MHC-Ig/肽复合体在实验性自身免疫性葡萄膜炎CTLs研究中的应用

目的探讨MHC-Ig/肽复合体用于小鼠实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)研究的应用价值。方法用人类光感受器间维生素A类结合蛋白(IRBP)合成多肽IRBP161-180免疫B10RⅢ小鼠制备EAU动物模型。将源于IRBP161-180多肽序列的10种不同短肽片段与MHC-Ig多聚体形成复合体,用于检测B10RⅢ小鼠EAU中特异性CTLs。比较各种MHC-Ig/IRBP短肽复合体与CTLs的结合能力,以及刺激CTLs的增殖和IFN-γ的表达水平,并选用对CTLs作用最强的复合体,检测小鼠在EAU不同发病期外周血CTLs的表达情况。结果各MHC-Ig/IRBP短肽复合体能够检测出抗原特异CTLs,其中MHC-Ig/IRBP168-177短肽复合体检测出CTLs的阳性率达12.3%;并且其刺激CTLs的增殖和IFN-γ的表达水平明显高于其它短肽组(P<0.01),可初步推断短肽序列IRBP168-177为该EAU模型特异CTLs主要的抗原识别表位。用MHC-Ig/IRBP168-177短肽复合体检测EAU疾病过程中外周血CTLs的表达发现,EAU在炎症急性期特异性CTLs的阳性表达最高(4.9%±1.1%)。结论MHC-Ig/肽复合体技术,是一种新的定量分析抗原特异性CTLs的方法,能检测抗原特异性CTLs的表达情况,分析CTLs的抗原识别表位,为动物模型EAU的研究提供了高效、特异、敏感的检测手段。

小核RNA激活复合体多肽3基因rs4741506多态性与中国汉族人群缺血性脑卒中及其中医证候的相关性分析

目的探讨中国汉族人群中小核RNA激活复合体多肽3(SNAPC3)基因rs4741506多态性与缺血性脑卒中(IS)及其中医证候的关系。方法选取2016年1月至2019年12月在广西中医药大学第一附属医院脑病科住院治疗的774例IS患者作为观察组,同期本院体检中心的健康体检者以及医院骨科轻症外伤患者793例作为对照组。对IS患者进行中医证候辨证,对SNAPC3基因多态性位点rs4741506进行基因分型检测。建立4种遗传模型,应用PLINK软件和SPSS 21.0软件进行遗传关联及基因位点多态性与IS及其中医证候和患者临床指标的相关性分析。结果观察组与对照组rs4741506位点的基因型频率分布差异有统计学意义(χ^(2)=6.366,P=0.041)。在加性模型、显性模型、隐性模型中,SNAPC3基因rs4741506多态性与IS的发生风险均无显著相关性(均P>0.05)。多因素Logistic回归模型分析结果显示,校正年龄和性别后SNAPC3基因rs4741506多态性与IS风证(隐性模型:比值比=0.45,95%置信区间:0.22~0.92,P=0.029)、痰证(隐性模型:比值比=0.39,95%置信区间:0.19~0.81,P=0.011)发生风险相关,而与血瘀证的发生风险无明显相关性(显性模型:比值比=1.42,95%置信区间:1.00~2.01,P=0.051)。在隐性模型下,校正年龄和性别后SNAPC3基因rs4741506多态性与IS痰证患者舒张压水平相关(β=-10.93,95%置信区间:-20.64~-1.22,P=0.028)。一般线性回归分析结果显示,校正年龄和性别后SNAPC3基因rs4741506多态性与IS痰证患者血清载脂蛋白A1(加性模型、显性模型)、载脂蛋白B(隐性模型)、血小板计数(加性模型、显性模型)水平、凝血酶时间(显性模型)显著相关(均P<0.05)。结论SNAPC3基因rs4741506多态性可能影响IS风证及痰证的发生发展。

