链相关A(MICA)蛋白和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的关系。方法:用免疫组化检测66例骨肉瘤组织中MICA和MMP-9蛋白的表达情况。结果:MICA和MMP-9蛋白在骨肉瘤组织的表达率分别为51.5%和54.5%,... 目的:探讨骨肉瘤组织中主要组织相容性复合物Ⅰ类链相关A(MICA)蛋白和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的关系。方法:用免疫组化检测66例骨肉瘤组织中MICA和MMP-9蛋白的表达情况。结果:MICA和MMP-9蛋白在骨肉瘤组织的表达率分别为51.5%和54.5%,两者在骨肉瘤组织的表达呈正相关(r=0.414,P<0.01)。结论:MICA广泛表达于骨肉瘤组织,其与MMP-9表达可能由相同信号通路调控。 展开更多
关键词 骨肉瘤 主要组织相容性复合物相关A蛋白 基质金属蛋白酶-9
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抑郁症与双相障碍患者血清可溶性主要组织相容性复合体Ⅰ类相关基因B水平研究 被引量:1
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作者 张同同 胡科 +3 位作者 张凯 殷嘉浚 袁建民 王国强 《临床精神医学杂志》 CAS 2021年第4期299-302,共4页
目的:探究抑郁症与双相障碍患者血清可溶性组织相容性复合体I类相关基因B(sMICB)水平变化,以及其与抑郁症状严重程度的相关性。方法:采用对照研究的方法,共招募148名受试者,包括60名正常组、57例抑郁症患者和31例双相障碍患者,用酶联免... 目的:探究抑郁症与双相障碍患者血清可溶性组织相容性复合体I类相关基因B(sMICB)水平变化,以及其与抑郁症状严重程度的相关性。方法:采用对照研究的方法,共招募148名受试者,包括60名正常组、57例抑郁症患者和31例双相障碍患者,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清sMICB水平;完成汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评定。结果:①Kruskal-Wallis H检验显示,抑郁组和正常组之间的sMICB水平差异有统计学差异(P<0.001),双相组和正常组之间的sMICB水平差异无统计学差异(P=0.174),抑郁组与双相组之间的sMICB水平差异有统计学差异(P=0.005);②诊断抑郁症的曲线下面积为0.733,灵敏度为73.3%,特异度为73.7%;③抑郁组和双相组sMICB水平与HAMD得分无显著相关(P>0.05)。结论:抑郁症患者血清sMICB水平低于正常人群,双相障碍患者血清sMICB水平与正常人群无差异。 展开更多
关键词 可溶性主要组织相容性复合体相关基因B 抑郁症 双相障碍
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血清Ⅰ类MHC链相关蛋白A、C-反应蛋白、α1-酸性糖蛋白对恶性妇科肿瘤诊断的临床检测 被引量:2
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作者 杨春 《中外医疗》 2012年第18期176-177,179,共3页
随着分子生物学的进展,当前血清Ⅰ类MHC链相关蛋白A、C-反应蛋白、α1-酸性糖蛋白是用于妇科肿瘤诊断的可行方法。本研究将构建受试者工作特征ROC曲线模型,综合评价血清Ⅰ类MHC链相关蛋白A(MICA)、C-反应蛋白(CRP)、α1-酸性糖蛋白(α1-... 随着分子生物学的进展,当前血清Ⅰ类MHC链相关蛋白A、C-反应蛋白、α1-酸性糖蛋白是用于妇科肿瘤诊断的可行方法。本研究将构建受试者工作特征ROC曲线模型,综合评价血清Ⅰ类MHC链相关蛋白A(MICA)、C-反应蛋白(CRP)、α1-酸性糖蛋白(α1-AG)三种方法诊断恶性妇科肿瘤的效果并进行对比分析,以期为我国恶性妇科肿瘤寻找最佳的实验诊断方法。通过平均值的显著性t检验,可以看出在1%的显著性水平下,恶性妇科肿瘤患者的MICA、CRP、α1-AG指标均显著大于对照组的数值。经过ROC分析,MICA监测AR灵敏度、特异度和AUROC为97.8%、76.2%、0.810;CRP为97.8%、57.1%、0.918;α1-AG为93.5%、95.2%、0.835。ROC曲线下面积反映诊断试验的准确性,实验结果提示AUROC:CRP>α1-AG>MICA。可以认为,相比于其他两种监测方法,CRP的诊断准确性最好,更有助于指导临床的恶性妇科肿瘤的诊断。 展开更多
关键词 血清MHC相关蛋白A C-反应蛋白 Α1-酸性糖蛋白 妇科肿瘤 ROC
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瘢痕疙瘩与HLA-II类基因相关性研究 被引量:2
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作者 陈东明 李生 鲍卫汉 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期589-591,共3页
目的 :探讨免疫遗传学因素在瘢痕疙瘩发病机制中的作用。方法 :用聚合酶链反应 序列特异性引物 (PCR SSP)技术对 5 0例瘢痕疙瘩患者进行HLA Ⅱ类基因分型 ,并以 1 0 0例正常人的HLA Ⅱ类基因为对照。结果 :瘢痕疙瘩组HLA DQ5抗原频率 (... 目的 :探讨免疫遗传学因素在瘢痕疙瘩发病机制中的作用。方法 :用聚合酶链反应 序列特异性引物 (PCR SSP)技术对 5 0例瘢痕疙瘩患者进行HLA Ⅱ类基因分型 ,并以 1 0 0例正常人的HLA Ⅱ类基因为对照。结果 :瘢痕疙瘩组HLA DQ5抗原频率 ( 3 0 % )明显高于对照组 ( 1 4% ) ,相对危险率 (RR) =2 .63 ;HLA DR1 7和HLA DQ8抗原频率 ( 2 % )明显低于对照组 ( 1 4% ,1 5 % ) ,RR =0 .1 3 ,0 .1 2。结论 :瘢痕疙瘩与HLA DQ5基因呈正相关 ,与HLA DR1 7和HLA DQ8基因呈负相关。HLA DQ5、HLA DR1 7和HLA 展开更多
关键词 瘢痕疙瘩 DQ HLA-Ⅱ基因 HLA-DR 对照组 抗原频率 患者 单倍型 相关 聚合酶反应
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