离体牙短期应用酪蛋白磷酸多肽钙磷复合体再矿化的实验研究

目的:评价短期应用10%酪蛋白磷酸多肽钙磷复合体(complex of casein phosphopeptide and amorphous calcium phosphate,CPP-ACP)(商品名:Tooth Mousse护牙素)离体牙釉质片再矿化的功效。方法:将正畸需要拔出的离体前磨牙15颗从冠根向一分为二,共30个实验样本,用自凝材料包埋于塑料圈内,根据扫描电镜样品的要求打磨抛光,抛光后的牙釉质面积为3mm×3mm。用数字随机表的方法随机分成4个实验组和1个对照组,每组6个。对照组是用37.5%磷酸酸蚀浸泡牙釉质2 min后不用护牙素浸泡,实验组均用37.5%磷酸酸蚀浸泡牙釉质2min后分别用Tooth Mousse护牙素涂搽牙面30 min,置于蒸馏水中浸泡。每组浸泡的时间逐步累加,A、B、C、D实验组分别浸泡时间为1、5、10、20h。每组待第2天在同一时间涂搽护牙素及在蒸馏水中浸泡的步骤同第1天,每天更换蒸馏水一次。每组连续作用5次。扫描电镜观察及用能谱检测钙的质量分数,统计分析各组釉柱再矿化与浸泡时间的关系。结果:A、B、C、D实验组釉质表面钙质量分数是(67.38±0.89、67.63±0.56、67.71±0.52、69.11±0.27)和酸蚀组65.74±0.74之间的差异有统计学意义(F=21.568,P=0.000<0.01);用(Student-Newman-Keuls)法做多组间样本均数的两两统计比较分析,A、B、C组间差异均无统计学意义(P>0.05);D实验组与A、B、C组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:Tooth Mousse护牙素体外实验在蒸馏水环境中多次短时间每天20h浸泡离体牙釉质在减少脱矿和促进再矿化方面较实验其余3组作用显著。

绿豆多肽化橘红复合解酒饮料的制备及其体外解酒作用

本文探索了绿豆多肽化橘红复合解酒饮料(绿橘解酒饮,MECIB)的最佳制备方案,获得了关键工艺因素。以饮料感官评价标准为指标,通过单因素实验设计,考察绿豆多肽、化橘红浓缩汁、罗汉果甜、柠檬酸不同添加量对绿橘解酒饮感官品质的影响趋势,采用Box-Behnken响应面法探讨了绿橘解酒饮的最佳配比参数:绿豆多肽添加量为14.01%、化橘红浓缩汁添加量为9.84%、罗汉果甜添加量为0.05%、柠檬酸添加量为0.156%,感官评分为(94.64±1.28)分,与预测值94.99分相差0.37%,该法制备的绿橘解酒饮感官品质较好,同时绿橘解酒饮显示出较强的体外乙醇脱氢酶(ADH)激活率和抗氧化活性,具有一定的解酒作用。

植物中新生多肽结合复合体研究进展

新生多肽结合复合体(nascent polypeptide-associated complex,NAC)是由α和β共2个亚基组成的异源二聚体复合物,广泛存在于细胞质中。NAC在古细菌、酵母和动植物中均有分布,且具有保守结构域,说明NAC在生物体生长发育过程中具有重要作用。目前,对动物和人中NAC的报道较多,但植物中NAC的生物学功能研究较少。主要介绍了NAC的发现、不同物种中NAC的分类及结构,并且对植物中NAC的生物学功能研究进行了总结归纳。

主要组织相容性复合体-肽四聚体技术及其在定量检测抗原特异性T细胞中的应用

四聚体(tetramer)技术是近来发展的一种可直接检测抗原特异性T细胞(antigen specific Tcells,AST)的新方法,在病毒感染、肿瘤、自身免疫病研究及抗原肽免疫优势表位筛选中有着广阔的应用前景。文章简要介绍主要组织相容性复合体(MHC)-抗原肽与T细胞表面受体作用的分子基础、四聚体分子构建及由此衍生的四聚体方法技术类型,并就该技术应用于临床疾病的AST研究现状进行综述。

全麻复合硬膜外阻滞对体外循环病人血浆内皮素、心钠肽和肌钙蛋白Ⅰ的影响

目的研究全麻复合硬膜外阻滞及术后硬膜外镇痛对换瓣病人血浆内皮素(ET)、心钠肽(ANP)和肌钙蛋白Ⅰ(CnT-Ⅰ)的影响。方法20例行二尖瓣置换术病人随机分成异氟醚吸入全麻复合硬膜外组(GEA组)和异氟醚吸入全麻组(GA组)。GEA组行硬膜外镇痛,GA组行术后静脉镇痛。观察麻醉前、手术后4、24、72h及第7天血浆ET、ANP和CnT-Ⅰ的变化水平。结果术后第1、3天两组病人的ET浓度较麻醉前均有显著性降低(P<0·05),GEA组降低的幅度明显大于GA组(P<0·05);GA组病人的ANP自术后第1天起显著升高(P<0·05),GEA组则无明显变化(P>0·05);两组病人的CnT-Ⅰ水平在术后4h及术后第1天均较术前显著性增高(P<0·05),但组间无显著性差异;GEA组病人术后清醒及拔管时间明显均早于GA组(P<0·05)。结论全麻复合硬膜外阻滞能有效降低血浆ET及ANP的水平,促进病人术后恢复。

成年大鼠Pre-Btzinger复合体5-羟色胺样阳性神经纤维与神经激肽1受体样阳性神经元的关系

位于新生和成年哺乳动物延髓腹外侧区的Pre-Bo¨tzinger复合体(pre-Bo¨tzinger complex,PBC)被认为是呼吸节律产生中枢,神经激肽1受体(neurokinin-1receptor,NK1R)是PBC神经元的主要标记物。5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT或seroto-nin)作为一种重要的神经递质,可通过其受体调节呼吸中枢的节律性变化。本研究采用免疫荧光组织化学和免疫电镜双重标记技术,在激光共聚焦显微镜和电子显微镜下观察了大鼠PBC内5-HT样免疫阳性神经纤维与NK1R样免疫阳性神经元或NK1R免疫阴性神经元之间的关系,旨在为5-HT参与PBC神经元呼吸节律的产生和调控提供形态学依据。共聚焦显微镜结果显示:正常大鼠PBC内可观察到一定数量的5-HT样阳性纤维和终末,且有少量的阳性纤维和终末与PBC内NK1R样阳性神经元的胞体或树突形成密切接触。在电镜下可进一步观察到:5-HT样阳性纤维终末可与NK1R样阳性神经元的树突形成直接接触,但未观察到典型的突触联系。5-HT样阳性纤维终末可与NK1R免疫阴性的树突形成非对称性突触。本实验结果提示:5-HT可能通过旁分泌的方式或通过中间神经元间接调节PBC内NK1R样阳性神经元的活动,以实现对中枢呼吸节律的调控。

离体年轻恒牙片短期应用酪蛋白磷酸多肽钙磷复合体再矿化的实验研究

目的评价短期应用10%酪蛋白磷酸多肽钙磷复合体(CPP-ACP;商品名:Tooth Mousse护牙素)离体牙釉质再矿化的效果。方法将离体前磨牙制成牙釉质牙片作为标本,天平称重后用37.5%磷酸酸蚀浸泡2 min,吹干5 min后用天平称重。再将酸蚀后的牙片用Tooth Mousse护牙素涂搽牙面30 min,在蒸馏水中浸泡1 h,吹干5 min后用天平称重。依据作用时间的不同分为A^L等12个组。统计分析各实验组与酸蚀组浸泡后重量与时间的关系。结果经统计分析各组浸泡后的平均重量与对照组之间差异无统计学意义(P>0.05),各组组间比较差异也无统计学意义(P>0.05)。结论 Tooth Mousse护牙素的再矿化作用不是直线上升的而是呈曲线上升。

酪蛋白磷酸多肽钙磷复合体在口腔治疗中的研究进展

氟化物长期应用于抗龋的治疗,但在使用过程中如果剂量控制不好使用过量易出现氟斑牙、氟骨症等并发症[1].目前,国内外学者都在致力于研究安全、有效的防龋用品.自从20世纪90年代科学家在小鼠龋模型中发现奶制品具有抗龋作用后,澳大利亚墨尔本牙科学院研究人员从牛奶中提取出了一种生物活性肽—酪蛋白磷酸多肽钙磷复合体（complex of casein phosphopeptide and amorphous calcium phosphate,CPP-ACP）,日本GC公司把它进一步提炼,进而有了Tooth Mousse护牙素,它是一种新型的口腔抗龋用品[2].护牙素在基础研究中的再矿化原理和临床中防龋再矿化的疗效和机理是研究关注的核心,下面就目前的一些研究成果综述如下.

酪蛋白磷酸多肽钙磷复合体在口腔治疗中的研究进展

口腔的防龋保健作用及意义逐渐受到人们的关注。氟化物长期应用于抗龋的治疗,由于用量无法控制较易出现不良并发症。而酪蛋白磷酸多肽钙磷复合体作为一种新型的口腔抗龋用品,具有较好的再矿化作用,安全、有效、操作方便。该文就酪蛋白磷酸多肽钙磷复合体的结构特点、再矿化和对致龋菌的作用以及最新的临床研究等进行综述。

主要组织相容性复合体-T细胞受体与病毒抗原肽

近年来有关主要组织相容性复合体-T细胞受体(MHC-TCR)与病毒抗原肽复合体的研究进展迅速,三者之间在空间结构上相互识别和结合,可以诱导病毒特异性CD8^+CTL的产生,有可能利用病毒抗原肽作疫苗,清除胞内病毒颗粒。

预先形成的重链二硫键有助于HLA-A2-抗原肽复合物体外折叠

目的: 提高可溶性HLA -A2 肽复合物体外折叠效率。方法: 在变性非还原条件下提取原核表达的HLA重链(HC)。通过离子交换及硫酸铵沉淀初步纯化后, 在β2微球蛋白(β2m)及特异性抗原肽 (Try369-377 )存在的情况下, 于pH6. 6的折叠缓冲体系中稀释复性。利用Westernblot及ELISA检测折叠产物。结果: 折叠复合物中主要含有HLA-A2 抗原肽复合物和β2m, 较少含有HC聚合体; 折叠效率较传统方法提高 2. 5倍。结论: 通过与传统方法作比较, 证实此法折叠效率比传统方法高, 为进一步HLA 肽四聚体及人工抗原提呈细胞的制备可提供足够可溶性的HLA -A2 肽单体。

还原型谷胱甘肽合用粉防己碱对帕金森病大鼠脑线粒体酶复合体I及活性氧的影响

目的观察还原型谷胱甘肽(GSH)合用粉防己碱(Tet)对帕金森病(PD)大鼠氧化应激水平的影响并探讨其作用机制。方法应用6-羟基多巴立体定向注射制作PD大鼠模型,将成功大鼠模型随机分为模型组、GSH组、GSH+Tet组、左旋多巴组,另设正常对照组,给药50d后测定鼠脑黑质线粒体酶复合体I活性及纹状体活性氧(R0S)含量。结果GSH+Tet对PD大鼠黑质线粒体酶复合体I有保护作用,GSH+Tet能明显降低PD大鼠纹状体活性氧(R0S)水平。结论GSH+Tet能减轻PD大鼠黑质及纹状体氧化应激损伤,并对线粒体呼吸链有一定保护作用。

酪蛋白磷酸多肽钙磷复合体的应用顺序对乳牙牙本质粘结强度的影响

目的探讨酪蛋白磷酸多肽钙磷复合体(casein phosphopetide-amorphic calcium phosphat, CPP-ACP)应用顺序对乳牙牙本质粘结强度及对乳牙牙本质小管封闭作用的影响。方法选取人56颗无龋乳磨牙,磨除牙合面釉质,制备牙本质平面。将其中48颗乳磨牙随机分3大组(n=16)。A组:仅酸蚀15 s。B组:涂CPP-ACP后酸蚀15 s。C组:酸蚀15 s后涂CPP-ACP。各组分为2小组(n=8),其中AN,BN,CN组使用Prime&Bond NT(NT)全酸蚀粘结剂,AS,BS,CS组使用Single bond 2(SB2)全酸蚀粘结剂。制作树脂粘结试件,电子万能试验机测定剪切强度(SBS值)。其余8个乳磨牙随机分成4组(n=2),分别为空白组(S1组)、酸蚀组(S2组)、酸蚀后涂CPP-ACP组(S3组)、涂CPP-ACP后酸蚀组(S4组)分别用扫描电镜观察粘结前牙本质小管封闭情况。结果剪切实验结果为AN组、BN组、CN组剪切强度无统计学差异(P>0.05);AS组,BS组,CS组剪切强度也无统计学差异(P>0.05);AN组>AS组,BN组>BS组,CN组>CS组差异有统计学意义(P<0.05)。扫描电镜结果为S3组中牙本质小管封闭数目最多。结论在酸蚀后应用CPP-ACP处理乳牙牙本质不影响NT和SB2两种全酸蚀粘结剂的粘结强度;可以达到有效的牙本质小管封闭;Prime&Bond NT(NT)全酸蚀粘结系统的粘结强度高于Single bond 2(SB2)。

MHC-Ⅰ类肽组装复合体组分重要性的定量分析(英文)

TAP2、tapasin和calreticulin(CRT)是MHC-Ⅰ类内源性抗原加工和递呈途径肽组装复合体(PLC)中的3个重要蛋白质.虽然对于肽组装复合体及其单个蛋白组分在抗原加工递呈中的作用,国内外已有大量的研究,但是由于研究手段的缺乏,其在复合体中的相对重要性还未得到清楚和定量的分析.本文中我们建立了一种新型的抗原递送方法,利用猪链球菌溶血酶(SLY)对鼠纤维母细胞系K41及其CRT缺陷细胞系K42、tapasin缺陷细胞系90a及tapasin、TAP2双缺陷细胞系91a进行穿孔并定量递送入鸡卵清白蛋白(ovalbumin,OVA),使其被内源性加工处理后的多肽SIINFEKL与小鼠H2-Kb装配成复合物并被递呈至细胞表面.通过利用小鼠T杂交瘤细胞B3Z和单克隆抗体25D1.16识别并检测不同细胞表面SIINFEKL与小鼠H2-Kb复合物,我们发现CRT缺陷细胞系K42的抗原提呈能力相比91a及90a,较K41有着更大幅度的下降,说明CRT在提呈过程中可能有着较预期更重要的作用.本文是首个对抗原递呈途径蛋白相对重要性的研究,其研究结果对于进一步研究MHC-Ⅰ类抗原加工和递呈途径相关蛋白的作用提供了理论依据与研究手段.

金特异性结合短肽介导的重组杆状病毒与胶体金构成的纳米复合体

纳米金在生物探针方面的应用技术是重要的研究方向,这一技术的关键在于纳米金与生物分子有效的结合,本文通过基因重组策略,研究杆状病毒表面展示技术与金特异结合肽介导的固定化方法联用以构建生物-无机复合材料的可行性。利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统将合成的金特异结合肽基因融合到杆状病毒BmNPV囊膜糖蛋白gp64的N端信号肽与成熟蛋白之间构成转移质粒载体,经过转座得到重组穿梭质粒pFB-gp64-Au,转染Sf9昆虫细胞后收获多角体启动子控制下表达融合蛋白的重组AcMNPV。同时采用硼氢化钠还原法制备得到胶体金,进行组建病毒-胶体金复合结构的初步研究。结果表明,成功构建的重组穿梭质粒转染细胞后得到囊膜表面经金无机结合肽修饰的AcMNPV重组病毒,并通过透射电子显微镜(transmission electron microscopy,TEM)观察到由金特异结合肽所介导的病毒-胶体金的复合结构。这项研究有助于进行生物-无机复合体系构建及纳米材料在生物学领域应用的研究。

胃泌素释放肽前体、循环免疫复合物联合神经元特异性烯醇化酶在小细胞肺癌中的检测价值

目的:探究胃泌素释放肽前体(proGRP)、循环免疫复合物(CIC)联合神经元特异性烯醇化酶(NSE)在小细胞肺癌(SCLC)中的检测价值。方法:选择2018年11月-2021年11月佳木斯大学宏大医院收治的80例SCLC(SCLC组)和80例NSCLC(NSCLC组)患者作为研究对象。采用ELISA法检测两组proGRP水平,采用PEG浊度比色法检测两组CIC水平,采用放射免疫法检测两组NSE水平。比较两组三项指标水平,采用受试者工作特征(receiver operator characteristic,ROC)曲线对三种肿瘤标志物诊断SCLC的效能进行检测。结果:SCLC组的proGRP、CIC及NSE水平均高于NSCLC组(P<0.05)。proGRP、CIC、NSE单独检测的ROC曲线位置相差不多,对SCLC诊断均具有较好的敏感度和特异度,三者联合检测AUC均显著大于CIC、NSE,proGRP单独检测,差异均有统计学意义(Z_(CIC)=2.141,P<0.05;Z_(NSE)=2.813,P<0.05;Z_(proGRP)=3.309,P<0.05)。结论:proGRP、CIC及NSE联合检测对SCLC的诊断价值较高,可作为SCLC早期诊断的指标。

酪蛋白磷酸多肽钙磷复合体促进牙釉质再矿化的实验探究

探讨酪蛋白磷酸多肽钙磷复合体(casein phosphopeptide-amorphous calcium phosphate, CPP-ACP)促进牙釉质再矿化的功效。方法:经我院2019年1月至2020年3月期间收治的正畸患者的同意,将需拔出的离体牙作为本次研究对象,使用体视镜在选入实验离体牙中筛选釉质表面光滑、无缺损、无脱矿及无裂纹的离体牙10颗。将这10颗实验离体牙自上而下一分为二,共20片牙釉质磨片,尺寸为3mm×3mm×1mm。按随机数字表法将其分为5组,每组4个样本,分别为4个研究组(A~D组)和1个对照组。对照组采用采用37.5%磷酸酸蚀液浸泡2min。研究组采用37.5%磷酸酸蚀液浸泡2min后,使用护牙素涂搽牙面30min,然后放入蒸馏水浸泡。A~D组浸泡时间为1h、5h、10h、20h。使用扫描电镜观察各组的超微结构;使用能谱测定仪观察各组釉质表面钙质量分数。结果:酸蚀组合研究组表面钙质量分数为(65.78±0.31,67.54±0.38,68.03±0.17,68.41±0.44,69.01±0.19),研究组与对照组进行统计学分析,研究各组均优于对照组(P<0.05),组间差异有统计学意义。A、B、C三组相比,其差异无统计学意义(P>0.05), D组与A、B、C三组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CPP-ACP在蒸馏水环境中多个时间段浸泡,20h浸泡时间在减少脱矿合促进再矿化中明显优于其他三组浸泡时间。

酪蛋白磷酸多肽钙氟磷复合体对牙釉质缺损的再矿化( 英文)

目的 :探讨 2 %酪蛋白磷酸多肽钙氟磷复合体 (CPP_ACFP)溶液对牙釉质缺损的再矿化作用。方法 :从人第 3磨牙切取 2 8块釉质块 (每片中制备两条釉质缺损 ) ,随机平分为 4组 ,每组分别于再矿化液中浸泡 1,3,5 ,10天 ,测定矿物质含量。结果 :再矿化率分别为 9 19% ,14 2 7% ,2 9 0 7% ,38 45 %。经One_wayScheffe差异多因素分析比较发现每两组间差异皆有显著性。结论 :CPP_ACFP作为食物及牙膏添加剂 ,在龋病预防中将起重要作用。